摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-12页 |
前言 | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-30页 |
1 转基因植物及口服疫苗 | 第15-20页 |
·转基因植物 | 第15-16页 |
·口服疫苗 | 第16-20页 |
·利用植物生产口服疫苗的途径 | 第17页 |
·植物口服疫苗的作用机理 | 第17页 |
·转基因植物生产口服疫苗的优点 | 第17-18页 |
·已研制的口服疫苗 | 第18-19页 |
·转基因植物口服疫苗的动物实验和临床实验 | 第19-20页 |
2 HBsAG基因 | 第20-26页 |
·乙型肝炎病毒(HBV) | 第20-22页 |
·HBsAg基因的结构 | 第22-23页 |
·转基因植物生产HBsAg疫苗的研究进展 | 第23-24页 |
·国内植物转HBsAg基因的研究 | 第23页 |
·国外在植物表达HBsAg基因的研究 | 第23-24页 |
·转基因植物中HBsAg表达量 | 第24页 |
·稳定高效的表达载体 | 第24-26页 |
·问题及展望 | 第26页 |
3 苹果转基因研究进展 | 第26-30页 |
·导入的外源基因种类及其表达和遗传 | 第26-27页 |
·影响转化的因素 | 第27-28页 |
·菌株 | 第27-28页 |
·侵染时间 | 第28页 |
·共培养 | 第28页 |
·酚类物质 | 第28页 |
·转化植株选择策略 | 第28页 |
·存在的问题及展望 | 第28-30页 |
·存在的问题 | 第28-29页 |
·展望 | 第29-30页 |
第二章 农杆菌介导的乙肝表面抗原大蛋白(S1S2S)基因不同表达载体转化苹果‘凉香季节’的研究 | 第30-41页 |
1 材料和方法 | 第31-35页 |
·材料 | 第31-32页 |
·植物材料 | 第31页 |
·工程菌株和载体质粒 | 第31-32页 |
·目的基因和载体质粒 | 第31页 |
·工程菌株及其培养基(液) | 第31-32页 |
·培养基 | 第32页 |
·GUS染色液配方 | 第32页 |
·实验仪器 | 第32页 |
·方法 | 第32-35页 |
·苹果转化的基本程序 | 第32-33页 |
·遗传转化体系的优化 | 第33页 |
·再生体系的优化 | 第33页 |
·叶片与组培苗Km选择压的确定 | 第33页 |
·抑菌抗生素种类和浓度的确定 | 第33页 |
·GUS染色鉴定 | 第33页 |
·PCR法检测 | 第33-35页 |
·植物基因组DNA的抽提 | 第33-34页 |
·质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
·PCR扩增目的基因 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-39页 |
·不同外植体类型对再生频率的影响 | 第35-36页 |
·叶片与组培苗Km选择压的确定 | 第36-37页 |
·抑菌抗生素对转化叶片再生的影响 | 第37-38页 |
·转基因‘凉香季节’植株的GUS组织化学染色检测 | 第38页 |
·转基因‘凉香季节’植株的PCR检测 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
·抗生素的选择 | 第39-40页 |
·转基因植株的检测 | 第40-41页 |
第三章 采用SAAT技术将S1S2S基因转入‘红爱佳’苹果的研究 | 第41-49页 |
1 材料和方法 | 第42-44页 |
·材料 | 第42-43页 |
·植物材料 | 第42页 |
·工程菌株和载体质粒 | 第42页 |
·目的基因和载体质粒 | 第42页 |
·工程菌株及其培养基(液) | 第42页 |
·所用培养基 | 第42页 |
·GUS染色液配方 | 第42-43页 |
·实验仪器 | 第43页 |
·方法 | 第43-44页 |
·农杆菌的培养、活化 | 第43页 |
·不同超声波处理时期对农杆菌介导的影响 | 第43页 |
·不同超声波处理时间对农杆菌介导的影响 | 第43页 |
·不同超声波处理功率对农杆菌介导的影响 | 第43页 |
·不同外植体类型对超声波辅助介导的影响 | 第43-44页 |
·乙酰丁香酮(As)浓度对gus基因瞬时表达率的影响 | 第44页 |
·抗性植株的获得 | 第44页 |
·GUS基因瞬时表达检测 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-47页 |
·最适处理时期 | 第44-45页 |
·最佳处理时间 | 第45页 |
·超声波处理的最适功率 | 第45-46页 |
·最适外植体类型 | 第46-47页 |
·乙酰丁香酮(As)浓度对gus基因瞬时表达率的影响 | 第47页 |
·抗性植株的获得 | 第47页 |
3 讨论 | 第47-49页 |
第四章 农杆菌介导的乙肝表面抗原大蛋白(S1S2S)基因三种不同表达载体转化番茄的研究 | 第49-58页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
·材料 | 第50-51页 |
·植物材料 | 第50页 |
·工程菌株和载体质粒 | 第50页 |
·培养基 | 第50页 |
·GUS染色液配方 | 第50页 |
·实验仪器 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-52页 |
·番茄种子初代培养的建立 | 第51页 |
·番茄子叶再生体系的建立 | 第51页 |
·不同基因型对番茄子叶愈伤组织形成和不定芽分化的影响 | 第51页 |
·不同植物生长调节剂及其浓度组合对‘江蔬1号’番茄子叶再生的影响 | 第51页 |
·番茄的转化 | 第51-52页 |
·番茄转化的基本程序 | 第51页 |
·GUS染色鉴定 | 第51页 |
·PCR法检测外源基因的整合 | 第51-52页 |
·生根培养基的筛选与驯化移栽 | 第52页 |
·统计分析 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-56页 |
·番茄种子初代培养的建立 | 第52-53页 |
·番茄子叶再生体系的建立 | 第53-54页 |
·不同基因型对番茄子叶愈伤组织形成和不定芽分化的影响 | 第53页 |
·不同生长素种类及其浓度对‘江蔬1号’子叶愈伤组织形成和不定芽分化的影响 | 第53-54页 |
·不同细胞分裂素种类及其浓度对‘江蔬1号’子叶愈伤组织形成和不定芽分化的影响 | 第54页 |
·番茄的遗传转化 | 第54-56页 |
·番茄抗性植株GUS染色检测 | 第54-55页 |
·转基因番茄植株的PCR检测 | 第55-56页 |
·生根培养基的筛选与驯化移栽 | 第56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
全文结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录一 基因序列及质粒图谱 | 第66-72页 |
附录二 图版 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |