主要英文缩写表 | 第1-12页 |
第一章 综述 | 第12-28页 |
第二章 吸水链霉菌10-22 基因组文库质粒pHZ1392 中插入片段的序列注释 | 第28-45页 |
第三章 cvhA 基因编码一个与菌丝发育有关的负调控因子 | 第45-72页 |
1. 材料和方法 | 第49-56页 |
·引物、菌株、质粒和培养方法 | 第49页 |
·相关软件 | 第49-51页 |
·CvhA 蛋白C 端多肽的表达、纯化、体外磷酸化和酸碱敏感性 | 第51-53页 |
·cvhA 基因敲除菌株的构建 | 第53-55页 |
·cvhA 基因敲除菌株的遗传互补 | 第55-56页 |
·cvhA 基因敲除菌株与野生型菌株10-22 的表型差异比较 | 第56页 |
2. 结果 | 第56-66页 |
·CvhA 蛋白的生物信息学分析 | 第56-57页 |
·CvhA 蛋白是一个组氨酸蛋白激酶 | 第57页 |
·CvhA 蛋白是一个与气生菌丝和孢子丝形成有关的碳源依赖性的负调控因子 | 第57-66页 |
3. 讨论 | 第66-72页 |
第四章 cvhBCDE 是一个与菌丝发育有关的操纵子 | 第72-112页 |
1. 材料和方法 | 第78-85页 |
·菌株、引物、质粒和培养方法 | 第78-81页 |
·软件分析 | 第81页 |
·CvhD 蛋白的表达、纯化及其GTP 水解酶活性分析 | 第81-82页 |
·CvhE 蛋白的表达、纯化及其结合CO 的吸收波长分析 | 第82-83页 |
·cvhB、C、D、E 基因敲除菌株的构建 | 第83-84页 |
·cvhB、C、D、E 基因敲除菌株的遗传互补 | 第84页 |
·cvhB、C、D、E 基因敲除菌株与野生型菌株10-22 的表型差异比较 | 第84-85页 |
·RT-PCR | 第85页 |
2. 结果 | 第85-107页 |
·CvhB 蛋白的生物信息学分析 | 第85页 |
·CvhC 蛋白的生物信息学分析 | 第85-86页 |
·CvhD 蛋白是一个具GTP 水解酶活性的小G 蛋白 | 第86页 |
·CvhE 蛋白是一个细胞色素P450 | 第86-87页 |
·cvhBCDE 是一个与菌丝发育有关的操纵子 | 第87-107页 |
3. 讨论 | 第107-112页 |
第五章 hm119 基因编码一个多药物抗性efflux 蛋白 | 第112-127页 |
1. 材料和方法 | 第114-117页 |
·菌株、质粒和培养条件 | 第114页 |
·软件分析 | 第114-115页 |
·Hm119蛋白的融合表达 | 第115页 |
·hm119基因敲除菌株的构建 | 第115-116页 |
·生长抑制试验 | 第116-117页 |
·[~3H]-四环素的累积试验 | 第117页 |
2. 结果 | 第117-123页 |
·软件分析结果 | 第117-118页 |
·野生型菌株10-22的Hm119蛋白的表达检测 | 第118页 |
·hm119基因敲除菌的Southern杂交和免疫印迹验证 | 第118页 |
·hm119基因敲除菌EAK对四环素、万古霉素和丝裂霉素C更敏感 | 第118页 |
·Hm119蛋白多药物抗性效应是能量依赖的 | 第118-123页 |
3. 讨论 | 第123-127页 |
全文主要结论 | 第127-128页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第128-129页 |
致谢 | 第129页 |