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大米蛋白抗氧化肽的制备、分离纯化和结构鉴定

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-11页
第一章 绪论第11-26页
   ·大米蛋白第11-13页
     ·大米蛋白资源概况第11页
     ·大米蛋白的营养特点第11-12页
     ·大米蛋白的制备及国内外大米蛋白产品的开发状况第12-13页
   ·氧化及抗氧化第13-14页
   ·活性肽第14-16页
   ·抗氧化活性肽的研究进展第16-20页
     ·天然抗氧化肽第16-17页
     ·植物源抗氧化肽第17-19页
     ·动物源抗氧化肽第19-20页
   ·本课题的立题背景和意义第20-21页
   ·本课题的研究内容第21页
 参考文献第21-26页
第二章 酶解大米蛋白制备抗氧化肽的工艺研究第26-36页
   ·引言第26页
   ·材料与仪器第26-27页
     ·材料第26页
     ·主要仪器第26-27页
   ·实验方法第27-28页
     ·大米蛋白的提取第27页
     ·大米蛋白的成分分析第27页
     ·酶活力的测定第27页
     ·大米蛋白抗氧化肽的制备第27-28页
     ·水解度(DH)测定第28页
     ·二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)清除能力的测定第28页
     ·酶解大米蛋白的单因素试验第28页
     ·响应面分析法优化酶解工艺试验设计第28页
   ·结果与讨论第28-34页
     ·大米蛋白成分分析第28页
     ·酶源的确定第28-29页
     ·不同底物浓度[S]对DH 的影响第29-30页
     ·不同酶与底物浓度比[E]/[S]对 DH 的影响第30页
     ·不同pH 值对DH 的影响第30-31页
     ·不同温度对DH 的影响第31-32页
     ·响应面法优化酶解工艺参数第32-34页
       ·回归分析第32-34页
       ·验证试验第34页
   ·本章小结第34页
 参考文献第34-36页
第三章 大米蛋白酶解产物NHREP 体外抗氧化活性的研究第36-48页
   ·前言第36页
   ·材料与仪器第36-37页
     ·材料第36页
     ·主要仪器第36-37页
   ·方法第37-38页
     ·亚油酸体系中抗氧化能力的检测—硫氰酸铁法第37页
     ·二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)清除能力的测定第37页
     ·超氧阴离子自由基(O_2~(-·))清除能力的测定第37页
     ·羟基自由基(·OH)清除能力的测定第37页
     ·螯合金属离子能力的测定第37页
     ·还原能力的测定第37页
     ·抑制 H_2O_2诱导的小鼠红细胞溶血实验第37页
     ·抑制 H_2O_2诱导的小鼠肝匀浆 MDA 生成实验第37页
     ·HPLC 测定相对分子质量分布第37-38页
     ·统计分析第38页
   ·结果与讨论第38-45页
     ·不同水解度NHREPs 对亚油酸体系自动氧化的抑制能力第38-39页
     ·不同水解度NHREPs 的 DPPH·清除能力第39-40页
     ·不同水解度NHREPs 的 O_2~(-·)及·OH 清除能力第40-41页
     ·不同水解度NHREPs 的还原能力及金属离子螯合能力第41-42页
     ·不同水解度NHREPs 抑制双氧水诱导小鼠红细胞溶血实验第42-43页
     ·不同水解度NHREPs 抑制双氧水诱导小鼠肝细胞产生MDA 实验第43页
     ·水解度为13 %的NHREP 相对分子质量分布图第43-44页
     ·不同水解度NHREPs 体外抗氧化活性的讨论第44-45页
   ·本章小结第45页
 参考文献第45-48页
第四章 大米蛋白抗氧化活性肽的分离纯化第48-59页
   ·前言第48页
   ·材料与仪器第48-49页
     ·材料第48-49页
     ·主要仪器第49页
   ·实验方法第49-50页
     ·样品制备第49页
     ·紫外波长检测第49页
     ·离子交换层析分离抗氧化活性肽第49页
     ·凝胶色谱Sephadex G-15 分离抗氧化活性肽第49-50页
     ·半制备 RP-HPLC 分离抗氧化活性肽第50页
     ·RP-HPLC 分析抗氧化活性肽第50页
     ·DPPH·清除能力的测定第50页
     ·抗氧化肽氨基酸组成分析第50页
   ·结果与讨论第50-56页
     ·NHREP 的紫外光谱检测第50-51页
     ·离子交换层析分离 NHREP第51-52页
     ·凝胶色谱分离纯化F 组分第52-54页
       ·凝胶色谱分离条件的确定第52-53页
       ·分离纯化F 组分第53-54页
     ·半制备RP-HPLC 分离 NHREP 的凝胶柱洗脱分离组分F3第54-55页
     ·抗氧化活性肽F36 和 F3c 的纯度第55页
     ·抗氧化活性肽F36 和 F3c 的氨基酸组成分析第55-56页
   ·本章小结第56-57页
 参考文献第57-59页
第五章 大米蛋白抗氧化活性肽F38 和F3C 的结构鉴定第59-69页
   ·前言第59-60页
   ·材料与仪器第60页
     ·材料第60页
     ·主要仪器第60页
   ·实验方法第60页
     ·MALDI-TOF MS 质谱测定F36 和F3c 质量指纹图谱第60页
     ·TOF-MS-MS 质谱分析测定F36 和F3c 序列第60页
   ·结果与讨论第60-66页
     ·组分 F36 和F3c 的质量指纹图谱第60-62页
     ·组分 F36 和F3c 的序列测定第62-65页
     ·抗氧化活性肽的序列比对第65-66页
   ·本章小结第66页
 参考文献第66-69页
第六章 抗氧化活性肽FRDEHKK 的固相合成及活性验证第69-81页
   ·前言第69-70页
   ·材料与仪器第70页
     ·材料第70页
     ·主要仪器第70页
   ·实验方法第70-72页
     ·Fmoc-Tyr(tBu)-OH 与 Wang 树脂的连接第70页
     ·FRDEHKK 肽链的延伸第70-71页
     ·肽树脂的切割与产物的分析第71页
       ·肽树脂的切割第71页
       ·纯化和质谱鉴定第71页
     ·亚油酸体系中抗氧化能力的检测—硫氰酸铁法第71页
     ·DPPH·清除能力的测定第71-72页
     ·O_2~(-·)清除能力的测定第72页
     ··OH 清除能力的测定第72页
     ·螯合金属离子能力的测定第72页
     ·还原能力的测定第72页
   ·结果与讨论第72-78页
     ·合成 FRDEHKK 的纯度及质谱鉴定第72-74页
     ·FRDEHKK 对亚油酸体系自动氧化的抑制能力第74页
     ·FRDEHKK 的DPPH·清除能力第74-75页
     ·FRDEHKK 的O_2~(-·)清除能力第75页
     ·FRDEHKK 的·OH 清除能力第75-76页
     ·FRDEHKK 的还原能力第76页
     ·FRDEHKK 的金属离子螯合能力第76-77页
     ·肽序列与抗氧化活性关系的探讨第77-78页
   ·本章小结第78页
 参考文献第78-81页
论文主要结论第81-83页
展望第83-84页
论文创新点第84-85页
致谢第85-87页
攻读博士学位论文期间发表的论文第87页
申请专利第87页

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