猪早期胚胎细胞核移植程序优化研究
| 第一章 文献综述 | 第1-25页 |
| 1 动物细胞核移植技术的研究简史 | 第14-16页 |
| 2 动物细胞核移植技术的操作过程 | 第16-21页 |
| ·核受体胞质的准备 | 第16-17页 |
| ·核供体的准备 | 第17-18页 |
| ·供体细胞的细胞周期和受体卵母细胞胞质周期的协调 | 第18-19页 |
| ·重构胚的融合和激活 | 第19-21页 |
| ·重构胚的培养 | 第21页 |
| 3 影响核移植技术的关键因素 | 第21-23页 |
| ·受体卵母细胞及其去核 | 第21-22页 |
| ·供核细胞 | 第22页 |
| ·核质同步性问题 | 第22-23页 |
| ·重组胚的激活 | 第23页 |
| 4 动物细胞核移植技术的存在问题 | 第23页 |
| 5 动物细胞核移植技术的应用前景 | 第23-25页 |
| ·研究核和细胞质的关系 | 第23页 |
| ·生产转基因动物 | 第23-24页 |
| ·拯救珍稀濒危动物 | 第24页 |
| ·生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法 | 第24页 |
| ·作为辅助生殖手段使不孕不育患者得到自己的后代 | 第24-25页 |
| 第二章 实验研究 | 第25-46页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 第一部分: 材料和用具 | 第26-32页 |
| 1 主要仪器、器具及主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器、器具 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| 2 主要试剂的配制 | 第27-32页 |
| ·洗卵液及抽卵液 | 第27-28页 |
| ·猪卵母细胞体外成熟基础培养液 | 第28页 |
| ·体外受精中涉及的培养液 | 第28-29页 |
| ·猪胚胎体外培养液 | 第29页 |
| ·胚胎卵裂球细胞分离液 | 第29-30页 |
| ·核移植过程中的操作液 | 第30页 |
| ·1mg/ml H33342储液的配制 | 第30页 |
| ·5mg/ml细胞松弛素B储液的配制 | 第30页 |
| ·猪冻精颗粒的制备 | 第30-31页 |
| ·颗粒细胞单层的制备 | 第31页 |
| ·: 主要器具的制备 | 第31-32页 |
| 第二部分 实验方法与实验设计 | 第32-36页 |
| 1 实验方法 | 第32-34页 |
| ·猪卵母细胞的体外成熟(IVM) | 第32页 |
| ·猪卵母细胞的体外受精(IVF) | 第32-33页 |
| ·胚胎卵裂球细胞的分离 | 第33页 |
| ·显微操作 | 第33-34页 |
| 2 实验设计 | 第34-36页 |
| ·早期胚胎细胞获得程序的优化 | 第34-35页 |
| ·胚胎卵裂球细胞分离方法的优化 | 第35页 |
| ·猪胚胎细胞核移植重建胚电激活参数的优化 | 第35页 |
| ·去核卵母细胞激活时序的优化 | 第35-36页 |
| ·猪胚胎细胞核移植重建胚体外培养系统的优化 | 第36页 |
| 3 统计分析 | 第36页 |
| 第三部分: 实验结果 | 第36-40页 |
| 1 早期胚胎细胞获得程序的优化 | 第36-37页 |
| 2 胚胎卵裂球细胞分离方法的优化 | 第37-38页 |
| 3 猪胚胎细胞核移植重建胚电激活参数的优化 | 第38-39页 |
| ·电场强度参数的优化 | 第38页 |
| ·脉冲宽度参数的优化 | 第38-39页 |
| 4 去核卵母细胞激活时序的优化 | 第39-40页 |
| 5猪 胚胎细胞核移植重建胚体外培养系统的优化 | 第40页 |
| 第四部分: 分析讨论 | 第40-45页 |
| 1 早期胚胎细胞获得程序的优化 | 第40-41页 |
| 2 胚胎卵裂球细胞分离方法的优化 | 第41-42页 |
| 3 猪胚胎细胞核移植重建胚电激活参数的优化 | 第42-43页 |
| 4 去核卵母细胞激活时序的优化 | 第43页 |
| 5 猪胚胎细胞核移植重建胚体外培养系统的优化 | 第43-45页 |
| 第五部分: 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 发表文章和参加课题 | 第59页 |
