| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 英文縮略词表 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-25页 |
| 1 基因治疗 | 第15-21页 |
| ·基因治疗的主要分类 | 第15-16页 |
| ·基因治疗方法 | 第16-19页 |
| ·基因治疗载体 | 第19-21页 |
| 2 RNAi技术 | 第21-25页 |
| ·RNAi简介 | 第21页 |
| ·作用机制 | 第21-22页 |
| ·特点 | 第22-23页 |
| ·RNAi中的中心因子siRNA | 第23-25页 |
| 第一部分 靶向hTERT siRNA有效序列的筛选 | 第25-41页 |
| 1 材料与仪器 | 第25-29页 |
| ·细胞株 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·实验仪器设备 | 第26-27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-28页 |
| ·PCR引物 | 第28页 |
| ·siRNA的设计与合成 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-36页 |
| ·细胞培养 | 第29-31页 |
| ·细胞转染 | 第31-32页 |
| ·SRB法检测siRNA对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用 | 第32页 |
| ·逆转录PCR(RT-PCR)检测siRNA对前列腺癌PC-3细胞hTERT基因mRNA表达的抑制作用 | 第32-36页 |
| ·统计学分析 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-39页 |
| ·siRNA对PC-3细胞生长的抑制作用 | 第36-37页 |
| ·总RNA的纯度和完整性分析 | 第37-38页 |
| ·siRNA抑制PC-3细胞hTERT mRNA的表达情况 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第二部分：RNA干扰抑制hTERT表达诱导PC-3细胞凋亡 | 第41-53页 |
| 1 材料与仪器 | 第41-44页 |
| ·细胞株 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·实验仪器设备 | 第42页 |
| ·主要试剂配制 | 第42-44页 |
| 2 实验方法 | 第44-48页 |
| ·细胞培养及转染 | 第44页 |
| ·PI单染检测siRNA转染后细胞周期相分布情况 | 第44页 |
| ·Annexin V-FITC/PI双染检测siRNA转染后的细胞凋亡情况 | 第44-45页 |
| ·蛋白印迹(Western-blot)检测siRNA对SMMC-7721细胞蛋白表达的抑制作用 | 第45-48页 |
| ·统计学分析 | 第48页 |
| 3 实验结果 | 第48-51页 |
| ·流式细胞仪测定siRNA转染48h后对PC-3细胞周期的影响 | 第48-49页 |
| ·流式细胞仪测定siRNA转染48h后对PC-3细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| ·Western-blot检测siRNA对PC-3细胞hTERT蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第三部分 SWNT-DOTAP作为载体抑制PC-3细胞增殖 | 第53-62页 |
| 1 材料与仪器 | 第53-54页 |
| ·细胞株 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| ·主要试剂配制 | 第54页 |
| 2 实验方法 | 第54-57页 |
| ·SWNT-DOTAP | 第54-55页 |
| ·SRB法检测SWNT-DOTAP对前列腺癌PC-3细胞毒性的影响 | 第55页 |
| ·SWNT-DOTAP接载siRNA-2 | 第55-56页 |
| ·SRB法检测SWNT-DOTAP/siRNA-2对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用 | 第56-57页 |
| ·统计学分析 | 第57页 |
| 3 实验结果 | 第57-60页 |
| ·SWNT-DOTAP的物理参数 | 第57-58页 |
| ·SWNT-DOTAP对PC-3细胞毒性的影响 | 第58-59页 |
| ·SWNT-DOTAP对siRNA-2的接载率 | 第59页 |
| ·SWNT-DOTAP/siRNA对PC-3细胞生长的抑制作用 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 全文总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简历和发表文章 | 第67页 |
