摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
·无选择标记转基因植物的研究进展 | 第13页 |
·去除选择标记基因的意义 | 第13页 |
·无选择标记转基因植株的获得 | 第13-17页 |
·共转化法 | 第13-14页 |
·转座子法 | 第14页 |
·位点特异性重组系统法 | 第14-17页 |
·植物蛋白酶抑制剂基因的研究进展 | 第17-24页 |
·植物蛋白酶抑制剂的分类 | 第18-19页 |
·植物蛋白酶抑制剂的抗虫性研究 | 第19页 |
·植物蛋白酶抑制剂的作用机理 | 第19-20页 |
·植物蛋白酶抑制剂的调控 | 第20-21页 |
·蛋白酶抑制剂在抗虫基因工程中存在的问题 | 第21-22页 |
·转基因植物抗虫性表达的增强 | 第22-24页 |
第二章 引言 | 第24-26页 |
·研究目的和意义 | 第24-25页 |
·研究的内容 | 第25页 |
·论文新意 | 第25-26页 |
第三章 实验材料与方法 | 第26-37页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·植物材料 | 第26页 |
·菌种、质粒和试剂 | 第26页 |
·植物总DNA提取缓冲液 | 第26-27页 |
·细菌培养基 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-37页 |
·大豆DNA的提取及PCR扩增 | 第27-28页 |
·PCR扩增产物的克隆 | 第28-29页 |
·质粒转化大肠杆菌 | 第29-31页 |
·SKTI基因测序及序列分析 | 第31页 |
·抗虫基因(SKTI)与 Bar基因连锁表达载体的构建 | 第31-32页 |
·质粒PCABarSKTI转化农杆菌 | 第32页 |
·SKTI抗虫基因转化烟草及转基因烟草的PCR检测 | 第32-33页 |
·重组酶基因(Cre)二次转化烟草及检测 | 第33-34页 |
·甘蓝再生-转化体系的建立 | 第34页 |
·SKTI抗虫基因转化甘蓝及转基因植株的检测 | 第34-35页 |
·重组酶基因Cre转化甘蓝及其检测 | 第35-37页 |
第四章 结果与分析 | 第37-52页 |
·大豆DNA的提取及PCR扩增 | 第37页 |
·PCR产物的克隆及酶切检测 | 第37页 |
·SKTI基因的测序与序列分析 | 第37-38页 |
·抗虫表达载体的构建及酶切检测 | 第38-40页 |
·SKTI转基因烟草的获得及PCR检测 | 第40页 |
·无选择标记基因(Bar)抗虫烟草的获得及检测 | 第40-43页 |
·重组酶基因(Cre)二次转化抗虫烟草及PCR检测 | 第40-41页 |
·Cre二次转化抗虫烟草的Bar基因删除检测 | 第41-43页 |
·甘蓝再生-转化体系的建立 | 第43-46页 |
·不同甘蓝品种发芽率、外植体再生情况的比较 | 第43页 |
·不同外植体芽分化能力的比较 | 第43页 |
·不同BA与NAA浓度组合对甘蓝下胚轴芽分化的影响 | 第43-44页 |
·遗传转化中的筛选剂 | 第44-46页 |
·SKTI抗虫转基因甘蓝植株的获得及检测 | 第46-50页 |
·SKTI抗虫基因转化甘蓝 | 第46-47页 |
·SKTI抗虫转基因甘蓝植株的pCR检测 | 第47-48页 |
·SKTI抗虫转基因甘蓝的抗除草剂检测 | 第48页 |
·SKTI抗虫转基因甘蓝的抗虫试验 | 第48-50页 |
·重组酶Cre转基因甘蓝植株的获得及检测 | 第50-52页 |
第五章 讨论 | 第52-55页 |
·大豆胰蛋白酶抑制剂类型 | 第52页 |
·大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因差异表达与基因克隆 | 第52-53页 |
·SKTI抗虫转基因甘蓝的离体抗虫试验 | 第53页 |
·甘蓝遗传转化中的筛选问题 | 第53-54页 |
·转基因植株中选择标记基因的删除问题 | 第54-55页 |
第六章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
发表论文及参加课题 | 第64-65页 |
缩写词 | 第65页 |