| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.生防菌 | 第12-13页 |
| 2.过敏反应与系统获得抗性 | 第13-14页 |
| 3.hrp基因及Harpin蛋白 | 第14-19页 |
| ·hrp基因 | 第14-15页 |
| ·Harpin蛋白的分离、特点与结构 | 第15-16页 |
| ·Harpin蛋白的功能与受体 | 第16-17页 |
| ·Harpin蛋白在植物抗病信号传导研究中的作用 | 第17-18页 |
| ·Harpin蛋白的应用 | 第18-19页 |
| 4.细菌中的分泌机制概述 | 第19-22页 |
| ·细菌的Ⅲ型分泌机制 | 第19-21页 |
| ·细菌的Ⅱ型分泌机制 | 第21-22页 |
| 5.本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 胡萝卜软腐欧氏杆菌hrpN基因的克隆与序列分析 | 第23-34页 |
| 1.材料 | 第23-25页 |
| ·主要实验设备 | 第23-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·主要酶和生化试剂 | 第24页 |
| ·主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.方法 | 第25-28页 |
| ·hrpNEcc9基因的扩增 | 第26页 |
| ·hrpNEcc9基因与载体pMD18-T的连接 | 第26-28页 |
| ·hrpNEcc9基因序列测定、分析与同源性比较 | 第28页 |
| 3.结果与分析 | 第28-33页 |
| ·hrpNEcc9基因的扩增 | 第28页 |
| ·pMD-hrpN的分子验证 | 第28-29页 |
| ·序列测定与分析 | 第29-33页 |
| 4.讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 胡萝卜软腐欧氏杆菌Harpin的诱导表达与活性检测 | 第34-43页 |
| 1.材料 | 第34-36页 |
| ·主要实验设备 | 第34-35页 |
| ·菌株与质粒 | 第35页 |
| ·主要酶和生化试剂 | 第35页 |
| ·主要试剂的配制 | 第35-36页 |
| 2.方法 | 第36-40页 |
| ·重组菌BL21(DE3)(pES-hrpN)的构建 | 第36-39页 |
| ·重组菌BL21(DE3)(pES-hrpN)的诱导表达 | 第39页 |
| ·过敏反应实验 | 第39-40页 |
| 3.结果与分析 | 第40-42页 |
| ·重组菌BL21(DE3)(pES-hrpN)的PCR、酶切鉴定 | 第40页 |
| ·融合蛋白SZZ-HarpinEcc9在BL21(DE3)中的表达 | 第40-41页 |
| ·活性检测 | 第41-42页 |
| 4.讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 胡萝卜软腐欧氏杆菌Harpin蛋白的组成型表达研究 | 第43-51页 |
| 1.材料 | 第43-44页 |
| ·菌株与质粒 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| 2.方法 | 第44-48页 |
| ·重组菌DH5a(pCS-hrpN)的构建 | 第44-46页 |
| ·重组菌DH5a(pCS-hrpN)的蛋白表达 | 第46页 |
| ·过敏反应实验 | 第46-48页 |
| 3.结果与分析 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pCS-hrpN的PCR、酶切鉴定 | 第48页 |
| ·ZZ-HarpinEcc9在DH5a中的组成型表达 | 第48-49页 |
| ·活性检测 | 第49页 |
| 4.讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 小结与展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 略语表 | 第59-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |