| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 前言 | 第12-22页 |
| 1 鸭病毒性肠炎概述 | 第12-16页 |
| ·历史回顾 | 第12页 |
| ·病原 | 第12-15页 |
| ·病毒的形态特征与理化特性 | 第13页 |
| ·病毒基因组 | 第13-14页 |
| ·鸭肠炎病毒形态发生 | 第14-15页 |
| ·流行病学及致病性 | 第15-16页 |
| ·流行病学 | 第15页 |
| ·临床症状及病理变化 | 第15-16页 |
| 2 诊断方法研究进展 | 第16-20页 |
| ·病原分离鉴定 | 第16页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第16-18页 |
| ·核酸探针技术 | 第16-17页 |
| ·原位杂交技术（ISH） | 第17页 |
| ·常规PCR 诊断技术 | 第17页 |
| ·实时荧光定量PCR 技术 | 第17-18页 |
| ·血清学诊断方法 | 第18-20页 |
| ·血清中和试验（SN） | 第18页 |
| ·琼脂糖凝胶沉淀试验(AGP) | 第18页 |
| ·反向间接血凝试验(RPHA) | 第18页 |
| ·间接免疫荧光试验（IFA） | 第18-19页 |
| ·微量固相放射免疫试验(Micro-SPRIA) | 第19页 |
| ·酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第19-20页 |
| 3 防治 | 第20-21页 |
| ·预防 | 第20-21页 |
| ·灭活苗 | 第20页 |
| ·弱毒疫苗 | 第20-21页 |
| ·治疗 | 第21页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第一章 鸭肠炎病毒抗原的提纯 | 第22-34页 |
| 1 材料与方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·SPF 鸡胚 | 第22页 |
| ·病毒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·阴阳性血清的制备 | 第23页 |
| ·间接ELISA 操作程序 | 第23-24页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第24页 |
| ·病毒的增殖 | 第24页 |
| ·半数细胞感染量（TCID_(50)）的测定 | 第24页 |
| ·病毒的粗纯 | 第24-25页 |
| ·蔗糖不连续密度梯度离心法 | 第25页 |
| ·酒石酸钾不连续密度梯度离心法 | 第25页 |
| ·氯化铯不连续密度梯度离心法 | 第25页 |
| ·病毒含量的测定 | 第25页 |
| ·病毒的电镜观察 | 第25-26页 |
| ·间接ELISA 抗原性分析 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第26页 |
| ·Western-Blot 分析 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-31页 |
| ·CEF 细胞的病变情况 | 第26页 |
| ·阴阳性血清的制备 | 第26-27页 |
| ·病毒毒价的测定 | 第27页 |
| ·三种密度梯度离心结果 | 第27-28页 |
| ·病毒浓度测定结果 | 第28页 |
| ·电镜观察结果 | 第28-30页 |
| ·ELISA 分析结果 | 第30页 |
| ·蔗糖不连续密度梯度纯化的病毒SDS-PAGE 凝胶电泳结果 | 第30-31页 |
| ·WESTERN-BLOT 分析结果 | 第31页 |
| 3 讨论 | 第31-34页 |
| ·病毒增殖材料的选择 | 第31-32页 |
| ·病毒纯化方法的比较 | 第32页 |
| ·病毒的抗原性比较 | 第32-34页 |
| 第二章 鸭病毒性肠炎间接ELISA 诊断方法的建立及应用 | 第34-51页 |
| 1 材料与方法 | 第34-40页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·毒株及疫苗 | 第34页 |
| ·包被抗原 | 第34页 |
| ·血清 | 第34-35页 |
| ·实验鸭 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要的仪器设备 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-40页 |
| ·血清中和试验操作程序 | 第35-36页 |
| ·酶联板均一性试验 | 第36页 |
| ·抗原最佳包被浓度与阴阳性血清最佳稀释度的确定 | 第36页 |
| ·阴阳性血清最佳作用时间的确定 | 第36-37页 |
| ·酶标抗体最佳工作浓度的确定 | 第37页 |
| ·酶标抗体最佳作用时间的确定 | 第37页 |
| ·最佳封闭液的确定 | 第37页 |
| ·底物显色时间的确定 | 第37页 |
| ·间接ELISA 方法判定标准的确定 | 第37-38页 |
| ·敏感性试验 | 第38页 |
| ·交叉反应试验 | 第38页 |
| ·阻断试验 | 第38页 |
| ·批内重复性试验 | 第38页 |
| ·批间重复性试验 | 第38页 |
| ·与血清中和试验比较 | 第38-39页 |
| ·与鸭肠炎病毒UL19 重组蛋白间接ELISA 诊断方法比较 | 第39页 |
| ·免疫及免疫攻毒鸭抗体水平监测 | 第39页 |
| ·现地应用试验 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-47页 |
| ·酶联板均一性试验结果 | 第40页 |
| ·抗原最佳包被浓度与阴阳性血清最佳稀释度的确定 | 第40-41页 |
| ·阴阳性血清作用时间的确定 | 第41页 |
| ·酶标抗体工作浓度的确定 | 第41页 |
| ·酶标抗体作用时间的确定 | 第41-42页 |
| ·封闭液的确定 | 第42页 |
| ·底物显色时间的确定 | 第42页 |
| ·间接ELISA 方法判定标准的确定 | 第42-43页 |
| ·敏感性试验结果 | 第43页 |
| ·交叉反应试验结果 | 第43-44页 |
| ·阻断试验结果 | 第44页 |
| ·批内重复试验 | 第44-45页 |
| ·批间重复试验 | 第45页 |
| ·与血清中和试验检测结果的比较 | 第45-46页 |
| ·与UL19 重组蛋白间接ELISA 诊断方法的比较 | 第46页 |
| ·免疫鸭抗体水平监测结果 | 第46页 |
| ·免疫攻毒鸭抗体水平监测结果 | 第46-47页 |
| ·现地应用试验结果 | 第47页 |
| 3 小结和讨论 | 第47-51页 |
| ·间接ELISA 诊断方法的优势 | 第47-48页 |
| ·间接ELISA 反应条件的优化 | 第48-49页 |
| ·间接ELISA 诊断方法判定标准的确定 | 第49页 |
| ·与血清中和试验和UL19 重组蛋白间接ELISA 的比较 | 第49页 |
| ·间接ELISA 诊断方法的应用 | 第49-50页 |
| ·间接ELISA 的质量控制 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
