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猪肌内脂肪沉积相关调控基因的分离与鉴定

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
引言第13-14页
第一章 文献综述第14-33页
 1 猪肌内脂肪研究概况第14-33页
   ·脂肪细胞的发育第14-20页
     ·脂肪细胞的分化,增殖和肥大第14-16页
     ·脂肪细胞形成的分子生物学调控第16-20页
   ·肌内脂肪第20-23页
     ·肌内脂肪研究概况第21页
     ·肌内脂肪的合成第21-22页
     ·肌内脂肪的转运第22页
     ·肌内脂肪的分解第22-23页
   ·猪肌内脂肪沉积的分子调节机制第23-24页
   ·本研究的目的意义第24-25页
  参考文献第25-33页
第二章 不同肌内脂肪含量个体背最长肌基因差异表达研究第33-61页
 1.实验材料第33-36页
   ·试验动物第33页
   ·网络资源及软件第33-34页
   ·试剂第34-35页
     ·RNA提取试剂第34页
     ·差异显示PCR、RT-PCR、Real-Time PCR及电泳试剂第34页
     ·电泳所需溶液配方第34页
     ·染色溶液的配制第34-35页
     ·T-A克隆试剂第35页
     ·差异显示PCR引物第35页
   ·仪器设备第35-36页
 2 实验方法第36-45页
   ·背最长肌肌内脂肪含量的测定第36页
   ·背最长肌组织RNA提取第36-37页
   ·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA质量第37页
   ·RNA池的制备第37页
   ·DNase I处理第37页
   ·cDNA的合成第37-38页
   ·DDRT-PCR反应第38页
   ·12%聚丙烯酰胺凝胶制作及电泳第38-39页
   ·银染法显色第39页
   ·差异片段的切取第39-40页
   ·差异片段的再扩增第40页
   ·PCR产物克隆第40-42页
   ·电子延伸及部分测序第42页
   ·RT-PCR定性鉴定阳性克隆第42-43页
   ·real-time PCR定量分析第43-45页
 3.结果第45-53页
   ·RNA纯度与浓度第45页
   ·cDNA鉴定结果第45页
   ·mRNA差异显示结果第45-46页
   ·差异片段的回收与再次扩增第46页
   ·差异片段的克隆及PCR鉴定第46-47页
   ·差异片段的序列分析第47-48页
   ·电子延伸及部分测序第48-49页
   ·RT-PCR定性鉴定第49-50页
   ·real-time PCR定量分析结果第50-53页
 4.讨论第53-57页
   ·SRC-1 mRNA表达水平与肌内脂肪含量负相关第54-56页
   ·SRrp130 mRNA表达水平与肌内脂肪含量正相关第56-57页
 参考文献第57-61页
第三章 猪共激活子p160家族全长cDNA的克隆,表达及其对背最长肌肌内脂肪沉积的影响第61-81页
 引言第61-62页
 1 实验材料第62-63页
   ·试验动物第62页
   ·网络资源及软件第62页
   ·试剂第62页
     ·RNA提取试剂第62页
     ·克隆、Real-Time PCR及电泳试剂第62页
   ·仪器设备第62-63页
 2 实验方法第63-66页
   ·背最长肌肌内脂肪含量的测定及背最长肌组织RNA提取第63页
   ·第一链cDNA的合成第63页
   ·猪NCOA1,NcOA2,NCOA3克隆第63-64页
   ·PCR扩增及凝胶电泳第64页
   ·real-time PCR定量分析第64-66页
 3 结果第66-76页
   ·猪p160家族成员测序及选择性剪切体鉴定第66-72页
   ·猪p160家族成员氨基酸序列比对及其特征第72页
   ·猪p160家族成员在背最长肌中的表达以及它们对肌内脂肪含量的影响第72-76页
 4.讨论第76-78页
   ·猪p160家族成员在进化上高度保守第76页
   ·p160家族成员与肌内脂肪代谢第76-77页
   ·NCOA2是肌内脂肪QTL区域内的候选基因第77-78页
 参考文献第78-81页
论文总体结论第81-83页
致谢第83-85页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第85-86页

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