提要 | 第1-7页 |
英文缩写词表 | 第7-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一篇 文献综述 | 第16-58页 |
第一章 猪胸膜肺炎病原研究进展 | 第16-30页 |
1 病原 | 第16-18页 |
2 流行病学 | 第18-19页 |
3 临床症状 | 第19-20页 |
4 病理变化与发病机制 | 第20-21页 |
5 诊断 | 第21-23页 |
6 治疗 | 第23-24页 |
7 预防 | 第24-27页 |
8 综合防治 | 第27-28页 |
9 展望 | 第28-30页 |
第二章 差异表达基因筛选方法的研究进展 | 第30-40页 |
1 消减杂交技术 | 第30-32页 |
2 mRNA 差异显示技术 | 第32-33页 |
3 cDNA 代表性差异分析法 | 第33-36页 |
4 抑制性差减杂交技术 | 第36-39页 |
5 结语 | 第39-40页 |
第三章 蛋白质的展示技术原理及应用 | 第40-58页 |
1 体内筛选技术 | 第40-45页 |
2 体外展示技术 | 第45-58页 |
第二篇 研究内容 | 第58-192页 |
第一章 猪胸膜肺炎放线杆菌分离与鉴定 | 第58-70页 |
1 材料与方法 | 第58-62页 |
2 结果 | 第62-66页 |
·细菌形态与染色 | 第62-63页 |
·细菌培养 | 第63-64页 |
·细菌生化特性 | 第64页 |
·PCR 鉴定 | 第64页 |
·血清型鉴定 | 第64-65页 |
·毒力测定 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
·病料中APP 分离 | 第66-67页 |
·APP 混合感染 | 第67页 |
·PCR 对APP 的鉴定 | 第67页 |
·APP 对小鼠毒力 | 第67-68页 |
4 小结 | 第68-70页 |
第二章 猪胸膜肺炎放线杆菌1、5 型毒力测定及交叉免疫保护试验 | 第70-76页 |
1 材料与方法 | 第70-72页 |
2 结果 | 第72-74页 |
·半数致死量测定 | 第72-73页 |
·免疫保护 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-75页 |
·交叉免疫保护 | 第74-75页 |
·多价疫苗 | 第75页 |
4 小结 | 第75-76页 |
第三章 猪胸膜肺炎放线杆菌1 型与5 型cDNA 差减文库构建及差异基因分析 | 第76-118页 |
1 材料与方法 | 第76-90页 |
2 结果 | 第90-111页 |
·RNA 制备与纯化 | 第90页 |
·cDNA 合成与酶切 | 第90页 |
·RDA | 第90-91页 |
·差减文库构建与克隆鉴定 | 第91-92页 |
·差异基因测序、分析 | 第92-102页 |
·southern 杂交 | 第102-106页 |
·差减基因同源序列检索 | 第106-111页 |
3 讨论 | 第111-116页 |
·关于APP 不同血清型的差异基因研究必要性 | 第111-113页 |
·差异表达基因与交叉免疫保护 | 第113页 |
·关于差异表达基因的验证 | 第113-115页 |
·探针质量与杂交结果 | 第115页 |
·DNA 探针结果和cDNA 探针杂交结果的比较分析 | 第115-116页 |
4 小结 | 第116-118页 |
第四章 猪胸膜肺炎放线杆菌1 型与5 型基因组DNA 差减文库构建及差异基因分析 | 第118-134页 |
1 材料与方法 | 第118-119页 |
2 结果 | 第119-130页 |
·DNA 提取与纯化 | 第119-120页 |
·DNA 酶切 | 第120页 |
·RDA | 第120-122页 |
·差减文库构建与鉴定 | 第122-123页 |
·差异基因测序与分析 | 第123-127页 |
·Southern 杂交分析 | 第127页 |
·基因库同源序列检索 | 第127-130页 |
3 讨论 | 第130-133页 |
·基因组DNA 差减与cDNA 差减 | 第130-131页 |
·RDA 技术的影响因素 | 第131-133页 |
4 小结 | 第133-134页 |
第五章 猪胸膜肺炎放线杆菌1 型与5 型差异表达基因核糖体展示及免疫应答相关基因筛选 | 第134-160页 |
1 材料与方法 | 第134-144页 |
2 结果 | 第144-156页 |
·核糖体展示用上游引物PCR 合成 | 第144-145页 |
·高免疫血清制备 | 第145-146页 |
·差减基因文库改造 | 第146-147页 |
·核糖体展示文库的构建 | 第147-148页 |
·免疫应答相关基因的筛选 | 第148-149页 |
·免疫应答相关基因的克隆、测序 | 第149-150页 |
·免疫应答相关基因序列分析 | 第150-154页 |
·基因库同源序列检索 | 第154-156页 |
3 讨论 | 第156-159页 |
·核糖体展示技术 | 第156-158页 |
·免疫筛选 | 第158页 |
·差减基因与免疫应答相关基因 | 第158-159页 |
4 小结 | 第159-160页 |
第六章 猪胸膜肺炎放线杆菌1 型和5 型基因组差减基因核糖体展示文库构建及型特异免疫应答相关基因的筛选 | 第160-168页 |
1 材料与方法 | 第160页 |
2 结果 | 第160-165页 |
·基因组DNA 差异基因改造 | 第160-161页 |
·核糖体展示文库的构建 | 第161页 |
·免疫应答相关基因的筛选 | 第161页 |
·免疫应答相关基因的克隆、测序 | 第161页 |
·免疫应答相关基因序列分析 | 第161-165页 |
·基因库同源序列检索 | 第165页 |
3 讨论 | 第165-166页 |
·基因组型特异免疫应答相关基因 | 第165-166页 |
·差异基因与免疫应答相关基因 | 第166页 |
4 小结 | 第166-168页 |
第七章 短小棒状杆菌对APP 感染免疫保护研究 | 第168-192页 |
1 材料与方法 | 第168-174页 |
2 结果 | 第174-184页 |
·血清检测结果 | 第174页 |
·脾淋巴活性细胞检测 | 第174-177页 |
·小鼠攻毒 | 第177-178页 |
·病理切片观察 | 第178-180页 |
·小鼠体内APP 的分离 | 第180-181页 |
·小鼠体内APP 检测 | 第181-184页 |
3 讨论 | 第184-191页 |
·CP 免疫与预防APP 感染 | 第184-185页 |
·CP免疫保护的作用方式 | 第185-187页 |
·CP 免疫预防APP 感染的效果 | 第187页 |
·APP 1 型、5 型免疫保护机理的推断 | 第187-188页 |
·CP 免疫预防APP 感染的意义 | 第188-191页 |
4 小结 | 第191-192页 |
结论 | 第192-193页 |
参考文献 | 第193-212页 |
中文摘要 | 第212-214页 |
英文摘要 | 第214-217页 |
攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第217-219页 |
致谢 | 第219-220页 |
导师及作者简介 | 第220-221页 |