| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-21页 |
| 1 结核病流行现状和特点 | 第10-11页 |
| 2 结核分支杆菌主要分泌蛋白的研究进展 | 第11-14页 |
| ·分泌性蛋白的研究概况 | 第11页 |
| ·目前结核杆菌主要分泌蛋白的特性研究 | 第11-14页 |
| 3.结核分支杆菌有关蛋白检测的研究进展 | 第14-18页 |
| ·传统的结核菌素皮内变态反应 | 第14页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第14-17页 |
| ·γ-干扰素试验 | 第17-18页 |
| ·淋巴细胞增生试验 | 第18页 |
| ·免疫过氧化物酶 | 第18页 |
| 4.结语 | 第18-21页 |
| 第二章 结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的克隆、表达和纯化 | 第21-36页 |
| 前言 | 第21页 |
| 1 材料 | 第21-24页 |
| ·主要材料和试剂 | 第21页 |
| ·部分溶液的配制 | 第21-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-29页 |
| ·引物设计 | 第24-25页 |
| ·DNA的提取 | 第25页 |
| ·CFP10和ESAT6基因片段的获得 | 第25页 |
| ·CFP10-ESAT6融合基因的获得 | 第25页 |
| ·基因片段的纯化和回收 | 第25页 |
| ·测序载体的构建 | 第25-27页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的高效表达 | 第27页 |
| ·Western blot免疫印迹反应鉴定表达产物 | 第27-28页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·重组蛋白的浓度和含量的测定 | 第28-29页 |
| 3.结果 | 第29-35页 |
| ·目的基因的扩增结果 | 第29页 |
| ·CFP10-ESAT6融合基因片段扩增结果 | 第29-30页 |
| ·表达载体pET21a-CFPIO-ESAT6双酶切鉴定 | 第30页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第30-31页 |
| ·目的基因表达产物的Western blot分析结果 | 第31-32页 |
| ·目的基因表达条件的优化 | 第32-33页 |
| ·目的蛋白表达形式的分析 | 第33页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·蛋白含量的确定 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 CFP10-ESAT-抗体的制备及检测方法的建立和应用 | 第36-47页 |
| 1 材料 | 第36-38页 |
| ·主要材料及试剂 | 第36页 |
| ·标本来源 | 第36-37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·主要及培养基配置 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| 2 方法 | 第38-41页 |
| ·CFP10-ESAT6多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| ·应用ELISA方法检测血清中CFP10-ESAT6抗体效价 | 第38-39页 |
| ·抗CFP10-ESAT6抗体的纯化 | 第39页 |
| ·辣根过氧化物酶的标记 | 第39-40页 |
| ·双抗体夹心法工作条件的确定 | 第40页 |
| ·双抗体夹心法敏感性的确定 | 第40页 |
| ·双抗夹心法敏感性实验 | 第40-41页 |
| ·临床标本的鉴定 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-45页 |
| ·兔血清中抗体效价的测定 | 第41-42页 |
| ·抗体的纯化 | 第42页 |
| ·双抗体夹心法工作浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·敏感性的确定 | 第43页 |
| ·双抗夹心法与结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌上清培养物的鉴定 | 第43-44页 |
| ·临床标本检测 | 第44-45页 |
| 4.讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 缩略语表 | 第55-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文· | 第60页 |
