摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 Taq DNA 聚合酶研究进展 | 第9-23页 |
·提高Taq DNA 聚合酶的续进性 | 第12-13页 |
·提高Taq DNA 聚合酶的忠实性 | 第13-14页 |
·提高Taq DNA 聚合酶的耐热性 | 第14页 |
·通过点突变降低Taq DNA 聚合酶5'→3'外切酶活性 | 第14页 |
·降低Taq DNA 聚合酶对ddNTP 的抵抗 | 第14-15页 |
·提高Taq DNA 聚合酶最适反应温度实现热启动PCR | 第15-16页 |
参考文献 | 第16-23页 |
第二章 Taq DNA 聚合酶的改造 | 第23-43页 |
第一节 引言 | 第23-24页 |
第二节 材料与方法 | 第24-33页 |
第三节 结果 | 第33-39页 |
·扩增引物验证G46D 突变结果 | 第33-34页 |
·扩增引物验证G46D+F667Y 突变结果 | 第34-36页 |
·双酶切验证KlenTaq 的制备结果 | 第36页 |
·双酶切验证Taq-N 的制备结果 | 第36-37页 |
·酶纯化和活性验证 | 第37-39页 |
第四节 讨论 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
第三章 改造后 Taq DNA 聚合酶的应用 | 第43-66页 |
第一节 引言 | 第43-45页 |
第二节 材料与方法 | 第45-51页 |
第三节 结果 | 第51-60页 |
·在探针检测PCR 体系中的应用 | 第51-53页 |
·在PAP 技术中的应用 | 第53-57页 |
·酶抗体的应用实现热启动PCR的结果 | 第57-60页 |
第四节 讨论 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
总结 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |