| 英文名词及缩写 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 材料与方法 | 第17-42页 |
| 1.实验材料 | 第17-25页 |
| ·工具酶及分子量Marker | 第17页 |
| ·主要生化试剂 | 第17-18页 |
| ·细胞因子与荧光抗体 | 第18页 |
| ·试剂盒 | 第18页 |
| ·同何素标记化合物 | 第18页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18-19页 |
| ·细胞系 | 第19-20页 |
| ·骨髓组织标本 | 第20页 |
| ·引物 | 第20-24页 |
| ·主要生物软件 | 第24页 |
| ·主要仪器及设备 | 第24-25页 |
| 2.实验方法 | 第25-42页 |
| ·HSC和MMP的分离及CD34+细胞向EC、MC和GC的诱导分化 | 第25-28页 |
| ·DDRT-PCR分析 | 第28-31页 |
| ·Real time PCR检测mRNA的表达 | 第31-33页 |
| ·细胞系培养及诱导 | 第33页 |
| ·脂质体介导的真核细胞转染和稳定细胞株的筛选 | 第33-34页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第34-36页 |
| ·质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·NB4细胞诱导向粒系分化的检测 | 第37页 |
| ·ASB-8在大肠杆菌中的表达 | 第37-38页 |
| ·K562诱导向红系分化的检测 | 第38页 |
| ·K562诱导向巨核系分化的检测 | 第38-39页 |
| ·脂质体介导的miRNA寡核苷酸的真核细胞转染 | 第39页 |
| ·miRNA的Real time PCR | 第39-40页 |
| ·miRNA相关质粒的构建 | 第40页 |
| ·双萤光报告实验 | 第40-42页 |
| 实验结果 | 第42-84页 |
| 1.HSC和MMP的分离及CD34+细胞向EC、MC和GC的定向诱导分化 | 第42-45页 |
| ·HSC和MMP的免疫磁珠分离 | 第42-43页 |
| ·CD34+细胞向红系、巨核系和粒系的半固体诱导培养 | 第43-45页 |
| 2.HSC、MMP、EC、MC和GC中mRNA表达的DDRT-PCR分析 | 第45-51页 |
| ·GAPDH cDNA的PCR扩增 | 第45-46页 |
| ·DDRT-PCR分析 | 第46-48页 |
| ·差异片段的PCR再扩增 | 第48页 |
| ·差异片段的克隆、测序及Blast分析 | 第48-50页 |
| ·在一个或多个链系特异表达的mRNA | 第50-51页 |
| 3.ASB-8在ATRA诱导NB4细胞向粒系分化中的功能 | 第51-64页 |
| ·ASB-8 mRNA在GC中高表达 | 第51页 |
| ·ASB-8 mRNA在ATRA诱导NB4和HL-60向粒系分化中表达上调 | 第51-52页 |
| ·ASB-8生物信息学分析 | 第52-53页 |
| ·全长ASB-8 cDNA的PCR扩增 | 第53-54页 |
| ·ASB-8蛋白主要定位于细胞质 | 第54页 |
| ·过表达质粒pcDNA3.1-ASB.8的构建 | 第54-55页 |
| ·RNAi质粒pAVU6+27-ASB-8i的构建 | 第55-57页 |
| ·稳定转化了pcDNA3.1-ASB-8/NB4和pAVU6+27-ASB-8i/NB4的获得 | 第57-58页 |
| ·稳定转化子pcDNA3.1-ASB-8/NB4和pAVU6+27-ASB-8i/NB4的粒系分化分析 | 第58-62页 |
| ·稳定转化子pcDNA3.1-ASB-8/HL-60和pAVU6+27-ASB-8i/HL-60的获得 | 第62-63页 |
| ·GST-ASB-8和His-ASB-8融合蛋白的诱导表达 | 第63-64页 |
| 4.Mir-223在hemin诱导K562向红系分化中的功能作用 | 第64-75页 |
| ·在K562中过表达或抑制成熟mir-223后对红系分化的影响 | 第64-67页 |
| ·pcDNA3.1-pri-mir-223和pSilencer2.1-U6-Neo-pre-mir-223过表达质粒的构建 | 第67页 |
| ·稳定转化子pcDNA3.1-pri-mir-223/K562和pSilencer2.1-U6-Neo-pre-mir-223/K562的获得 | 第67-69页 |
| ·稳定转化子pcDNA3.1-pri-mir-223/K562和pSilencer2.1-U6-Neo-pre-mir-223/K562的红系分化分析 | 第69-75页 |
| 5.Mir-223调节K562红系分化的分子机制 | 第75-82页 |
| ·Mir-223靶基因的检测 | 第75-78页 |
| ·Mir-223可能与LMO2 mRNA相互作用 | 第78-80页 |
| ·Mir-223对一些红系转录因子表达影响的分析 | 第80-82页 |
| 6.Mir-223在PMA诱导K562向巨核系分化中的功能作用 | 第82-84页 |
| ·过表达稳定转子pcDNA3.1-pri-mir-223/K562的巨核系分化分析 | 第82-84页 |
| 讨论 | 第84-97页 |
| 1.HSC向粒系分化中的基因表达变化 | 第86-89页 |
| 2.ASB-8在粒系分化中的功能 | 第89-94页 |
| 3.Mir-223在红系分化中的功能及可能的分子机制 | 第94-97页 |
| 参考文献 | 第97-105页 |
| 小结 | 第105-106页 |
| 文献综述 | 第106-121页 |
| 攻读博士期间发表和待发表的论文和参加的学术会议 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-124页 |
