| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-33页 |
| 一、PRRS病毒的起源 | 第9-11页 |
| 二、病原 | 第11-16页 |
| ·PRRSV的基本特征 | 第11-12页 |
| ·PRRSV的基因组结构和主要结构蛋白 | 第12-15页 |
| ·E蛋白 | 第13-14页 |
| ·M蛋白 | 第14页 |
| ·N蛋白 | 第14-15页 |
| ·PRRSV遗传性变异与基因型 | 第15-16页 |
| 三、国内外流行状况 | 第16-19页 |
| 四、囊膜糖蛋白GP5的结构与功能 | 第19-21页 |
| ·GP5的理化学特征 | 第19页 |
| ·GP5的结构与生物学功能 | 第19-20页 |
| ·GP5的结构及免疫学功能 | 第20-21页 |
| 五、ORF5基因的遗传变异 | 第21-24页 |
| 六、PRRS分子流行病学调查 | 第24-25页 |
| 七、PRRS疫苗研究进展 | 第25-29页 |
| ·弱毒苗 | 第25-26页 |
| ·灭活苗 | 第26-27页 |
| ·亚单位疫苗 | 第27页 |
| ·基因工程重组疫苗 | 第27-28页 |
| ·DNA疫苗 | 第28-29页 |
| 八、PRRS病毒的防制技术 | 第29-31页 |
| ·一般措施 | 第29页 |
| ·疫苗接种 | 第29-31页 |
| ·使用PRRSV疫苗要注意的问题 | 第31页 |
| ·净化和扑灭措施 | 第31页 |
| 九、本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 材料与方法 | 第33-44页 |
| 一、材料 | 第33-38页 |
| ·PRRS病料 | 第33页 |
| ·引物 | 第33页 |
| ·试剂及配制 | 第33-35页 |
| ·分子生物学试剂 | 第33-34页 |
| ·制备感受态细胞用试剂的配制 | 第34页 |
| ·培养基的配制 | 第34页 |
| ·质粒提取试剂的配制 | 第34-35页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·分析所用的PRRSV分离株核苷酸序列 | 第35-38页 |
| 二、方法 | 第38-44页 |
| ·实验方案 | 第38-39页 |
| ·病料阳性鉴定 | 第39页 |
| ·PRRS病毒RNA的提取 | 第39页 |
| ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第39-40页 |
| ·反转录(RT) | 第39-40页 |
| ·PCR | 第40页 |
| ·电泳 | 第40页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第40-41页 |
| ·制胶 | 第40-41页 |
| ·电泳 | 第41页 |
| ·凝胶块中DNA的回收 | 第41页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·基因克隆 | 第42-43页 |
| ·目的基因的连接 | 第42页 |
| ·转化 | 第42页 |
| ·抽提质粒 | 第42-43页 |
| ·重组质粒酶切及PCR鉴定 | 第43页 |
| ·基因测序 | 第43页 |
| ·测序结果的处理与分析 | 第43页 |
| ·抗原表位、糖基化位点分析与RFLP相关酶切位点变化分析 | 第43-44页 |
| 结果 | 第44-59页 |
| 1.PRRS阳性病料的鉴定 | 第44-46页 |
| 2.E基因的扩增 | 第46页 |
| 3.重组质粒的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| 4.重组质粒PCR鉴定 | 第47页 |
| 5.核苷酸序列测定结果 | 第47-53页 |
| 6.氨基酸序列比较 | 第53-55页 |
| 7.同源性分析 | 第55-56页 |
| 8.遗传进化树分析 | 第56-58页 |
| 9.抗原表位、糖基化位点与RFLP相关酶切位点变化分析结果 | 第58-59页 |
| 讨论 | 第59-64页 |
| 1.PRRSV E基因序列分析 | 第59页 |
| 2.氨基酸的变异 | 第59-60页 |
| 3.抗原表位的变异 | 第60-61页 |
| 4.糖基化位点变异 | 第61页 |
| 5.RFLP相关酶切位点变化分析 | 第61-62页 |
| 6.进化树与流行病学分析 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |