| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 英文缩写名词索引 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-43页 |
| 1 鱼类免疫学发展 | 第15-16页 |
| ·鱼类的免疫系统 | 第16-18页 |
| ·免疫器官和组织 | 第16-18页 |
| ·免疫细胞 | 第18-20页 |
| ·鱼类免疫机制 | 第20-21页 |
| ·非特异性免疫 | 第20页 |
| ·特异性免疫 | 第20-21页 |
| 2 鱼类细胞因子研究进展 | 第21-30页 |
| ·鱼类白细胞介素 | 第21-23页 |
| ·鱼类干扰素 | 第23-24页 |
| ·Mx蛋白和干扰素调节因子 | 第24-25页 |
| ·转化生长因子β | 第25页 |
| ·肿瘤坏死因子α | 第25-26页 |
| ·趋化因子 | 第26-27页 |
| ·NK细胞增强因子 | 第27-28页 |
| ·主要组织相容性复合体 | 第28-29页 |
| ·转铁蛋白 | 第29页 |
| ·α1-微球蛋白和Bikunin蛋白 | 第29-30页 |
| 3 本研究的意义 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-43页 |
| 第二章 抑制性消减cDNA文库构建及评价 | 第43-60页 |
| 1 材料与方法 | 第43-53页 |
| ·材料 | 第43-45页 |
| ·实验动物与菌株 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44页 |
| ·接头和引物 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-53页 |
| ·动物材料处理 | 第45页 |
| ·总RNA的提取 | 第45页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第45-46页 |
| ·抑制性消减杂交(SSH)文库 | 第46-50页 |
| ·消减cDNA文库的构建与效率评价 | 第50-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-56页 |
| ·双链cDNA合成和Rsa Ⅰ酶切效率 | 第53-54页 |
| ·接头连接效率检测 | 第54页 |
| ·消减杂交产物的2次PCR扩增结果 | 第54-55页 |
| ·消减杂交效率检测 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| ·总RNA的提取和mRNA的纯化 | 第56-57页 |
| ·抑制性消减杂交与文库建立 | 第57页 |
| ·消减质量与内参基因的选择 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| 第三章 草鱼肠道组织消减cDNA文库的筛选及ESTs分析 | 第60-71页 |
| 1 材料与方法 | 第60-62页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-62页 |
| ·单克隆的挑选和培养 | 第61页 |
| ·消减cDNA片段的初步鉴定 | 第61页 |
| ·序列加工及比较分析 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-66页 |
| ·PCR检测消减文库质量 | 第62页 |
| ·消减cDNA EST序列的统计与分析 | 第62-63页 |
| ·消减cDNA EST功能的分类 | 第63-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 第四章 草鱼肠道免疫相关基因MHC Ⅱ αcDNA的克隆及序列分析 | 第71-99页 |
| 1.材料与方法 | 第72-80页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·动物材料 | 第72页 |
| ·主要仪器设备 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·引物 | 第72-73页 |
| ·实验方法 | 第73-80页 |
| ·总RNA的提取 | 第73页 |
| ·mRNA的分离纯化 | 第73-74页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第74-76页 |
| ·草鱼MHC Ⅱ α cDNA片段的获得 | 第76-77页 |
| ·PCR产物的鉴定和胶回收 | 第77-78页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第78页 |
| ·目的片断的连接和转化 | 第78-79页 |
| ·序列分析 | 第79页 |
| ·系统发育树的构建 | 第79页 |
| ·MHC Ⅱα基因的RT-PCR分析 | 第79-80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-91页 |
| ·RNA的提取 | 第80-81页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα基因cDNA全长及序列分析 | 第81-90页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα基因cDNA全长的获得 | 第81-84页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα氨基酸序列信号肽预测 | 第84-85页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα氨基酸序列的二级和三级结构预测 | 第85-86页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα氨基酸序列与其他物种的同源性比较 | 第86-88页 |
| ·系统发育分析 | 第88-90页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα基因的RT-PCR分析 | 第90-91页 |
| 3 讨论 | 第91-94页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα基因cDNA序列的基本特征 | 第91-92页 |
| ·草鱼MHC Ⅱα基因在不同组织中的表达 | 第92-93页 |
| ·MHC基因与鱼类遗传育种 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-99页 |
| 第五章 草鱼免疫相关基因α1-microglobullin/bikunin precursor cDNA的克隆及序列分析 | 第99-121页 |
| 1 材料与方法 | 第99-104页 |
| ·材料 | 第99-100页 |
| ·动物材料及菌种 | 第99页 |
| ·引物 | 第99-100页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第100页 |
| ·实验方法 | 第100-104页 |
| ·总RNA的提取 | 第100页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第100-101页 |
| ·草鱼AMBP cDNA片段的获得 | 第101-102页 |
| ·序列分析 | 第102页 |
| ·系统发育树的构建 | 第102-103页 |
| ·草鱼AMBP基因的RT-PCR分析 | 第103-104页 |
| 2 结果与分析 | 第104-116页 |
| ·AMBP基因cDNA的克隆及序列分析 | 第104-107页 |
| ·草鱼AMBP二级结构和三级结构的预测 | 第107-110页 |
| ·草鱼AMBP氨基酸序列的同源性比较与系统进化分析 | 第110-114页 |
| ·草鱼AMBP基因在组织中的表达分布 | 第114-116页 |
| 3 讨论 | 第116-119页 |
| ·草鱼AMBP基因cDNA序列分析 | 第116-117页 |
| ·草鱼AMBP基因在不同组织中的表达 | 第117-119页 |
| 参考文献 | 第119-121页 |
| 结论 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
| 作者简历 | 第123-124页 |
| 博士在读期间的学术成果 | 第124-125页 |
| 附录1 测序图谱 | 第125-131页 |
| 附录2 GenBank接受序列 | 第131-136页 |
