| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-31页 |
| ·研究目的与意义 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽研究进展 | 第15-21页 |
| ·抗菌肽的来源及分类 | 第15-16页 |
| ·抗菌肽的作用机制 | 第16-18页 |
| ·抗菌肽生物学功能 | 第18页 |
| ·抗菌肽基因工程 | 第18-20页 |
| ·抗菌肽研究前景 | 第20-21页 |
| ·本课题杂合肽设计基于的母体肽研究进展 | 第21-25页 |
| ·牛乳铁蛋白肽 | 第21-22页 |
| ·天蚕素 | 第22-24页 |
| ·幽门螺杆菌肽 | 第24-25页 |
| ·影响抗菌肽抗菌活性的结构参数 | 第25-27页 |
| ·螺旋度 | 第25页 |
| ·两亲性（疏水力矩） | 第25-26页 |
| ·疏水性 | 第26页 |
| ·电荷 | 第26-27页 |
| ·杂合肽分子设计工具 | 第27-29页 |
| ·常用的物理化学参数计算工具 | 第27-28页 |
| ·常用的二级结构预测工具 | 第28页 |
| ·疏水性和亲水性氨基酸残基分布及电荷分布预测 | 第28页 |
| ·抗菌肽数据库 | 第28-29页 |
| ·本课题思路和内容 | 第29-31页 |
| ·问题的提出与解决思路 | 第29-30页 |
| ·研究内容 | 第30-31页 |
| 第二章 杂合肽分子设计及其抑菌、溶血活性测定 | 第31-40页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·生物信息学工具及实验材料 | 第31-32页 |
| ·生物信息学工具 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-34页 |
| ·杂合肽分子设计与合成 | 第32页 |
| ·杂合肽物理化学特性分析及结构预测 | 第32-33页 |
| ·抑菌实验 | 第33页 |
| ·溶血实验 | 第33-34页 |
| ·实验结果 | 第34-38页 |
| ·杂合肽理化特性参数计算 | 第34-35页 |
| ·杂合肽二级结构预测分析 | 第35-36页 |
| ·两亲性和电荷分布预测 | 第36-37页 |
| ·抑菌实验 | 第37-38页 |
| ·溶血性实验 | 第38页 |
| ·讨论与结论 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·结论 | 第39-40页 |
| 第三章 杂合抗菌肽在大肠杆菌中单体融合表达与纯化 | 第40-55页 |
| ·引言 | 第40-41页 |
| ·实验材料 | 第41-42页 |
| ·质粒与菌株 | 第41页 |
| ·DNA 修饰酶类与其他生化试剂 | 第41页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第41页 |
| ·培养基及缓冲液等试剂配制 | 第41-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-49页 |
| ·杂合肽CL23 与LH28 基因序列设计及合成 | 第42-43页 |
| ·CL23 与LH28 的重组表达载体构建(图3-1) | 第43-46页 |
| ·转化与筛选重组载体 | 第46-47页 |
| ·重组质粒转化表达菌株BL21（DE3） | 第47页 |
| ·融合蛋白诱导表达及纯化 | 第47-49页 |
| ·Xa 因子裂解融合蛋白 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-53页 |
| ·双酶切制备杂合肽CL23 与LH28 基因 | 第49页 |
| ·重组表达载体构建及转化筛选 | 第49-50页 |
| ·融合蛋白诱导表达条件研究 | 第50-51页 |
| ·融合蛋白的纯化研究 | 第51-52页 |
| ·Xa 因子裂解融合蛋白 | 第52-53页 |
| ·讨论与结论 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| 第四章 杂合肽在大肠杆菌中多聚体融合表达与纯化 | 第55-71页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·质粒与菌株 | 第56页 |
| ·DNA 修饰酶类与其他生化试剂 | 第56页 |
| ·引物合成及DNA 测序 | 第56页 |
| ·培养基及缓冲液等配制 | 第56页 |
| ·主要仪器设备 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-62页 |
| ·杂合肽LH28 基因序列设计及合成 | 第56-57页 |
| ·LH28 多聚体重组克隆载体pUC19-(LH28)n 构建 | 第57-59页 |
| ·多聚体重组表达载体pET32a-(LH28)n 构建 | 第59-60页 |
| ·重组载体pET32a-(LH28)n 转化表达菌株 | 第60页 |
| ·重组融合蛋白Trx-（LH28）n 诱导表达及纯化 | 第60-61页 |
| ·甲酸裂解融合蛋白 | 第61页 |
| ·重组肽P-LH28-D 纯化和鉴定 | 第61-62页 |
| ·实验结果 | 第62-69页 |
| ·杂合肽LH28 单体基因制备 | 第62-63页 |
| ·多聚体重组表达载体pET32a-(LH28)n 构建及转化筛选 | 第63页 |
| ·融合蛋白Trx-(LH28)n 的诱导表达 | 第63-65页 |
| ·融合蛋白Trx-(LH28)2 纯化 | 第65-66页 |
| ·甲酸裂解Trx-(LH28)2 | 第66-68页 |
| ·重组单体肽P-LH28-D 纯化和抑菌活性测定 | 第68页 |
| ·RT-HPLC 纯化重组单体肽P-LH28-D 及其质谱分析 | 第68-69页 |
| ·讨论与结论 | 第69-71页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |
