| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-15页 |
| 英文缩略语 | 第15-17页 |
| 1 绪论 | 第17-28页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| ·疱疹病毒 | 第18-21页 |
| ·疱疹病毒的特点 | 第19页 |
| ·疱疹病毒的结构模型 | 第19-20页 |
| ·与人相关的疱疹病毒 | 第20页 |
| ·疱疹病毒的家族进化 | 第20-21页 |
| ·锦鲤疱疹病毒的研究进展 | 第21-24页 |
| ·KHV病毒的形态结构 | 第22-23页 |
| ·KHV的分类和命名 | 第23页 |
| ·KHV基因组特征 | 第23-24页 |
| ·KHV的流行病学 | 第24页 |
| ·病毒分离 | 第24-25页 |
| ·鱼用疫苗研究现状及发展趋势 | 第25-26页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·毕赤酵母优缺点 | 第26-27页 |
| ·毕赤酵母常用载体 | 第27-28页 |
| 2 锦鲤尾鳍细胞系(KF-h)的建立 | 第28-39页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验药品 | 第29页 |
| ·实验相关药品的配制 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·原代细胞培养法 | 第30页 |
| ·传代细胞培养法 | 第30页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第30-31页 |
| ·染色体标本制备 | 第31页 |
| ·染色体核型分析 | 第31-32页 |
| ·细胞DNA含量检测 | 第32页 |
| ·实验结果 | 第32-37页 |
| ·形态学观察 | 第32-33页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第33-34页 |
| ·染色体数目 | 第34页 |
| ·染色体核型分析 | 第34-35页 |
| ·DNA含量分析 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-39页 |
| 3 锦鲤疱疹病毒的分离鉴定 | 第39-56页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·实验动物 | 第39页 |
| ·实验仪器 | 第39-40页 |
| ·实验药品 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·DNA提取 | 第41页 |
| ·PCR鉴定 | 第41-42页 |
| ·病毒的分离 | 第42页 |
| ·电镜观察 | 第42页 |
| ·动物感染试验 | 第42页 |
| ·病理学检查 | 第42-44页 |
| ·血细胞分析 | 第44页 |
| ·细胞灭活疫苗的免疫疗效 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45-53页 |
| ·KHVPCR检测 | 第45-46页 |
| ·病毒分离 | 第46-47页 |
| ·电镜观察 | 第47页 |
| ·动物感染实验 | 第47-48页 |
| ·病理学检查 | 第48-49页 |
| ·血细胞分析 | 第49-51页 |
| ·细胞灭活疫苗的免疫疗效 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-56页 |
| 4 锦鲤疱疹病毒糖蛋白D毕赤酵母表达载体的构建 | 第56-65页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·实验药品 | 第56页 |
| ·实验仪器 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·引物合成 | 第57页 |
| ·KHV-gD基因扩增 | 第57-58页 |
| ·KHV-gD基因克隆、筛选、鉴定 | 第58页 |
| ·表达重组子pPIC9K-KHV-gD的构建、筛选、鉴定 | 第58页 |
| ·重组载体转化酵母菌株GS115 | 第58页 |
| ·G418筛选多拷贝转化子 | 第58页 |
| ·在毕赤酵母菌中诱导表达重组KHV-gD | 第58-59页 |
| ·重组KHV-gD的纯化 | 第59页 |
| ·重组KWV-gD蛋白的鉴定分析 | 第59页 |
| ·分析基因编码蛋白的生物信息学 | 第59页 |
| ·实验结果 | 第59-63页 |
| ·KHV-gD基因的提取扩增 | 第59-60页 |
| ·克隆载体PGEM-T-KHV-GD的构建 | 第60页 |
| ·pPIC9K-KHV-gD表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·在毕赤酵母中诱导表达重组gD | 第61页 |
| ·毕赤酵母表达的重组gD的纯化 | 第61页 |
| ·KHV-gD克隆基因的序列分析 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| ·本章小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-87页 |
| 附录 | 第87-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |