| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 主要缩写词 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-35页 |
| 1 稻瘟病菌的生物学特征 | 第11-14页 |
| ·稻瘟病生理小种的鉴别、命名 | 第11-13页 |
| ·稻瘟病菌致病性的变异及原因 | 第13页 |
| ·稻瘟病菌的遗传多样性 | 第13-14页 |
| 2 水稻抗稻瘟病基因研究进展 | 第14-33页 |
| ·水稻抗瘟性遗传研究 | 第14-15页 |
| ·水稻抗稻瘟病抗性基因的定位研究 | 第15-19页 |
| ·水稻抗稻瘟病基因的分子标记 | 第15-17页 |
| ·水稻稻瘟病抗性基因的定位 | 第17-19页 |
| ·水稻稻瘟病及其它病害抗性基因的克隆 | 第19-32页 |
| ·水稻抗病基因克隆的方法 | 第19-23页 |
| ·定位克隆 | 第19-20页 |
| ·转座子标签法 | 第20-21页 |
| ·同源序列候选基因法 | 第21-22页 |
| ·基于PCR的cDNA基因克隆技术 | 第22-23页 |
| ·水稻中克隆到的抗病基因的结构特点及克隆策略 | 第23-32页 |
| ·水稻中抗病基因结构特点 | 第23-26页 |
| ·NBS-LRR类抗病蛋白质的结构和功能特点 | 第23-26页 |
| ·LRR-TM-STK类抗病蛋白质的结构和功能特点 | 第26页 |
| ·水稻中R基因的分布 | 第26-27页 |
| ·水稻中已克隆的抗病基因克隆策略和结构特点 | 第27-32页 |
| ·病原菌无毒基因及相关致病因子的克隆与研究 | 第32-33页 |
| ·外源基因在水稻方面的应用 | 第33页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 Pib结构基因区域的植物表达载体构建 | 第35-53页 |
| 1.材料和方法 | 第35-38页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·质粒与菌株 | 第35页 |
| ·抗生素 | 第35页 |
| ·试剂盒 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·Pi-b基因酶切位点分析 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞和制备 | 第35-36页 |
| ·大肠杆菌(DH5a)转化程序 | 第36页 |
| ·质粒提取(碱裂解法) | 第36-37页 |
| ·酶切产物的回收 | 第37页 |
| ·连接反应 | 第37页 |
| ·根癌农杆菌EHA101感受态的制备和转化 | 第37-38页 |
| 2.结果与分析 | 第38-53页 |
| ·Pib基因酶切位点分析 | 第38-42页 |
| ·对pPZP2H(+)质粒载体进行鉴定 | 第42-44页 |
| ·转基因植物载体的构建 | 第44-49页 |
| ·Pib基因的外显子特点 | 第44-45页 |
| ·pNAR501载体构建 | 第45-46页 |
| ·pNAR502载体的构建 | 第46-47页 |
| ·pNAR503载体的构建 | 第47-49页 |
| ·pNAR504载体的构建 | 第49页 |
| ·pNAR505载体的构建 | 第49页 |
| ·连接反应及连接产物酶切鉴定 | 第49-53页 |
| ·载体和插入片段的制备 | 第49-50页 |
| ·连接反应 | 第50页 |
| ·连接产物转化和快速筛选鉴定 | 第50-51页 |
| ·连接产物的酶切鉴定 | 第51-53页 |
| 第三章 农杆菌介导转化获得转基因水稻植株 | 第53-65页 |
| 1.材料与方法 | 第53-58页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·质粒和菌株 | 第53页 |
| ·组培试剂 | 第53页 |
| ·其它试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-58页 |
| ·植物愈伤的转化、抗性愈伤的筛选和植株再生 | 第54页 |
| ·水稻基因组DNA的提取 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第55-56页 |
| ·转基因水稻的Southern blot鉴定 | 第56-57页 |
| ·转基因水稻T1代种子的潮霉素发芽实验 | 第57页 |
| ·抗稻瘟病性检测 | 第57-58页 |
| 2.结果与分析 | 第58-63页 |
| ·水稻成熟胚的转化和植株再生 | 第58-59页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第59页 |
| ·转基因植株的Southern blot | 第59-60页 |
| ·离体转基因植株叶片的潮霉素筛选 | 第60-61页 |
| ·转基因T1代种子的结实率和抗潮霉素发芽率 | 第61-63页 |
| ·T_0代转基因植株离体叶片稻瘟病接种鉴定 | 第61-62页 |
| ·T1代转基因植株苗期稻瘟病接种鉴定 | 第62-63页 |
| 3.讨论 | 第63-65页 |
| 全文结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 攻读硕士期间发表文章 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |