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小鼠精子发生相关基因spata3的表达分析

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
插图、附表清单第10-11页
英文名称缩略语第11-13页
前言第13-16页
第一章 实验材料第16-27页
   ·实验动物第16页
   ·菌株第16页
   ·质粒第16-17页
   ·工具酶及主要试剂第17-18页
   ·引物第18-19页
   ·主要仪器及器材第19-20页
   ·试剂配制方法第20-27页
第二章 实验方法第27-41页
   ·小鼠组织总RNA的提取第27页
   ·半定量RT-PCR分析spata3 mRNA组织特异性表达第27-29页
   ·实时荧光定量PCR检测spata3 mRNA阶段特异性表达第29-30页
   ·pMD-19-T-spata3的克隆及鉴定第30-33页
   ·重组表达载体pGEX6P-1-spata3的构建及鉴定第33-35页
   ·重组蛋白的诱导表达第35-36页
   ·重组蛋白的亲和层析纯化第36-37页
   ·Western blot鉴定纯化蛋白第37页
   ·Bradford法测定纯化蛋白浓度第37-38页
   ·多克隆抗体的制备第38页
   ·ELISA测定血清效价第38-39页
   ·Western blot检测抗体的特异性第39页
   ·免疫组化分析SPATA3的细胞定位第39页
   ·多重间接免疫荧光染色分析SPATA3的亚细胞定位第39-40页
   ·免疫共沉淀分析SPATA3与α-微管蛋白的相互作用第40-41页
第三章 实验结果第41-57页
   ·组织样晶总RNA的提取及鉴定第41页
   ·RT-PCR验证spata3组织特异性表达第41-42页
   ·实时荧光定量PCR分析spata3阶段特异性表达第42-43页
   ·pGEX6P-1-spata3质粒构建过程第43-45页
   ·spata3编码序列的扩增第45页
   ·pMD-19-T-spata3质粒的PCR和酶切鉴定第45-46页
   ·重组表达载体pGEX6P-1-spata3的PCR和酶切鉴定第46页
   ·DNA序列测定第46-49页
   ·重组蛋白的诱导表达第49页
   ·重组蛋白的的纯化和Western blot鉴定第49-50页
   ·多隆抗体的制备与检测第50-51页
   ·免疫组织化学检测SPATA3在曲精小管中的细胞定位第51-52页
   ·多重间接免疫荧光检测SPATA3的亚细胞定位第52-55页
   ·免疫共沉淀分析第55-57页
第四章 讨论第57-60页
参考文献第60-63页
综述第63-75页
 参考文献第72-75页
个人简介第75-76页
致谢第76页

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