| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-30页 |
| ·DNA疫苗的诞生与发展 | 第13-14页 |
| ·DNA疫苗可能的作用机制 | 第14-15页 |
| ·增强DNA疫苗免疫应答的策略 | 第15-16页 |
| ·DNA疫苗免疫佐剂的研究及应用： | 第16-23页 |
| ·细胞因子佐剂 | 第16-20页 |
| ·补体分子佐剂C3d | 第20-23页 |
| ·伪狂犬病毒gC基因的结构与功能研究进展 | 第23-30页 |
| ·伪狂犬病毒基因组 | 第24-25页 |
| ·gC的结构与功能 | 第25-26页 |
| ·gC的免疫学意义与PrV新型疫苗研究 | 第26-30页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第30-31页 |
| 第3章 材料与方法 | 第31-44页 |
| ·实验材料 | 第31-35页 |
| ·毒株、细胞与菌种 | 第31页 |
| ·载体与质粒 | 第31-33页 |
| ·主要药品与试剂盒 | 第33页 |
| ·主要培养基及其配制 | 第33-34页 |
| ·缓冲液 | 第34-35页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-44页 |
| ·动物组织肝脏细胞总RNA的提取 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR扩增与检测 | 第36页 |
| ·RT-PCR或酶切产物的回收与纯化 | 第36页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第36页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第36-37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37页 |
| ·质粒的小量制备(改良的碱裂解法) | 第37页 |
| ·质粒的大量制备(碱裂解法) | 第37-38页 |
| ·重组质粒的快速鉴定 | 第38页 |
| ·脂质体介导转化法 | 第38-39页 |
| ·间接免疫荧光染色法检测外源蛋白在动物细胞中的表达 | 第39页 |
| ·SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第39页 |
| ·Western blot | 第39-40页 |
| ·ELISA抗体滴度的测定 | 第40页 |
| ·微量中和试验 | 第40-41页 |
| ·小鼠脾淋巴细胞的分离 | 第41页 |
| ·淋巴细胞增殖反应试验(Lymphocytes Proliferation) | 第41页 |
| ·IFN-γ的定量检测(双抗体夹心ELISA) | 第41-42页 |
| ·IL-4的定量检测(双抗体夹心ELISA) | 第42页 |
| ·核酸免疫与攻毒保护性试验 | 第42-43页 |
| ·统计学分析 | 第43-44页 |
| 第4章 结果与分析 | 第44-66页 |
| ·猪、鼠、羊补体C3d基因的克隆与序列分析 | 第44-49页 |
| ·猪、鼠、羊补体C3d基因的克隆与鉴定 | 第44-46页 |
| ·猪、鼠、羊C3d基因的核苷酸序列测定 | 第46-47页 |
| ·蛋白序列结构及功能特征预测 | 第47-49页 |
| ·补体C3d基因对gC基因核酸疫苗的免疫增强作用 | 第49-59页 |
| ·分泌型gC常规DNA疫苗表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| ·鼠源补体C3d与gC基因融合表达质粒的构建 | 第50-52页 |
| ·鼠源补体C3d受体结合功能区(M28)与gC基因融合表达质粒的构建 | 第52-53页 |
| ·重组质粒的表达 | 第53-54页 |
| ·PRV gC蛋白ELISA抗体的检测 | 第54-55页 |
| ·中和抗体分析 | 第55-56页 |
| ·淋巴细胞增殖试验分析 | 第56页 |
| ·细胞因子IL-4和IFN-γ检测 | 第56-57页 |
| ·攻毒保护试验 | 第57-59页 |
| ·猪源补体C3d的分子免疫增强作用及小鼠动物模型的建立 | 第59-66页 |
| ·猪源补体C3d与gC基因融合表达质粒的构建 | 第59页 |
| ·重组质粒的表达 | 第59-61页 |
| ·PRV gC蛋白ELISA抗体的检测 | 第61页 |
| ·中和抗体分析 | 第61-62页 |
| ·淋巴细胞增殖试验分析 | 第62-63页 |
| ·细胞因子IL-4和IFN-γ检测 | 第63-64页 |
| ·攻毒保护试验 | 第64-66页 |
| 第五章 讨论 | 第66-69页 |
| ·猪、鼠、羊补体C3d基因的克隆 | 第66-67页 |
| ·分泌型重组蛋白的表达 | 第67页 |
| ·补体C3d增强gC基因的体液免疫反应 | 第67-68页 |
| ·gc基因与补体C3d分子融合表达DNA疫苗的免疫保护作用 | 第68页 |
| ·猪源补体C3d对gC基因的免疫增强作用 | 第68-69页 |
| 第6章 结论 | 第69-70页 |
| 硕士期间发表文章： | 第70-71页 |
| 参考文献： | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
