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猪伪狂犬病毒的分离鉴定及检测方法的建立

1 引言第1-15页
2 材料和方法第15-24页
   ·毒株与细胞第15页
   ·细胞培养所需主要试剂第15页
   ·聚合酶链式反应(PCR)所需主要试剂第15-16页
   ·SPA协同凝集所需主要试剂第16页
     ·菌种第16页
     ·培养基第16页
     ·0.01M pH7.4 PBS缓冲液第16页
   ·主要仪器第16页
   ·病毒的分离及生物学特性的鉴定第16-20页
     ·病料的处理第16-17页
     ·易感动物接种实验第17页
     ·病毒的鸡胚绒毛尿囊膜接种第17页
     ·病毒的细胞接种与培养第17页
     ·伪狂犬病毒泛嗜性的研究第17页
     ·免疫血清的制备第17-18页
     ·病毒的组织培养半数致死量(TCID_(50))测定第18页
     ·病毒的理化特性试验第18页
     ·琼脂扩散第18-19页
     ·交叉中和试验第19页
     ·PCR鉴定第19页
     ·动物回归试验第19页
     ·电镜形态观察第19-20页
   ·二联PCR方法的建立第20-22页
     ·引物的设计与合成第20页
     ·病毒培养第20页
     ·模板的制备第20页
     ·单相PCR扩增第20-21页
     ·二联PCR反应条件确定第21页
     ·特异性试验第21页
     ·敏感性试验第21页
     ·重复性试验第21页
     ·PCR产物的电泳鉴定第21-22页
     ·PCR产物的酶切鉴定第22页
   ·SPA协同凝集试验第22-24页
     ·SPA菌稳定液的制备第22页
     ·组织病毒液的制备第22页
     ·SPA菌诊断液的制备第22-23页
     ·PRV SPA诊断液的特异性试验第23页
     ·PRV SPA诊断液的灵敏度试验第23页
     ·对比琼扩试验第23页
     ·PRV SPA诊断液的重复性试验第23页
     ·检测部位的确定第23页
     ·保存期试验第23-24页
3 结果与分析第24-34页
   ·病毒的分离鉴定第24-29页
     ·易感动物接种实验第24-25页
     ·鸡胚绒毛尿囊腔和绒毛尿囊膜接种第25页
     ·细胞接种第25页
     ·伪狂犬病毒泛嗜性的研究第25页
     ·免疫血清的制备结果第25页
     ·PRV组织培养半数致死量(TCID_(50))测定第25-27页
     ·理化特性试验第27页
     ·琼扩鉴定第27页
     ·交叉中和试验第27-28页
     ·PCR鉴定第28页
     ·动物回归试验第28页
     ·电镜形态观察第28-29页
   ·二联PCR方法的建立第29-31页
     ·不同核酸提取方法的PCR扩增结果第29页
     ·单相PCR扩增结果第29页
     ·二联PCR反应条件确定第29-30页
     ·二联PCR特异性结果第30页
     ·敏感性扩增结果第30页
     ·重复性试验结果第30页
     ·酶切鉴定结果第30-31页
   ·SPA协同凝集试验结果第31-34页
     ·血清最佳致敏浓度的确定第31页
     ·PRV SPA诊断液的特异性试验第31-32页
     ·PRV SPA诊断液的灵敏度试验第32页
     ·对比琼扩试验第32页
     ·PRV SPA诊断液的重复性试验第32-33页
     ·检测部位的确定第33页
     ·保存期试验结果第33-34页
4 讨论第34-37页
5 结论第37-38页
参考文献第38-42页
在读期间发表的学术论文第42-43页
作者简历第43-44页
致谢第44-53页

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