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构建组织工程骨软骨复合组织的实验研究

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 绪论第11-23页
   ·骨组织工程学概况第11-12页
   ·组织工程骨软骨复合组织的研究现状第12-13页
   ·种子细胞第13-17页
     ·BMSCs的生物学特性第13-14页
     ·BMSCs的分离纯化第14页
     ·BMSCs的细胞形态及增殖特点第14-15页
     ·BMSCs的免疫表型及其鉴定第15-16页
     ·BMSCs的可塑性及生物因子调控第16页
     ·BMSCs的成骨鉴定第16-17页
     ·BMSCs的成软骨鉴定第17页
   ·支架材料第17-19页
     ·聚乙醇酸-乳酸共聚物(PLGA)生物支架的应用现状第18页
     ·PLGA的不足及改进第18-19页
   ·影响BMSCs骨向和软骨向诱导的因素第19-21页
     ·常规化学药物第19页
     ·外原性生长因子第19-21页
   ·课题研究思路及目的第21页
   ·实验的研究内容第21-22页
   ·创新点第22-23页
2 实验一 BMSCs体外培养向成骨和成软骨定向诱导的研究第23-42页
   ·研究目的第23页
   ·实验材料第23-25页
     ·实验动物第23页
     ·主要试剂第23-25页
   ·实验方法第25-29页
     ·实验试剂的配制第25-27页
     ·BMSCs的分离和体外培养第27页
     ·BMSCs的形态学观察第27-28页
     ·BMSCs的鉴定第28页
     ·BMSCs的生长曲线,细胞周期及活力的检测第28页
     ·BMSCs骨向分化的检测第28页
     ·BMSCs软骨向分化的检测第28-29页
   ·统计方法第29页
   ·结果第29-34页
     ·形态学观察第29-30页
     ·细胞鉴定第30页
     ·细胞生长曲线第30页
     ·细胞周期及活力的检测第30页
     ·BMSCs骨向分化的检测第30-33页
     ·BMSCs软骨向分化的检测第33-34页
   ·讨论第34-36页
     ·不同分离方法所得BMSCs的差异第34页
     ·BMSCs的生物学特性第34-35页
     ·BMSCs骨向和软骨向的诱导分化第35-36页
   ·结论第36-37页
   ·附图第37-42页
3 实验二 胶原修饰的PLGA制作及其细胞相容性的研究第42-50页
   ·研究目的第42页
   ·实验材料第42页
     ·实验动物第42页
     ·主要试剂和仪器第42页
   ·实验方法第42-44页
     ·II型胶原修饰的PLGA制各合成第42页
     ·PLGA孔隙率的检测,质量法测定其孔隙率第42-43页
     ·PLGA多孔支架孔径结构的观察第43页
     ·BMSCs的培养第43页
     ·BMSCs与II型胶原修饰的PLGA复合第43页
     ·BMSCs种植到II型胶原修饰的PLGA后扫描电镜观察第43-44页
     ·BMSCs细胞增殖值的检测第44页
   ·统计方法第44页
   ·结果第44-45页
     ·II型胶原修饰的PLGA扫描电镜观察第44页
     ·II型胶原修饰的PLGA空隙率的测定第44页
     ·BMSCs与II型胶原修饰的PLGA复合及增殖的形态学观察第44-45页
     ·细胞增殖值的测定结果第45页
   ·讨论第45-47页
     ·生物支架材料的制作方法第45-46页
     ·PLGA的细胞粘附性第46-47页
     ·BMSCs在PLGA上的生长第47页
   ·结论第47-49页
   ·附图第49-50页
4 实验三 构建组织工程骨软骨复合组织的实验研究第50-67页
   ·研究目的第50页
   ·实验材料第50页
     ·实验动物第50页
     ·主要试剂和仪器第50页
   ·实验方法第50-53页
     ·复合BMP-2和I型胶原PLGA的制作第50页
     ·复合bFGF,TGF-β_1和II型胶原PLGA的制作第50-51页
     ·BMSCs的体外培养及扩增第51页
     ·BMSCs种植到复合不同生长因子和不同胶原的PLGA上第51页
     ·大鼠的分组情况第51页
     ·植入大鼠肌袋内构建骨软骨复合组织第51页
     ·观察动物术后活动及伤口愈合情况第51-52页
     ·动物取材第52页
     ·骨软骨复合组织的大体标本观察第52页
     ·骨软骨复合组织的HE染色第52页
     ·骨软骨复合组织的甲苯胺蓝染色第52页
     ·复合组织的II型胶原染色第52页
     ·骨软骨复合组织的ALP染色第52页
     ·复合组织的透视电镜检测第52-53页
     ·复合组织的扫描电镜检测第53页
   ·统计方法第53页
   ·结果第53-58页
     ·PLGA复合支架的情况第53页
     ·术后 SD大鼠的情况第53页
     ·术后细胞支架复合组织大体观察第53-54页
     ·术后细胞支架复合组织 HE染色第54页
     ·术后细胞支架复合组织甲苯氨蓝染色第54-55页
     ·术后细胞支架复合组织II型胶原染色第55-56页
     ·术后细胞支架复合组织ALP染色第56-57页
     ·术后12周细胞支架复合组织电镜扫描第57-58页
     ·术后12周细胞支架复合组织电镜透视第58页
   ·讨论第58-62页
     ·种子细胞的选择第58-59页
     ·支架材料的制备与负载细胞因子的选择第59-60页
     ·构建软骨下骨的重要性第60-61页
     ·新型组织工程骨软骨复合组织的制作特点第61-62页
   ·结论第62-63页
   ·附图第63-67页
5 英文缩略词第67-68页
6 参考文献第68-74页
7 致谢第74-75页
8 发表论文第75页

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