中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-32页 |
1 梅毒的研究进展 | 第14-18页 |
·梅毒的流行病学 | 第14-15页 |
·梅毒螺旋体生物学特征和结构 | 第15-17页 |
·致病机理及临床表现 | 第17-18页 |
2 梅毒螺旋体的检测 | 第18-22页 |
·梅毒螺旋体病原学检测 | 第18-19页 |
·暗视野显微镜法 | 第18-19页 |
·梅毒螺旋体镀银染色法 | 第19页 |
·梅毒螺旋体免疫荧光染色法 | 第19页 |
·梅毒螺旋体血清学检测 | 第19-22页 |
·非特异性梅毒螺旋体抗原血清学试验 | 第20页 |
·特异性梅毒螺旋体抗原血清学试验 | 第20-22页 |
3 梅毒螺旋体抗原及其在梅毒螺旋体抗体检测中的应用 | 第22-24页 |
4 免疫磁珠及其应用 | 第24-32页 |
·磁分离酶联免疫法原理 | 第26-28页 |
·磁分离酶联免疫法的应用 | 第28-29页 |
·金磁微粒及在免疫学检测中的应用 | 第29-32页 |
第二章 重组梅毒螺旋体抗原TpN17的纯化 | 第32-47页 |
1 材料与方法 | 第32-38页 |
·材料 | 第32-35页 |
·试剂与样品 | 第32-34页 |
·仪器 | 第34-35页 |
·方法 | 第35-38页 |
·毕赤酵母菌株GS115对重组体pPIC9K-Tpp17的表达 | 第35页 |
·确定TpN17抗原最佳(NH_4)_2SO_4沉淀饱和度 | 第35页 |
·离子交换层析条件的选择与样品的预处理 | 第35-37页 |
·SDS-PAGE分析纯化结果 | 第37-38页 |
·纯化抗原的浓度测定 | 第38页 |
·纯化抗原的标记及其滴度测定 | 第38页 |
2 结果与讨论 | 第38-45页 |
·TpN17抗原最佳(NH_4)_2SO_4沉淀饱和度 | 第38-39页 |
·层析系统的选择 | 第39-41页 |
·上样缓冲液pH值的选择 | 第39-40页 |
·洗脱缓冲液离子强度的选择 | 第40-41页 |
·纯化过程的放大 | 第41-42页 |
·与商品化抗原的SDS-PAGE对比 | 第42-43页 |
·纯化抗原的浓度测定 | 第43-44页 |
·HRP标记TpN17抗原及其滴度测定 | 第44-45页 |
·标记步骤 | 第44页 |
·双抗原夹心法测定标记抗原滴度 | 第44-45页 |
3 结论 | 第45-47页 |
第三章 以金磁微粒为载体检测梅毒螺旋体抗体 | 第47-64页 |
1 材料与方法 | 第47-51页 |
·材料 | 第47-48页 |
·试剂与样品 | 第47-48页 |
·仪器 | 第48页 |
·方法 | 第48-51页 |
·应用金磁微粒检测梅毒螺旋体抗体的原理 | 第49页 |
·固定 | 第49-50页 |
·封闭 | 第50页 |
·双抗原夹心法检测梅毒螺旋体抗体基本步骤 | 第50页 |
·双抗原夹心法检测梅毒螺旋体抗体条件的优选 | 第50-51页 |
·献血者筛查中的初步应用 | 第51页 |
2 结果与讨论 | 第51-62页 |
·金磁微粒的性质及抗原在其表面的固定化 | 第51-52页 |
·TpN17抗原用于双抗原夹心法检测梅毒螺旋体抗体 | 第52-55页 |
·检测梅毒螺旋体抗体条件的优选 | 第52-53页 |
·与商品化TpN17抗原的比较 | 第53页 |
·献血筛查中的初步应用 | 第53-55页 |
·商品化抗原TpN47、TpN17和TpN15用于双抗原夹心法检测梅毒螺旋体抗体 | 第55-62页 |
·封闭缓冲液的选择 | 第55-56页 |
·固定抗原量和HRP-标记抗原最佳工作浓度的选择 | 第56-57页 |
·温育时间的选择 | 第57-58页 |
·临界值的确定 | 第58-59页 |
·检测系统的灵敏度分析 | 第59-60页 |
·方法的精密度分析 | 第60-61页 |
·系统的特异性分析 | 第61-62页 |
3 结论 | 第62-64页 |
全文小结 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-75页 |
致谢 | 第75页 |