中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一部分:NT-3绿色荧光表达载体的构建及真核表达 | 第10-35页 |
1 实验材料和方法 | 第10-16页 |
·实验材料及主要仪器 | 第10-11页 |
·实验方法 | 第11-16页 |
2 实验结果 | 第16-34页 |
·基因组提取 | 第16页 |
·PCR扩增及产物纯化 | 第16-18页 |
·NT-3 PCR产物及pEGFP-N1载体的酶切 | 第18-20页 |
·重组子酶切鉴定结果 | 第20-21页 |
·分析DNA测序结果及蛋白质序列 | 第21-30页 |
·重组质粒流程小结 | 第30-32页 |
·重组质粒pEGFP-NT3在真核细胞中表达 | 第32-34页 |
3 小结 | 第34-35页 |
第二部分:EGFP表达对鼠C6细胞生物学特征影响的研究 | 第35-43页 |
1 实验材料和方法 | 第35-36页 |
·实验材料 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-36页 |
2 实验结果 | 第36-42页 |
·荧光显微镜下观察细胞发荧光的情况 | 第36-38页 |
·细胞记数 | 第38-39页 |
·MTT检测细胞活力 | 第39-40页 |
·流式细胞术检测细胞中绿色荧光蛋白的表达 | 第40-41页 |
·流式细胞术检测细胞周期的变化 | 第41-42页 |
3 小结 | 第42-43页 |
第三部分:利用易错PCR技术突变hNT-3 | 第43-52页 |
1 实验材料及方法 | 第43-45页 |
·实验材料 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-45页 |
2 实验结果 | 第45-51页 |
·重组子酶切鉴定结果 | 第45-46页 |
·分析DNA测序结果及蛋白质序列 | 第46-51页 |
3 小结 | 第51-52页 |
讨论 | 第52-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
Neurotrophin-3研究进展 | 第57-65页 |
参考文献 | 第64-65页 |
附件1 NCBI上Human neurotrophin-3 gene相关资料 | 第65-68页 |
附件2 本实验所用到的DNA Marker介绍 | 第68-69页 |
附件3 重组质粒pEGFP-NT3反向测序峰图 | 第69-72页 |
附件4 蛋白质三维构像预测图 | 第72-73页 |
在读期间发表或被接收的论文 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |