中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
前言 | 第12-15页 |
技术路线和方法 | 第15-17页 |
第一部分 结核分枝杆菌特异性引物和分子信标探针的设计与合成 | 第17-35页 |
1 靶基因的选择 | 第17-19页 |
2 引物与分子信标探针的设计与合成 | 第19-22页 |
·插入序列IS6110基因信息检索 | 第19-20页 |
·分子信标与引物设计 | 第20-22页 |
3 结核分枝杆菌PCR引物与探针的筛选 | 第22-29页 |
·材料 | 第22-25页 |
·方法 | 第25-28页 |
·荧光定量PCR反应筛选引物与探针 | 第28-29页 |
4 结果与分析 | 第29-35页 |
·引物与探针的特异性分析 | 第29-31页 |
·结核分枝杆菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
·结核分枝杆菌PCR引物与探针的筛选 | 第32-35页 |
第二部分 分子信标检测结核分枝杆菌方法的建立与评价 | 第35-51页 |
1 前言 | 第35页 |
2 材料 | 第35-36页 |
·菌株 | 第35-36页 |
·主要试剂与仪器 | 第36页 |
3 方法 | 第36-41页 |
·样品前处理 | 第36页 |
·分子信标荧光定量PCR检测方法的建立 | 第36-40页 |
·分子信标荧光定量PCR检测方法的评价 | 第40-41页 |
4 结果与分析 | 第41-51页 |
·分子信标荧光定量PCR检测方法的建立 | 第41-47页 |
·特异性评价 | 第47-48页 |
·灵敏度评价 | 第48-49页 |
·抗干扰性 | 第49-50页 |
·可重复性 | 第50-51页 |
第三部分 分子信标检测结核分枝杆菌方法的应用与产品开发 | 第51-63页 |
1 试剂 | 第51-52页 |
·涂片染色法 | 第51页 |
·集菌培养法 | 第51-52页 |
·荧光定量PCR检测法 | 第52页 |
2 方法 | 第52-55页 |
·三种结核分枝杆菌检测方法的比较 | 第52-55页 |
·分子信标方法的应用-成本分析 | 第55页 |
3 结果与分析 | 第55-63页 |
·三种检测方法的比较 | 第55-61页 |
·结核病流行情况 | 第61页 |
·成本-效益分析 | 第61-63页 |
第四部分 全文讨论 | 第63-70页 |
1 样品前处理对结核分枝杆菌检测的影响 | 第63页 |
2 分子信标探针设计的关键 | 第63-65页 |
3 荧光定量PCR反应的影响因素 | 第65-66页 |
4 分子信标方法的特异性与灵敏度 | 第66-68页 |
5 PCR实验的污染问题 | 第68-69页 |
6 结核分枝杆菌荧光定量PCR检测试剂盒的开发构想 | 第69-70页 |
综述 | 第70-86页 |
参考文献 | 第86-99页 |
致谢 | 第99页 |