| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-31页 |
| ·植物对昆虫的防御反应 | 第12-16页 |
| ·直接防御反应 | 第12-13页 |
| ·间接防御反应 | 第13-15页 |
| ·VOCs的功能 | 第13-14页 |
| ·VOCs的特异性 | 第14-15页 |
| ·耐受反应 | 第15-16页 |
| ·植物防御反应的代价 | 第16页 |
| ·引起植物识别昆虫并作出特异反应的激活子(ELICITOR) | 第16-17页 |
| ·在植物对昆虫的防御反应中植物激素的作用 | 第17-21页 |
| ·JA及其衍生物 | 第17-18页 |
| ·SA及其衍生物 | 第18-19页 |
| ·乙烯 | 第19-20页 |
| ·ABA | 第20页 |
| ·JA与SA之间的互作 | 第20-21页 |
| ·植物对昆虫的防御反应分子机制研究进展 | 第21-25页 |
| ·传统的研究基因表达的手段 | 第21-22页 |
| ·生物芯片(DNA microarray)技术 | 第22页 |
| ·高密度cDNA点阵技术(DNA macroarray) | 第22-23页 |
| ·植物被昆虫取食后的基因表达特点 | 第23-24页 |
| ·昆虫取食后,植物体内表达变化的基因涉及到许多代谢途径 | 第23页 |
| ·机械损伤和昆虫取食诱导植物的基因表达谱不同 | 第23-24页 |
| ·刺吸式口器和咀嚼式口器昆虫取食后植物的基因表达谱不同 | 第24页 |
| ·水稻、野生稻被昆虫诱导表达基因的研究进展 | 第24-25页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂研究进展 | 第25-27页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂和昆虫蛋白酶的相互作用 | 第26页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂的种类 | 第26页 |
| ·水稻蛋白酶抑制剂的研究概况 | 第26-27页 |
| ·植物被昆虫诱导表达启动子的研究进展 | 第27-29页 |
| ·真核生物启动子的基本结构 | 第27-28页 |
| ·诱导表达的启动子 | 第28-29页 |
| ·昆虫诱导启动子的研究概况 | 第29页 |
| ·本研究中涉及到的启动子结构和功能研究方法 | 第29-31页 |
| ·启动子的预测工具 | 第29-30页 |
| ·启动子强弱和功能的定性、定量检测 | 第30页 |
| ·凝胶阻滞实验(EMSA) | 第30-31页 |
| 2 研究的目的与意义 | 第31页 |
| ·得到水稻被二化螟诱导表达的基因 | 第31页 |
| ·二化螟特异诱导启动子的克隆与调控区域研究 | 第31页 |
| 3 材料与方法 | 第31-42页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·水稻品种 | 第31页 |
| ·基因组文库膜及平衡化cDNA文库 | 第31-32页 |
| ·载体、菌株和质粒 | 第32页 |
| ·供试昆虫 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-42页 |
| ·DNA的抽提及Southern杂交 | 第32页 |
| ·总RNA抽提及Northern blot | 第32页 |
| ·明恢63二化螟取食处理与机械损伤处理 | 第32-33页 |
| ·水稻二化螟诱导扣除文库的构建 | 第33页 |
| ·扣除文库克隆测序、序列拼接及EST的功能分析 | 第33-36页 |
| ·cDNA点阵膜的制备 | 第36-37页 |
| ·cDNA点阵杂交 | 第37页 |
| ·启动子候选片段及顺式作用因子的预测 | 第37页 |
| ·不同长度启动子片段的获得 | 第37-38页 |
| ·水稻的遗传转化 | 第38页 |
| ·GUS的组织化学染色及GUS的定量分析 | 第38-40页 |
| ·转基因植株GUS基因表达Northern blot分析 | 第40页 |
| ·激素处理 | 第40页 |
| ·凝胶阻滞实验 | 第40-42页 |
| ·核蛋白的抽提 | 第40-41页 |
| ·凝胶阻滞 | 第41-42页 |
| 4 结果与分析 | 第42-62页 |
| ·扣除文库概况 | 第42页 |
| ·构建文库的RNA质量检测 | 第42页 |
| ·文库的扣除效果检测 | 第42页 |
| ·扣除文库插入片段大小检测 | 第42页 |
| ·扣除文库CDNA序列的数量及大小 | 第42-44页 |
| ·扣除文库中的基因冗余度 | 第44-45页 |
| ·扣除文库中UNISEQUENCE的功能分析 | 第45-46页 |
| ·cDNA点阵杂交结果 | 第46-49页 |
| ·上升表达基因 | 第46-49页 |
| ·下降表达基因 | 第49页 |
| ·部分上升表达克隆在机械损伤和二化螟取食下时间表达谱 | 第49-50页 |
| ·B1-A04在基因组中的拷贝数及染色体定位 | 第50-51页 |
| ·B1-A04基因在水稻分蘖期和孕穗期不同器官表达情况 | 第51-53页 |
| ·-1569::GUS转基因植株的GUS基因和内源B1-A04基因对JA和ABA的反应 | 第53-57页 |
| ·Northern blot分析 | 第53页 |
| ·GUS活性变化 | 第53-57页 |
| ·不同启动子片段驱动下的GUS基因组成型表达量 | 第57-58页 |
| ·不同启动子片段驱动下的GUS在二化螟取食后的表达量 | 第58-60页 |
| ·凝胶阻滞试验 | 第60-62页 |
| 5 讨论 | 第62-74页 |
| ·关于二化螟接虫试验的一点体会 | 第62-64页 |
| ·扣除杂交技术是发现植物新基因的经济有效的手段 | 第64页 |
| ·扣除杂交技术与DNA MACROARRAY技术相结合的优点 | 第64页 |
| ·cDNA点阵杂交得到的差异表达克隆少于扣除杂交的原因 | 第64-65页 |
| ·二化螟取食后水稻基因表达特点 | 第65页 |
| ·本研究与YUAN等的研究比较 | 第65-67页 |
| ·相同之处 | 第66页 |
| ·不同之处 | 第66-67页 |
| ·机械损伤和二化螟取食后水稻基因表达特点不同 | 第67-69页 |
| ·-1569启动子片段的调控区域 | 第69页 |
| ·调控区域可能与-1569启动子表达模式有关的模体预测 | 第69-71页 |
| ·B1-A04的表达特点 | 第71页 |
| ·激素对B1-A04的调控作用 | 第71-72页 |
| ·本研究试验设计的不足之处 | 第72页 |
| ·本研究得到的启动子有待于进一步研究的内容 | 第72-73页 |
| ·-1569启动子片段的应用前景 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-90页 |
| 附录1:部分试验的详细步骤 | 第90-106页 |
| 附录2:个人简历 | 第106-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
