| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩写词 | 第11-12页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第12-27页 |
| ·eui种质的研究进展 | 第12-14页 |
| ·eui种质的发现与形态特征 | 第12-13页 |
| ·eui基因的遗传 | 第13页 |
| ·eui基因的定位与克隆 | 第13-14页 |
| ·eui种质的育种应用 | 第14页 |
| ·水稻遗传转化技术的发展 | 第14-16页 |
| ·原生质转化阶段 | 第14-15页 |
| ·基因枪转化阶段 | 第15页 |
| ·农杆菌转化阶段 | 第15-16页 |
| ·农杆菌转化水稻的特点及影响因素 | 第16-18页 |
| ·农杆菌介导转化植物的优点 | 第16页 |
| ·影响农杆菌转化水稻的因素 | 第16-18页 |
| ·转化受体的选择 | 第16-17页 |
| ·根癌农杆菌Vir基因活化物和共培养方式 | 第17页 |
| ·农杆菌菌株和载体系统 | 第17页 |
| ·启动子 | 第17页 |
| ·培养基和激素 | 第17-18页 |
| ·筛选剂 | 第18页 |
| ·抗性愈伤筛选和外源基因表达 | 第18-20页 |
| ·标记基因和报告基因 | 第18-19页 |
| ·外源基因的表达和遗传 | 第19-20页 |
| ·外源基因检测 | 第20-24页 |
| ·GUS检测 | 第21页 |
| ·DNA检测 | 第21-22页 |
| ·Southern印迹杂交 | 第21页 |
| ·Northern杂交 | 第21页 |
| ·基因芯片检测方法 | 第21-22页 |
| ·PCR检测 | 第22页 |
| ·蛋白检测法 | 第22-23页 |
| ·ELISA法 | 第22页 |
| ·试纸条检测法 | 第22-23页 |
| ·Western杂交检测 | 第23页 |
| ·PCR-ELISA法 | 第23页 |
| ·整合位点检测法 | 第23-24页 |
| ·RNAi技术的发展 | 第24-26页 |
| ·RNAi技术的研究进展 | 第24-25页 |
| ·RNAi的作用机理 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的意义和内容 | 第26-27页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第27-33页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·供试水稻材料 | 第27页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-29页 |
| ·细菌培养基 | 第27页 |
| ·植物培养基 | 第27-29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·载体构建 | 第29页 |
| ·农杆菌介导法转化水稻 | 第29-31页 |
| ·胚性愈伤组织的诱导及继代 | 第29-30页 |
| ·愈伤组织的预培养 | 第30页 |
| ·愈伤组织的共培养和抗性愈伤的筛选 | 第30-31页 |
| ·根癌农杆菌介导转化长穗颈个体和明恢86愈伤组织的共培养和抗性愈伤的筛选 | 第30页 |
| ·根癌农杆菌转化中花11愈伤组织的共培养和抗性愈伤的筛选 | 第30-31页 |
| ·抗性愈伤组织的继代与植株的再生 | 第31页 |
| ·转化率与分化率的计算 | 第31页 |
| ·水稻转化再生植株的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·水稻叶片PCR模板的制备 | 第31页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2载体转化长穗颈个体的转基因植株CaMV35S启动子的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·PCR扩增引物序列 | 第31页 |
| ·PCR检测 | 第31-32页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2载体转化长穗颈个体的转基因植株EUI2(t)基因的PCR检测 | 第32页 |
| ·PCR扩增引物序列 | 第32页 |
| ·PCR检测 | 第32页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi载体转化中花11转基因植株潮霉素抗性基因的PCR检测 | 第32页 |
| ·PCR扩增引物序列 | 第32页 |
| ·PCR检测 | 第32页 |
| ·水稻转化再生植株的形态检测 | 第32-33页 |
| Ⅲ 结果分析 | 第33-39页 |
| ·EUI2-ihpRNAi中间载体的构建 | 第33-34页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi植物表达载体的构建 | 第34页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2植物表达载体构建 | 第34-35页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2和pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi载体转化水稻再生植株的获得 | 第35-36页 |
| ·在分化中所用KT和6-BA效果的比较(籼粳杂交种) | 第36页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第36-37页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2载体转化长穗颈个体的转基因植株CaMV35S启动子的PCR检测 | 第36页 |
| ·转pCAMBIA1301-EUI2载体的转基因植株EUI2(t)基因的PCR检测 | 第36-37页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi载体转化中花11转基因植株潮霉素抗性基因的PCR检测 | 第37页 |
| ·转化植株的形态检测 | 第37-39页 |
| ·转pCAMBIA1301-EUI2载体的转化植株的形态检测 | 第37-38页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi载体转化明恢86转化植株的形态检测 | 第38页 |
| ·pCAMBIA1301-EUI2-ihpRNAi载体转化中花11转化植株的形态检测 | 第38-39页 |
| Ⅳ 结论 | 第39-40页 |
| Ⅴ 讨论 | 第40-42页 |
| ·水稻穗颈伸长基因EUI2(t)的验证 | 第40页 |
| ·不同龄期愈伤组织对转化结果的影响 | 第40-41页 |
| ·干燥处理 | 第41页 |
| ·Vir基因表达的诱导 | 第41页 |
| ·转化过程中遇到的问题 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录 | 第48-52页 |
| 附录1 | 第48-49页 |
| 附录2 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
