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MRSA的SCCmec分子分型及其耐药性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-15页
1 前言第15-40页
   ·MRSA 的研究进展第15-36页
     ·MRSA 的致病性及流行现状第15-17页
     ·MRSA 的耐药现状及多重耐药第17-19页
     ·MRSA 的分子生物学研究现状第19-36页
   ·MRSA 耐药性、SCCMEC 分型及其多态性研究的意义第36-37页
   ·国内MRSA 耐药性、SCCMEC 分型的研究现状第37-38页
   ·本研究的目标第38-39页
   ·本研究的技术路线第39-40页
2. 材料与方法第40-53页
   ·材料第40-44页
     ·菌株来源第40页
     ·主要仪器设备第40页
     ·统一测定用药敏纸片第40-41页
     ·MRSA 测定琼脂第41页
     ·E-TEST MIC 测定卡第41页
     ·PBP2A 乳胶凝集检测试剂盒(PBP2A TEST KIT)第41-42页
     ·进行SCCMEC 分型的待测菌株第42页
     ·细菌DNA 提取、SCCMEC 分型用主要试剂第42-43页
     ·PCR 引物第43-44页
   ·方法第44-53页
     ·金黄色葡萄球菌的收集与鉴定第44页
     ·MRSA 的统一筛选与确证第44-45页
     ·代表性药物的选择原则第45页
     ·常用代表性药物的耐药性及MIC 的统一测定第45-46页
     ·DNA 提取前的细菌培养第46-47页
     ·细菌DNA 的提取第47-48页
     ·多位点PCR 测定第48-52页
     ·位点扩增产物的测序分析第52页
     ·统计学分析方法第52-53页
3. 结果与分析第53-105页
   ·金黄色葡萄球菌鉴定复核及MRSA 的确证结果第53-54页
   ·DNA 提取及细菌培养方法测试结果第54页
   ·多位点PCR 体系优化结果第54-56页
     ·镁离子浓度和扩增循环参数优化结果第54-55页
     ·TAQDNA 聚合酶和4×DNTP 用量优化结果第55页
     ·各位点引物用量的优化结果第55-56页
     ·多位点PCR 反应体系、参数的确定及扩增第56页
     ·参数优化后单位点、多位点PCR 测定效果第56页
   ·各位点扩增产物测序结果及与已知序列的比较第56-78页
     ·A 位点产物序列及比较第56-62页
     ·B 位点产物序列及比较第62-66页
     ·C 位点产物序列及比较第66-69页
     ·E 位点产物序列及比较第69-70页
     ·F 位点产物序列及比较第70-74页
     ·H 位点扩增产物及比较第74-77页
     ·M 位点扩增产物及比较第77-78页
   ·海口地区MRSA 的SCCMEC 分型结果第78-83页
   ·本地的SCCMEC 型、亚型与已有型、亚型的多位点PCR 产物电泳图谱比较第83-86页
   ·各型、亚型的构成情况第86页
   ·携带各型SCCMEC 的MRSA 菌株的分布状况第86-89页
     ·Ⅲ型SCCMEC 菌株的分布特点第86页
     ·Ⅳ-DCS 型SCCMEC 菌株的分布特点第86-88页
     ·本次研究发现的新SCCMEC 型或亚型的分布特点第88-89页
   ·海口地区MRSA 的分布第89-95页
     ·不同医院MRSA 阳性率及其比较第89页
     ·2000-2004 年海口地区MRSA 在性别间的分布情况第89-90页
     ·2000-2004 年海口地区MRSA 在年龄组间的分布情况第90页
     ·医院门诊与各科住院病人MRSA 的阳性率第90-91页
     ·不同标本的MRSA 阳性率及比较第91-92页
     ·2000-2004 年的标本构成及其比较第92-93页
     ·标本和性别对MRSA 阳性率的影响第93页
     ·2000-2004 年MRSA 阳性率的发展变化趋势第93-94页
     ·一年中不同季节的MRSA 阳性率比较第94-95页
   ·海口地区MRSA 的耐药性第95-99页
     ·苯唑西林、万古霉素对MRSA 的MIC第95页
     ·MRSA 对代表性药物的耐药率和药物对MRSA 的MIC第95-96页
     ·MRSA 对代表性药物耐药率的变化趋势第96-98页
     ·MRSA 对几类抗生素的多重耐药模式及其多重耐药率第98-99页
   ·携带不同SCCMEC 型别的MRSA 的耐药特性第99-105页
     ·携带Ⅲ型SCCMEC 的MRSA 的耐药特性第99-101页
     ·携带Ⅵ-DCS SCCMEC 亚型的MRSA 的耐药特性第101-103页
     ·携带新SCCMEC 型或亚型的MRSA 的耐药特性第103-105页
4. 讨论第105-115页
   ·K-B、MIC 和PBP2A 法对MRSA 的检测效率第105页
   ·多位点PCR 测定用DNA 提取及细菌培养第105页
   ·多位点PCR 测定体系第105-106页
   ·位点扩增序列的测定与比较第106页
   ·海口地区携带新SCCMEC 型或亚型的MRSA 来源分析第106-108页
   ·本地新型或亚型与原有型、亚型的联系第108-109页
   ·海口地区MRSA 携带的SCCMEC 型别及其特点第109-110页
   ·海口地区MRSA 的分布特点第110-111页
   ·海口地区MRSA 的耐药特性第111-112页
   ·SCCMEC 型别与耐药表型的关系第112页
   ·海口地区MRSA 的防治对策第112-113页
   ·SCCMEC 研究与应用前景第113-114页
   ·今后研究设想第114-115页
5. 结论第115-122页
缩略语第122-126页
附录一 研究成果第126-127页
致谢第127页

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