中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-7页 |
引言 | 第7-9页 |
一、本论文的研究背景和立题依据及意义 | 第7页 |
二、本论文的研究内容 | 第7-8页 |
三、技术路线 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
一、染色质重塑与转录调控 | 第9-10页 |
(一) 核小体结构和转录 | 第9页 |
(二) 组蛋白修饰酶类重塑复合物 | 第9-10页 |
(三) 依赖 ATP 的重塑复合物 | 第10页 |
二、组蛋白密码假说 | 第10-11页 |
(一) 组蛋白修饰的动力学 | 第11页 |
(二) 组蛋白翻译后修饰与染色质的转录状态 | 第11页 |
三、组蛋白去乙酰化酶的分类及其功能 | 第11-17页 |
(一) 第一类去乙酰化酶 | 第12-13页 |
(二) 第二类去乙酰化酶 | 第13页 |
(三) 第三类去乙酰化酶 | 第13-15页 |
(四) 去乙酰化酶抑制剂 | 第15-16页 |
(五) 去乙酰化和癌症 | 第16-17页 |
第二章 实验材料和方法 | 第17-27页 |
一、实验材料 | 第17页 |
(一) 细胞 | 第17页 |
(二) 质粒 | 第17页 |
(三) 主要试剂 | 第17页 |
二、实验方法 | 第17-27页 |
(一) 质粒大量制备的方法 | 第17-19页 |
(二) 哺乳动物细胞培养 | 第19页 |
(三) 哺乳动物细胞转染及相对荧光素酶活性测定 | 第19-20页 |
(四) 哺乳动物细胞总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
(五) 逆转录 PCR | 第21页 |
(六) 定量 Real Time PCR | 第21-22页 |
(七) 染色质免疫沉淀实验 | 第22-24页 |
(八) 免疫共沉淀 | 第24页 |
(九) SDS-PAGE 电泳及 Western Blotting | 第24-25页 |
(十) RNA 干涉 RNAi | 第25-27页 |
第三章 结果与分析 | 第27-34页 |
一、HDAC3 抑制p15~(INK4B)和p21~(WAF1/cip1)启动子活性 | 第27-28页 |
二、p15~(INK4B)和p21~(WAF1/cip1)的内源mRNA 水平被 HDAC3 抑制和通过 HDAC3 被招募到p~(INK4B)和p21~(WAF1/cip1)启动子处来发挥这种抑制作用的 | 第28-30页 |
三、HDAC3 抑制 GAL4-Sp1 的转录活性和 HDAC3 能和 Sp1 共沉淀 | 第30-31页 |
四、HDAC3 剂量依赖型的逆转 Sp1 对p15~(INK4B)和p21~(WAF1/cip1)的激活 | 第31页 |
五、干涉内源 HDAC3 使p15~(INK4B)mRNA 表达水平升高,而p21~(WAF1/cip1)mRNA 水平没有变化 | 第31-34页 |
第四章 讨论 | 第34-36页 |
一、HDAC3 抑制p15~(INK4B)和p21~(WAF1/cip1)的转录 | 第34页 |
二、HDAC3 和 Sp1 相互作用 | 第34页 |
三、HDAC3 与癌症及细胞周期的关系 | 第34-36页 |
第五章 结论 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
在校期间公开发表论文及著作情况 | 第43页 |