中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
插图、附表清单 | 第10-11页 |
英文名称缩略语 | 第11-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 实验材料 | 第16-27页 |
·实验动物 | 第16页 |
·菌株 | 第16页 |
·质粒 | 第16-17页 |
·工具酶及主要试剂 | 第17-18页 |
·引物 | 第18-19页 |
·主要仪器及器材 | 第19-20页 |
·试剂配制方法 | 第20-27页 |
第二章 实验方法 | 第27-41页 |
·小鼠组织总RNA的提取 | 第27页 |
·半定量RT-PCR分析spata3 mRNA组织特异性表达 | 第27-29页 |
·实时荧光定量PCR检测spata3 mRNA阶段特异性表达 | 第29-30页 |
·pMD-19-T-spata3的克隆及鉴定 | 第30-33页 |
·重组表达载体pGEX6P-1-spata3的构建及鉴定 | 第33-35页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第35-36页 |
·重组蛋白的亲和层析纯化 | 第36-37页 |
·Western blot鉴定纯化蛋白 | 第37页 |
·Bradford法测定纯化蛋白浓度 | 第37-38页 |
·多克隆抗体的制备 | 第38页 |
·ELISA测定血清效价 | 第38-39页 |
·Western blot检测抗体的特异性 | 第39页 |
·免疫组化分析SPATA3的细胞定位 | 第39页 |
·多重间接免疫荧光染色分析SPATA3的亚细胞定位 | 第39-40页 |
·免疫共沉淀分析SPATA3与α-微管蛋白的相互作用 | 第40-41页 |
第三章 实验结果 | 第41-57页 |
·组织样晶总RNA的提取及鉴定 | 第41页 |
·RT-PCR验证spata3组织特异性表达 | 第41-42页 |
·实时荧光定量PCR分析spata3阶段特异性表达 | 第42-43页 |
·pGEX6P-1-spata3质粒构建过程 | 第43-45页 |
·spata3编码序列的扩增 | 第45页 |
·pMD-19-T-spata3质粒的PCR和酶切鉴定 | 第45-46页 |
·重组表达载体pGEX6P-1-spata3的PCR和酶切鉴定 | 第46页 |
·DNA序列测定 | 第46-49页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第49页 |
·重组蛋白的的纯化和Western blot鉴定 | 第49-50页 |
·多隆抗体的制备与检测 | 第50-51页 |
·免疫组织化学检测SPATA3在曲精小管中的细胞定位 | 第51-52页 |
·多重间接免疫荧光检测SPATA3的亚细胞定位 | 第52-55页 |
·免疫共沉淀分析 | 第55-57页 |
第四章 讨论 | 第57-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
综述 | 第63-75页 |
参考文献 | 第72-75页 |
个人简介 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |