中文摘要 | 第1-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
第一部分:AFL2基因的菊花遗传转化研究 | 第15-40页 |
第一章 前言 | 第15-25页 |
1 菊花的品种资源 | 第15-16页 |
·原有品种资源 | 第15页 |
·引进品种资源 | 第15-16页 |
·盆栽大菊 | 第16页 |
·小菊 | 第16页 |
·切花菊 | 第16页 |
2 菊花传统育种研究 | 第16-18页 |
·菊花传统育种目标 | 第16-17页 |
·菊花传统育种方法 | 第17-18页 |
3 菊花基因工程育种 | 第18-23页 |
·菊花基因工程育种的目标 | 第19-20页 |
·改变菊花花色的基因工程 | 第19-20页 |
·改变菊花花型和株型的基因工程 | 第20页 |
·改变菊花花期的基因工程 | 第20页 |
·提高菊花抗病虫的基因工程 | 第20页 |
·菊花基因工程育种方法 | 第20-23页 |
·基因枪转化 | 第20-21页 |
·菊花体细胞胚诱导 | 第21-22页 |
·农杆菌介导的菊花转化 | 第22-23页 |
4 AFL2基因研究概况和介导菊花转化的研究意义 | 第23-25页 |
·AFL2基因概况 | 第23页 |
·AFL2基花基因转化的研究意义 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-30页 |
1 材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·质粒及菌株 | 第25页 |
·主要化学试剂和仪器设备 | 第25页 |
·常用溶液 | 第25-26页 |
·基本培养基配方 | 第26页 |
2 方法 | 第26-30页 |
·试管苗的选取 | 第26页 |
·培养条件 | 第26页 |
·五种抗生素对菊花再生影响 | 第26-27页 |
·抗生素抑菌试验 | 第27页 |
·转化体系的优化及AFL2基因的导入 | 第27-28页 |
·外植体的预培养对转化的影响 | 第27页 |
·农杆菌的培养与活化 | 第27页 |
·感染时间和共培养时间对转化的影响 | 第27页 |
·优化方法的转化 | 第27-28页 |
·抗性植株的生根、繁殖与移栽 | 第28页 |
·抗性株的PCR检测 | 第28-30页 |
·菊花基因组总DNA的提取:CTAB法 | 第28页 |
·PCR检测 | 第28-29页 |
·园艺性状的检测 | 第29-30页 |
第三章 结果与分析 | 第30-36页 |
1 预培养时间与预培养方式的影响 | 第30页 |
2 感染时间及外部条件的影响 | 第30页 |
3 共培养和抑菌培养时间的选择 | 第30-31页 |
4 硫酸卡那霉素、氨苄青霉素对菊花叶片再生的影响 | 第31-32页 |
5 头孢噻肟钠,头孢唑林钠,羧苄青霉素对菊花叶片再生的影响 | 第32-33页 |
6 抗生素对农杆菌的抑制作用 | 第33页 |
7 转化条件的优化 | 第33-34页 |
8 抗性株的筛选与PCR检测 | 第34页 |
9 园艺性状的检测 | 第34-36页 |
第四章 讨论 | 第36-40页 |
1 菊花基因型对再生能力的影响 | 第36页 |
2 再生体系的建立 | 第36-37页 |
3 抗生素对菊花再生的影响 | 第37-38页 |
4 抗生素对农杆菌的抑制作用 | 第38页 |
5 菊花遗传转化的探讨 | 第38-40页 |
第二部分:AFL1基因的原核表达 | 第40-57页 |
第一章 前言 | 第40-46页 |
1 花器官发育的模型 | 第40-42页 |
·ABC模型 | 第40-42页 |
·ABC模型的修订 | 第42页 |
·四重奏模型 | 第42页 |
2 LFY同源基因的研究进展 | 第42-45页 |
·LFY基因的功能特性 | 第42-43页 |
·LFY同源基因的功能特性 | 第43-44页 |
·LFY同源基因的表达特性 | 第44-45页 |
3 LFY同源基因AFL1及其原核表达研究的意义 | 第45-46页 |
第二章 材料与方法 | 第46-53页 |
1 材料 | 第46-48页 |
·菌株、载体及试剂 | 第46页 |
·主要仪器设备 | 第46-47页 |
·常用试剂配方 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-53页 |
·感受态细胞的制作 | 第49页 |
·表达载体的构建 | 第49-52页 |
·质粒PBS-AFL1和pET28b的小量制备 | 第49页 |
·PBS-AFL1和pET28b的BamHⅠ酶切 | 第49-50页 |
·酶切产物的回收、纯化和连接 | 第50-51页 |
·转化 | 第51页 |
·转化产物的PCR鉴定 | 第51页 |
·重组质粒的筛选与转化 | 第51-52页 |
·蛋白的诱导表达 | 第52页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第52-53页 |
·样品的制备 | 第52页 |
·SDS-PAGE电泳操作程序 | 第52-53页 |
第三章 结果与分析 | 第53-56页 |
1 PBS-AFL1和pET28b的BamH Ⅰ酶切 | 第53页 |
2 转化产物的PCR鉴定 | 第53-54页 |
3 重组质粒的酶切鉴定 | 第54页 |
4 重组质粒转化至表达菌 | 第54-55页 |
5 SDS-PAGE | 第55-56页 |
第四章 讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
在读期间发表文章目录 | 第63页 |
个人简况 | 第63页 |
联系方式 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
图版说明 | 第65-68页 |