中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第1章 前言 | 第9-18页 |
·无融合生殖现象及其研究进展 | 第9-10页 |
·本实验室的工作 | 第10-11页 |
·植物MADS-box基因的研究进展 | 第11-14页 |
·MADS-box基因概述 | 第11-12页 |
·植物MADS-box蛋白的结构 | 第12页 |
·MADS-box基因与花发育的关系 | 第12-14页 |
·MADS-box基因调控花期及在花以外器官中的作用 | 第14页 |
·农杆菌介导的植物遗传转化 | 第14-15页 |
·蛋白质双向电泳技术 | 第15-16页 |
·本实验的内容及目的 | 第16-17页 |
·本实验的技术路线 | 第17-18页 |
第2章 材料与方法 | 第18-36页 |
·实验材料 | 第18-21页 |
·植物材料 | 第18页 |
·菌株及质粒载体 | 第18-19页 |
·主要实验仪器及试剂 | 第19页 |
·M14-341基因cDNA全长序列及引物 | 第19-21页 |
·实验方法 | 第21-36页 |
·M14-341蛋白的同源性分析 | 第21页 |
·目的基因M14-341 cDNA全长的扩增 | 第21-22页 |
·琼脂糖凝胶电泳检测及胶的回收 | 第22页 |
·目的基因M14-341 在野生型烟草及拟南芥中的扩增 | 第22-23页 |
·植物表达载体pBI-M14-341的构建 | 第23-26页 |
·转化大肠杆菌DH5α进行阳性克隆子筛选与鉴定 | 第26-27页 |
·电击法转化农杆菌EHA105菌株及阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第27-28页 |
·叶盘法转化烟草 | 第28页 |
·花头浸泡法转化拟南芥 | 第28-29页 |
·转基因再生植株的分子生物学检测 | 第29-33页 |
·转基因再生植株的组织化学检测 | 第33页 |
·转基因再生植株的形态学观察及异常形态分析 | 第33页 |
·烟草转基因植株的蛋白质双向电泳 | 第33-36页 |
第3章 结果与分析 | 第36-58页 |
·M14-341蛋白的同源性分析 | 第36-38页 |
·目的基因M14-341 cDNA全长的扩增 | 第38页 |
·目的基因M14-341 在野生型烟草及拟南芥中的扩增 | 第38-39页 |
·植物表达载体的构建 | 第39-41页 |
·质粒载体pBI121的制备 | 第39-40页 |
·质粒载体pBI121的酶切反应 | 第40页 |
·基因M14-341 cDNA全长的双酶切反应 | 第40-41页 |
·大肠杆菌DH5α阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第41-43页 |
·植物表达载体pBI-M14-341导入根癌农杆菌 | 第43-44页 |
·根癌农杆菌EHA105阳性克隆子的筛选 | 第43页 |
·根癌农杆菌EHA105阳性克隆子的鉴定 | 第43-44页 |
·根癌农杆菌介导的模式植物的遗传转化 | 第44-45页 |
·烟草遗传转化体系的优化 | 第44页 |
·叶盘法转化烟草及花头浸泡法转化拟南芥 | 第44-45页 |
·转基因再生植株的分子生物学检测 | 第45-47页 |
·M14-341在转基因再生烟草基因组DNA中的PCR检测 | 第45页 |
·Southern印迹检测 | 第45-46页 |
·M14-341在转基因再生烟草花、茎、叶中的RT-PCR检测 | 第46页 |
·Northern印迹检测 | 第46-47页 |
·烟草转基因再生植株的组织化学检测 | 第47-48页 |
·拟南芥T_0代转基因植株的分子检测 | 第48-49页 |
·T_0代拟南芥转基因植株基因组DNA的PCR检测 | 第48-49页 |
·T_0代拟南芥转基因植株的RT-PCR检测 | 第49页 |
·转基因烟草植株与对照植株差异表达蛋白的分析 | 第49-51页 |
·转基因再生植株的形态学观察及异常形态分析 | 第51-58页 |
·烟草转基因植株T_0代 | 第51-57页 |
·拟南芥转基因植株T_0代 | 第57-58页 |
第4章 讨论 | 第58-63页 |
·M14-341基因在转基因植株中的表达情况 | 第58页 |
·M14-341基因对花发育的影响 | 第58-59页 |
·M14-341基因对转基因植株花色的影响 | 第59页 |
·M14-341基因对转基因植株果实与种子的影响 | 第59-60页 |
·M14-341基因对转基因植株花期的影响 | 第60页 |
·少数转化植株中 A 类基因活性明显增高的原因分析 | 第60页 |
·转基因烟草植株与野生型植株差异表达蛋白分析 | 第60-61页 |
·本实验下一步的工作 | 第61-63页 |
结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
附录 | 第70-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第75-76页 |