摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
·RNAi技术的研究进展 | 第11-16页 |
·RNAi的作用机制 | 第11-12页 |
·RNAi的特点 | 第12-13页 |
·RNAi技术在植物中的应用 | 第13-16页 |
·基因工程与油菜改良的研究进展 | 第16-21页 |
·基因工程技术与油菜种子脂肪酸改良 | 第16-19页 |
·基因工程技术与抗虫、抗病、抗除草剂油菜品种选育 | 第19-21页 |
·转基因与雄性不育 | 第21-22页 |
·研究的目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 甘蓝型油菜FAD2基因的克隆 | 第24-30页 |
·材料 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-28页 |
·植物总RNA的抽提 | 第25页 |
·反转录cDNA第一链 | 第25-26页 |
·目的基因的PCR扩增 | 第26页 |
·PCR产物的回收 | 第26-27页 |
·PCR产物3'端加尾 | 第27页 |
·PCR产物与测序载体的连接 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第27页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-29页 |
·小结与讨论 | 第29-30页 |
第三章 甘蓝型油菜FAD2基因的原核表达 | 第30-39页 |
·原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
·材料 | 第30页 |
·方法 | 第30-32页 |
·FAD2基因在BL21(DE3)中的表达 | 第32-34页 |
·杂种蛋白的SDS-PAGE凝胶电泳 | 第33页 |
·试剂配制及制胶 | 第33-34页 |
·样品处理 | 第34页 |
·电泳 | 第34页 |
·染色与脱色 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-37页 |
·原核表达载体的构建 | 第34-36页 |
·FAD2基因在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第36-37页 |
·小结与讨论 | 第37-39页 |
第四章 FAD2基因ihpRNA载体在油菜中的转化 | 第39-56页 |
·FAD2ihpRNAi表达载体构建 | 第39-41页 |
·材料 | 第39页 |
·方法 | 第39-41页 |
·FAD2基因ihpRNA载体在油菜中的转化 | 第41-45页 |
·材料 | 第41-43页 |
·方法 | 第43-45页 |
·转基因油菜的分子生物学鉴定 | 第45-47页 |
·材料 | 第45页 |
·方法 | 第45-47页 |
·转基因油菜种子脂肪酸检测 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-53页 |
·FAD2ihpRNAi表达载体构建 | 第47-52页 |
·甘蓝型油菜的转化与抗bar转基因苗的获得 | 第52页 |
·转基因油菜PCR检测 | 第52页 |
·转基因油菜种子脂肪酸检测 | 第52-53页 |
·小结与讨论 | 第53-56页 |
·Napin启动子的克隆 | 第53-54页 |
·甘蓝型油菜的转化 | 第54-55页 |
·转基因油菜种子脂肪酸检测 | 第55-56页 |
第五章 讨论与总结 | 第56-60页 |
·讨论 | 第56-58页 |
·RNAi技术的应用 | 第56页 |
·脂肪酸的合成调控 | 第56-58页 |
·油菜的遗传转化 | 第58页 |
·小结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68页 |