| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-43页 |
| ·以斑马鱼为代表的脊椎动物发育过程 | 第10-17页 |
| ·斑马鱼的发育过程简介 | 第10-16页 |
| ·斑马鱼作为模式动物的优点 | 第16-17页 |
| ·胚胎发育过程中几条重要的信号通路概述 | 第17-27页 |
| ·TGF-β信号通路 | 第17-22页 |
| ·Nodal 信号通路 | 第22-25页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第25-26页 |
| ·FGF 信号通路 | 第26-27页 |
| ·脊椎动物中胚层和内胚层的诱导及背腹分化 | 第27-35页 |
| ·中胚层和内胚层诱导及背腹分化过程 | 第27-28页 |
| ·几条信号通路在中内胚层诱导及背腹分化中的作用 | 第28-35页 |
| ·脊椎动物神经诱导及神经外胚层的分化 | 第35-41页 |
| ·神经诱导的发生 | 第35-39页 |
| ·神经外胚层前后轴线的建立和分化 | 第39-41页 |
| ·本课题的研究意义和内容 | 第41-43页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第43-57页 |
| ·斑马鱼胚胎的获得和培养 | 第43页 |
| ·基因全长的获得及各种质粒的构建 | 第43-46页 |
| ·反义寡核苷酸的设计及使用 | 第46-47页 |
| ·mRNA 的制备与显微注射 | 第47-49页 |
| ·mRNA 的制备 | 第47-48页 |
| ·显微注射 | 第48-49页 |
| ·探针的制备和斑马鱼整胚原位杂交 | 第49-53页 |
| ·探针的制备 | 第49-50页 |
| ·斑马鱼整胚原位杂交 | 第50-53页 |
| ·Hep3B 细胞的培养与荧光素酶报告实验 | 第53-56页 |
| ·细胞培养 | 第53-54页 |
| ·PEI 转染法 | 第54-56页 |
| ·细胞移植实验 | 第56-57页 |
| 第3章 Smad2/3 在斑马鱼中内胚层诱导中的作用 | 第57-78页 |
| ·用MO 抑制smad2/3 表达不引起明显发育缺陷 | 第57-60页 |
| ·smad2/3 的MO 可有效地抑制相应基因的表达 | 第57-59页 |
| ·smad2/3 的MO 不会引起明显的胚胎发育缺陷 | 第59-60页 |
| ·构建斑马鱼smad2/3 的显性抑制形式 | 第60-63页 |
| ·设计构建斑马鱼smad2/3 的显性抑制形式 | 第60-61页 |
| ·dnsmad2/3 的有效性及特异性验证 | 第61-63页 |
| ·Smad2/3 是Nodal 信号诱导中内胚层发生的必要条件 | 第63-66页 |
| ·抑制野生型胚胎中Smad2/3 的活性导致缺失中内胚层组织 | 第66-72页 |
| ·抑制细胞中Smad2/3 的活性导致其中胚层命运改变为神经命运 | 第72-74页 |
| ·Zoep 和Moep 突变体中进一步抑制Smad2/3 会引起更多中胚层的缺失 | 第74-75页 |
| ·Smad2/3 可能通过介导其它非Nodal 信号的中胚层诱导作用 | 第75-77页 |
| ·本章小结 | 第77-78页 |
| 第4章 Smad2/3 在神经诱导和神经外胚层前后轴线分化中的作用 | 第78-93页 |
| ·Smad3 促进神经诱导和神经外胚层后部化 | 第78-82页 |
| ·野生型胚胎中增强Smad3 活性可促进神经诱导和神经外胚层后部化 | 第78-79页 |
| ·抑制野生型胚胎中Smad2/3 的活性可抑制神经诱导 | 第79-82页 |
| ·在神经诱导和神经外胚层后部化中Smad2/3 与Nodal 信号的互作关系 | 第82-89页 |
| ·sqt 过量表达促进神经诱导及神经外胚层的后部化 | 第82页 |
| ·抑制Smad2/3 的活性可减轻sqt 过量表达导致的神经外胚层后部化 | 第82-85页 |
| ·缺失Nodal 信号抑制神经诱导并导致神经外胚层前部化 | 第85-86页 |
| ·MZoep 变体中的Smad2/3 活性对神经诱导和分化的影响 | 第86-89页 |
| ·抑制Smad2/3 可抵消增强Fgf 信号所引起的神经外胚层过度后部化 | 第89-90页 |
| ·抑制Smad2/3 可抵消增强Wnt 信号所引起的神经外胚层过度后部化 | 第90-92页 |
| ·本章小结 | 第92-93页 |
| 第5章 Smad2/3 互作因子的筛选 | 第93-112页 |
| ·利用酵母双杂交法鉴定与 Smad2/3 结合的母源因子 | 第93-99页 |
| ·构建诱饵表达载体 | 第95-96页 |
| ·构建斑马鱼母源 cDNA 文库 | 第96-97页 |
| ·筛选与Smad2/3 互作的母源因子 | 第97-99页 |
| ·Ppp4c 的初步功能分析 | 第99-111页 |
| ·PPP4c 与Smads 蛋白的结合及其对TGF-β和BMP 信号的影响 | 第100-101页 |
| ·ppp4ca 和ppp4cb 在斑马鱼胚胎中的表达谱分析 | 第101-103页 |
| ·ppp4ca 或ppp4cb 在斑马鱼胚胎早期发育过程中的作用 | 第103-110页 |
| ·缺失Ppp4cb 活性的细胞不能获得中胚层发育命运 | 第110-111页 |
| ·小结和讨论 | 第111-112页 |
| 结论 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第126页 |
