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欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性cDNA克隆的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-24页
   ·猪繁殖与呼吸综合征及其病毒研究进展第13-18页
     ·分类地位第13页
     ·形态和理化特性第13-14页
     ·病毒的基因组结构与病毒蛋白的功能第14-16页
     ·致病机理及危害第16-17页
     ·PRRS 的防治第17-18页
   ·RNA 病毒感染性克隆技术研究进展第18-22页
     ·病毒感染性克隆介绍第18页
     ·RNA 病毒全长感染性克隆的构建原理和策略第18-20页
     ·PRRSV 全长感染性克隆的构建第20-21页
     ·小结第21-22页
   ·本研究的目的意义及内容第22-24页
     ·目的意义第22-23页
     ·研究内容第23-24页
第二章 欧洲型PRRSV 全长基因组序列的测定及序列分析第24-37页
   ·前言第24-25页
   ·材料与方法第25-33页
     ·细胞病毒菌株第25页
     ·载体与试剂第25页
     ·主要仪器第25页
     ·细胞培养第25-26页
     ·病毒纯化第26页
     ·病毒RNA 的提取第26-27页
     ·引物的设计和合成第27-28页
     ·病毒基因组cDNA 的制备第28页
     ·病毒基因组亚克隆片段的PCR 扩增第28-29页
     ·PCR 产物的纯化及亚克隆质粒的构建第29-30页
     ·质粒转化感受态细胞第30页
     ·重组质粒的筛选第30-31页
     ·亚克隆质粒的酶切鉴定第31页
     ·病毒基因组5′末端序列测定第31-32页
     ·病毒基因组亚克隆片段测序第32页
     ·病毒基因组cDNA 全序列拼接第32页
     ·病毒基因组序列分析第32-33页
   ·试验结果第33-36页
     ·病毒纯化第33页
     ·病毒基因组亚克隆片段的PCR 扩增结果第33页
     ·亚克隆质粒的构建和鉴定第33-34页
     ·病毒基因组5′末端序列测定第34页
     ·亚克隆质粒序列测定和病毒基因组全序列拼接第34页
     ·序列对比分析第34-36页
   ·讨论第36-37页
第三章 欧洲型PRRSV 感染性cDNA 克隆的构建第37-58页
   ·前言第37页
   ·材料与方法第37-42页
     ·细胞病毒菌株第37-38页
     ·载体与试剂第38页
     ·主要仪器第38页
     ·酶切位点分析及病毒基因组全长克隆的构建第38-39页
     ·全长克隆质粒的线性化和体外转录第39页
     ·病毒拯救第39-40页
     ·拯救病毒鉴定第40-41页
     ·病毒的空斑形态学比较第41页
     ·病毒一步生长曲线的测定第41-42页
   ·试验结果第42-56页
     ·酶切位点分析及病毒基因组全长克隆的构建第42-53页
     ·病毒基因组全长克隆质粒的线性化和体外转录第53页
     ·病毒拯救及结果鉴定第53-55页
     ·病毒的空斑形态学比较第55页
     ·病毒一步生长曲线的测定第55-56页
   ·讨论第56-58页
第四章 结论第58-59页
参考文献第59-65页
附录第65-74页
致谢第74-76页
作者简介第76页

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