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甜菜M14品系特异表达基因M14-341在模式植物中的表达研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第1章 前言第9-18页
   ·无融合生殖现象及其研究进展第9-10页
   ·本实验室的工作第10-11页
   ·植物MADS-box基因的研究进展第11-14页
     ·MADS-box基因概述第11-12页
     ·植物MADS-box蛋白的结构第12页
     ·MADS-box基因与花发育的关系第12-14页
     ·MADS-box基因调控花期及在花以外器官中的作用第14页
   ·农杆菌介导的植物遗传转化第14-15页
   ·蛋白质双向电泳技术第15-16页
   ·本实验的内容及目的第16-17页
   ·本实验的技术路线第17-18页
第2章 材料与方法第18-36页
   ·实验材料第18-21页
     ·植物材料第18页
     ·菌株及质粒载体第18-19页
     ·主要实验仪器及试剂第19页
     ·M14-341基因cDNA全长序列及引物第19-21页
   ·实验方法第21-36页
     ·M14-341蛋白的同源性分析第21页
     ·目的基因M14-341 cDNA全长的扩增第21-22页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测及胶的回收第22页
     ·目的基因M14-341 在野生型烟草及拟南芥中的扩增第22-23页
     ·植物表达载体pBI-M14-341的构建第23-26页
     ·转化大肠杆菌DH5α进行阳性克隆子筛选与鉴定第26-27页
     ·电击法转化农杆菌EHA105菌株及阳性克隆子的筛选与鉴定第27-28页
     ·叶盘法转化烟草第28页
     ·花头浸泡法转化拟南芥第28-29页
     ·转基因再生植株的分子生物学检测第29-33页
     ·转基因再生植株的组织化学检测第33页
     ·转基因再生植株的形态学观察及异常形态分析第33页
     ·烟草转基因植株的蛋白质双向电泳第33-36页
第3章 结果与分析第36-58页
   ·M14-341蛋白的同源性分析第36-38页
   ·目的基因M14-341 cDNA全长的扩增第38页
   ·目的基因M14-341 在野生型烟草及拟南芥中的扩增第38-39页
   ·植物表达载体的构建第39-41页
     ·质粒载体pBI121的制备第39-40页
     ·质粒载体pBI121的酶切反应第40页
     ·基因M14-341 cDNA全长的双酶切反应第40-41页
   ·大肠杆菌DH5α阳性克隆子的筛选与鉴定第41-43页
   ·植物表达载体pBI-M14-341导入根癌农杆菌第43-44页
     ·根癌农杆菌EHA105阳性克隆子的筛选第43页
     ·根癌农杆菌EHA105阳性克隆子的鉴定第43-44页
   ·根癌农杆菌介导的模式植物的遗传转化第44-45页
     ·烟草遗传转化体系的优化第44页
     ·叶盘法转化烟草及花头浸泡法转化拟南芥第44-45页
   ·转基因再生植株的分子生物学检测第45-47页
     ·M14-341在转基因再生烟草基因组DNA中的PCR检测第45页
     ·Southern印迹检测第45-46页
     ·M14-341在转基因再生烟草花、茎、叶中的RT-PCR检测第46页
     ·Northern印迹检测第46-47页
   ·烟草转基因再生植株的组织化学检测第47-48页
   ·拟南芥T_0代转基因植株的分子检测第48-49页
     ·T_0代拟南芥转基因植株基因组DNA的PCR检测第48-49页
     ·T_0代拟南芥转基因植株的RT-PCR检测第49页
   ·转基因烟草植株与对照植株差异表达蛋白的分析第49-51页
   ·转基因再生植株的形态学观察及异常形态分析第51-58页
     ·烟草转基因植株T_0代第51-57页
     ·拟南芥转基因植株T_0代第57-58页
第4章 讨论第58-63页
   ·M14-341基因在转基因植株中的表达情况第58页
   ·M14-341基因对花发育的影响第58-59页
   ·M14-341基因对转基因植株花色的影响第59页
   ·M14-341基因对转基因植株果实与种子的影响第59-60页
   ·M14-341基因对转基因植株花期的影响第60页
   ·少数转化植株中 A 类基因活性明显增高的原因分析第60页
   ·转基因烟草植株与野生型植株差异表达蛋白分析第60-61页
   ·本实验下一步的工作第61-63页
结论第63-65页
参考文献第65-70页
附录第70-74页
致谢第74-75页
攻读学位期间发表的学术论文第75-76页

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