摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-24页 |
·猪繁殖与呼吸综合征及其病毒研究进展 | 第13-18页 |
·分类地位 | 第13页 |
·形态和理化特性 | 第13-14页 |
·病毒的基因组结构与病毒蛋白的功能 | 第14-16页 |
·致病机理及危害 | 第16-17页 |
·PRRS 的防治 | 第17-18页 |
·RNA 病毒感染性克隆技术研究进展 | 第18-22页 |
·病毒感染性克隆介绍 | 第18页 |
·RNA 病毒全长感染性克隆的构建原理和策略 | 第18-20页 |
·PRRSV 全长感染性克隆的构建 | 第20-21页 |
·小结 | 第21-22页 |
·本研究的目的意义及内容 | 第22-24页 |
·目的意义 | 第22-23页 |
·研究内容 | 第23-24页 |
第二章 欧洲型PRRSV 全长基因组序列的测定及序列分析 | 第24-37页 |
·前言 | 第24-25页 |
·材料与方法 | 第25-33页 |
·细胞病毒菌株 | 第25页 |
·载体与试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·细胞培养 | 第25-26页 |
·病毒纯化 | 第26页 |
·病毒RNA 的提取 | 第26-27页 |
·引物的设计和合成 | 第27-28页 |
·病毒基因组cDNA 的制备 | 第28页 |
·病毒基因组亚克隆片段的PCR 扩增 | 第28-29页 |
·PCR 产物的纯化及亚克隆质粒的构建 | 第29-30页 |
·质粒转化感受态细胞 | 第30页 |
·重组质粒的筛选 | 第30-31页 |
·亚克隆质粒的酶切鉴定 | 第31页 |
·病毒基因组5′末端序列测定 | 第31-32页 |
·病毒基因组亚克隆片段测序 | 第32页 |
·病毒基因组cDNA 全序列拼接 | 第32页 |
·病毒基因组序列分析 | 第32-33页 |
·试验结果 | 第33-36页 |
·病毒纯化 | 第33页 |
·病毒基因组亚克隆片段的PCR 扩增结果 | 第33页 |
·亚克隆质粒的构建和鉴定 | 第33-34页 |
·病毒基因组5′末端序列测定 | 第34页 |
·亚克隆质粒序列测定和病毒基因组全序列拼接 | 第34页 |
·序列对比分析 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第三章 欧洲型PRRSV 感染性cDNA 克隆的构建 | 第37-58页 |
·前言 | 第37页 |
·材料与方法 | 第37-42页 |
·细胞病毒菌株 | 第37-38页 |
·载体与试剂 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·酶切位点分析及病毒基因组全长克隆的构建 | 第38-39页 |
·全长克隆质粒的线性化和体外转录 | 第39页 |
·病毒拯救 | 第39-40页 |
·拯救病毒鉴定 | 第40-41页 |
·病毒的空斑形态学比较 | 第41页 |
·病毒一步生长曲线的测定 | 第41-42页 |
·试验结果 | 第42-56页 |
·酶切位点分析及病毒基因组全长克隆的构建 | 第42-53页 |
·病毒基因组全长克隆质粒的线性化和体外转录 | 第53页 |
·病毒拯救及结果鉴定 | 第53-55页 |
·病毒的空斑形态学比较 | 第55页 |
·病毒一步生长曲线的测定 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
第四章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-76页 |
作者简介 | 第76页 |