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无选择标记基因的抗虫转基因植物研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 文献综述第13-24页
   ·无选择标记转基因植物的研究进展第13页
   ·去除选择标记基因的意义第13页
   ·无选择标记转基因植株的获得第13-17页
     ·共转化法第13-14页
     ·转座子法第14页
     ·位点特异性重组系统法第14-17页
   ·植物蛋白酶抑制剂基因的研究进展第17-24页
     ·植物蛋白酶抑制剂的分类第18-19页
     ·植物蛋白酶抑制剂的抗虫性研究第19页
     ·植物蛋白酶抑制剂的作用机理第19-20页
     ·植物蛋白酶抑制剂的调控第20-21页
     ·蛋白酶抑制剂在抗虫基因工程中存在的问题第21-22页
     ·转基因植物抗虫性表达的增强第22-24页
第二章 引言第24-26页
   ·研究目的和意义第24-25页
   ·研究的内容第25页
   ·论文新意第25-26页
第三章 实验材料与方法第26-37页
   ·实验材料第26-27页
     ·植物材料第26页
     ·菌种、质粒和试剂第26页
     ·植物总DNA提取缓冲液第26-27页
     ·细菌培养基第27页
   ·实验方法第27-37页
     ·大豆DNA的提取及PCR扩增第27-28页
     ·PCR扩增产物的克隆第28-29页
     ·质粒转化大肠杆菌第29-31页
     ·SKTI基因测序及序列分析第31页
     ·抗虫基因(SKTI)与 Bar基因连锁表达载体的构建第31-32页
     ·质粒PCABarSKTI转化农杆菌第32页
     ·SKTI抗虫基因转化烟草及转基因烟草的PCR检测第32-33页
     ·重组酶基因(Cre)二次转化烟草及检测第33-34页
     ·甘蓝再生-转化体系的建立第34页
     ·SKTI抗虫基因转化甘蓝及转基因植株的检测第34-35页
     ·重组酶基因Cre转化甘蓝及其检测第35-37页
第四章 结果与分析第37-52页
   ·大豆DNA的提取及PCR扩增第37页
   ·PCR产物的克隆及酶切检测第37页
   ·SKTI基因的测序与序列分析第37-38页
   ·抗虫表达载体的构建及酶切检测第38-40页
   ·SKTI转基因烟草的获得及PCR检测第40页
   ·无选择标记基因(Bar)抗虫烟草的获得及检测第40-43页
     ·重组酶基因(Cre)二次转化抗虫烟草及PCR检测第40-41页
     ·Cre二次转化抗虫烟草的Bar基因删除检测第41-43页
   ·甘蓝再生-转化体系的建立第43-46页
     ·不同甘蓝品种发芽率、外植体再生情况的比较第43页
     ·不同外植体芽分化能力的比较第43页
     ·不同BA与NAA浓度组合对甘蓝下胚轴芽分化的影响第43-44页
     ·遗传转化中的筛选剂第44-46页
   ·SKTI抗虫转基因甘蓝植株的获得及检测第46-50页
     ·SKTI抗虫基因转化甘蓝第46-47页
     ·SKTI抗虫转基因甘蓝植株的pCR检测第47-48页
     ·SKTI抗虫转基因甘蓝的抗除草剂检测第48页
     ·SKTI抗虫转基因甘蓝的抗虫试验第48-50页
   ·重组酶Cre转基因甘蓝植株的获得及检测第50-52页
第五章 讨论第52-55页
   ·大豆胰蛋白酶抑制剂类型第52页
   ·大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因差异表达与基因克隆第52-53页
   ·SKTI抗虫转基因甘蓝的离体抗虫试验第53页
   ·甘蓝遗传转化中的筛选问题第53-54页
   ·转基因植株中选择标记基因的删除问题第54-55页
第六章 结论第55-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
发表论文及参加课题第64-65页
缩写词第65页

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