| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-25页 |
| 1 环介导等温扩增反应 | 第15-16页 |
| ·环介导等温扩增原理及其在检测中的应用 | 第15页 |
| ·环介导等温扩增体系中的生物分子 | 第15-16页 |
| 2 水相环境中酶的稳定性保持及其失活机制 | 第16-19页 |
| ·维持酶稳定性的结构因素 | 第16-17页 |
| ·酶失活因素及其机制 | 第17-19页 |
| 3 酶的稳定化 | 第19-25页 |
| ·添加稳定剂 | 第19-21页 |
| ·化学修饰 | 第21-22页 |
| ·酶固定化 | 第22-23页 |
| ·蛋白质工程 | 第23-25页 |
| 第二章 冷冻干燥对环介导等温扩增反应试剂 | 第25-36页 |
| 1 材料与方法 | 第26-29页 |
| ·模板的制备 | 第26页 |
| ·引物 | 第26页 |
| ·LAMP 反应体系的配制 | 第26页 |
| ·不同海藻糖浓度对 LAMP 反应体系混合物活性的影响 | 第26-27页 |
| ·不同干燥时间对 LAMP 反应体系混合物活性的影响 | 第27页 |
| ·储藏温度对 LAMP 体系反应混合物活性的影响 | 第27页 |
| ·LAMP 反应产物电泳条带强度的定量分析 | 第27-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-34页 |
| ·不同海藻糖浓度对 LAMP 反应体系活性的影响 | 第29-30页 |
| ·冷冻干燥时间对 LAMP 反应体系活性的影响 | 第30-31页 |
| ·不同海藻糖浓度对冷冻干燥的 LAMP 反应体系经长期保存的影响 | 第31-32页 |
| ·经冷冻干燥的 LAMP 反应体系在 4°C 储藏下的活性衰减特征 | 第32-33页 |
| ·经冷冻干燥的 LAMP 反应体系在 25°C 储藏下的活性衰减特征 | 第33页 |
| ·经冷冻干燥的 LAMP 反应体系在 37°C 储藏下的活性衰减特征 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 石蜡分隔对环介导等温扩增反应试剂混合物 | 第36-45页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·模板的制备 | 第36页 |
| ·引物 | 第36-37页 |
| ·LAMP 反应体系的配制 | 第37页 |
| ·不同石蜡添加量对 LAMP 反应体系混合物活性的影响 | 第37页 |
| ·储藏温度对不加酶的 LAMP 反应体系混合物活性的影响 | 第37页 |
| ·海藻糖对石蜡分隔的 LAMP 反应体系混合物活性的保护效果 | 第37-38页 |
| ·LAMP 反应产物电泳条带强度的定量分析 | 第38页 |
| 2 结果 | 第38-42页 |
| ·不同石蜡添加量对 LAMP 反应体系活性的影响 | 第38页 |
| ·不加酶的 LAMP 反应体系混合物在不同温度下的活性衰减特征 | 第38-39页 |
| ·经石蜡分隔的 LAMP 反应体系在 4°C 储存下的活性衰减特征 | 第39-40页 |
| ·经石蜡分隔的 LAMP 反应体系在 25°C 储存下的活性衰减特征 | 第40-41页 |
| ·经石蜡分隔处理的 LAMP 反应体系在 37°C 储藏下的活性衰减特征 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 硅藻土固定化对环介导等温扩增反应试剂混合物的保护作用 | 第45-55页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·模板的制备 | 第46页 |
| ·引物 | 第46页 |
| ·LAMP 反应体系的配制 | 第46页 |
| ·硅藻土和酶的混合比例的确定 | 第46-47页 |
| ·固定化温度的确定 | 第47页 |
| ·固定化时间的确定 | 第47页 |
| ·固定化酶试验对 LAMP 最适反应温度的影响 | 第47页 |
| ·储藏温度对固定化 LAMP 反应体系的影响 | 第47页 |
| ·不同海藻糖添加量对固定化 LAMP 反应体系的影响 | 第47-48页 |
| ·LAMP 反应产物电泳条带强度的定量分析 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-54页 |
| ·硅藻土和酶的混合比例的确定 | 第48-49页 |
| ·固定化温度的确定 | 第49页 |
| ·固定化时间的确定 | 第49-50页 |
| ·固定化酶试验对 LAMP 最适反应温度的影响 | 第50页 |
| ·固定化的 LAMP 反应体系混合物在 4℃储存下的活性衰减特征 | 第50-51页 |
| ·固定化的 LAMP 反应体系混合物在 25℃储存下的活性衰减特征 | 第51页 |
| ·固定化的 LAMP 反应体系混合物在 37℃储存下的活性衰减特征 | 第51-52页 |
| ·固定化的 LAMP 反应体系在 45℃储存下的活性变化特征 | 第52-53页 |
| ·不同海藻糖添加量对固定化 LAMP 反应体系的影响 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 小结与展望 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
