| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 上篇 文献综述 | 第12-30页 |
| 第一章 农药残留及其检测方法 | 第12-25页 |
| 1.农药残留现状和危害 | 第12-16页 |
| ·我国的农药残留现状 | 第12-13页 |
| ·农药残留的危害 | 第13-15页 |
| ·农药残留形成的原因 | 第15-16页 |
| 2.农药残留分析方法 | 第16-23页 |
| ·仪器分析法 | 第16-18页 |
| ·化学分析法 | 第18-19页 |
| ·生物分析法 | 第19-20页 |
| ·免疫分析法 | 第20-23页 |
| 3.甲胺磷残留及其检测方法研究进展 | 第23-24页 |
| 4.展望 | 第24-25页 |
| 第二章 单链抗体在大肠杆菌中的分泌性表达 | 第25-30页 |
| 1.scFv在E.coli中分泌性表达的原理 | 第25-26页 |
| 2.影响scFv在E.coil周质腔中分泌性表达的因素 | 第26-27页 |
| ·启动子、信号肽、scFv中的接头 | 第26页 |
| ·成熟scFv的一级结构 | 第26页 |
| ·宿主菌 | 第26-27页 |
| ·scFv的诱导表达条件 | 第27页 |
| ·共表达分子伴侣 | 第27页 |
| 3.影响scFv分泌至E.coli胞外的因素 | 第27-29页 |
| ·培养温度及IPTG的浓度 | 第27-28页 |
| ·加入改变细胞膜通透性及渗透压的化学物质 | 第28页 |
| ·采用渗漏型的菌株 | 第28页 |
| ·scFv直接分泌到培养基中 | 第28-29页 |
| 4.小结 | 第29-30页 |
| 下篇 研究内容 | 第30-61页 |
| 第一章 抗甲胺磷单链抗体细菌表达条件的优化及性质鉴定 | 第30-42页 |
| 1.材料与方法 | 第30-35页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·菌株及阳性噬菌体单链抗体克隆 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·培养基及溶液 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-35页 |
| ·包被抗原HM3-OVA的制备 | 第31-32页 |
| ·包被抗原的紫外可见光谱鉴定 | 第32页 |
| ·对数生长期E.coli HB2151的制备 | 第32页 |
| ·阳性克隆重组噬菌体的制备 | 第32页 |
| ·阳性克隆噬菌体对E.coli HB2151的感染 | 第32页 |
| ·可溶性抗甲胺磷单链抗体的初步表达 | 第32-33页 |
| ·可溶性抗甲胺磷单链抗体表达条件的优化 | 第33页 |
| ·可溶性单链抗体的大量制备 | 第33页 |
| ·可溶性单链抗体的纯化 | 第33-34页 |
| ·间接ELISA分析程序 | 第34页 |
| ·纯化抗体的效价测定 | 第34页 |
| ·抗体亲和常数的测定 | 第34-35页 |
| ·抗体的特异性测定 | 第35页 |
| 2.结果与分析 | 第35-39页 |
| ·甲胺磷人工抗原的合成与鉴定 | 第35页 |
| ·阳性克隆噬菌体对E.coli HB2151的感染 | 第35页 |
| ·可溶性抗甲胺磷单链抗体表达条件的优化 | 第35-37页 |
| ·诱导温度的优化 | 第35-36页 |
| ·诱导时间的优化 | 第36-37页 |
| ·诱导剂浓度的优化 | 第37页 |
| ·可溶性单链抗体的大量制备和纯化 | 第37-38页 |
| ·纯化抗体的效价 | 第38页 |
| ·抗体的亲和常数测定 | 第38-39页 |
| ·抗体的特异性 | 第39页 |
| 3.讨论 | 第39-42页 |
| 第二章 甲胺磷间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第42-51页 |
| 1.材料与方法 | 第42-44页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·间接ELISA分析程序 | 第42页 |
| ·间接竞争ELISA分析程序 | 第42-43页 |
| ·间接竞争ELISA最佳工作条件的确定 | 第43页 |
| ·ELISA标准曲线的建立及灵敏度评价 | 第43页 |
| ·精确度试验 | 第43-44页 |
| ·准确度试验 | 第44页 |
| 2.结果与分析 | 第44-49页 |
| ·甲胺磷竞争ELISA最佳工作条件的确定 | 第44-46页 |
| ·抗原抗体工作浓度的确定 | 第44页 |
| ·盐离子强度对竞争ELISA检测结果的影响 | 第44-45页 |
| ·不同封闭物对竞争ELISA检测结果的影响 | 第45-46页 |
| ·不同pH值对竞争ELISA检测结果的影响 | 第46页 |
| ·ELISA标准曲线的建立及灵敏度评价 | 第46-47页 |
| ·精确度分析 | 第47-48页 |
| ·准确度分析 | 第48-49页 |
| 3.讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 甲胺磷间接竞争ELISA方法的初步应用 | 第51-59页 |
| 1.材料与方法 | 第51-53页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第51-52页 |
| ·仪器 | 第51页 |
| ·试剂 | 第51-52页 |
| ·大田试样 | 第52页 |
| ·样品中甲胺磷残留量的测定 | 第52-53页 |
| ·GC分析 | 第52-53页 |
| ·ELISA测定 | 第53页 |
| ·甲胺磷在小白菜中的残留和消解动态 | 第53页 |
| 2.结果与分析 | 第53-57页 |
| ·样品中甲胺磷残留量的测定 | 第53-56页 |
| ·小白菜中甲胺磷的消解动态 | 第56-57页 |
| 3.讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录Ⅰ | 第69-70页 |
| 附录Ⅱ | 第70-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
