| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 缩略词(Abbreviation) | 第13-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-51页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌发现历史 | 第14-15页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的流行现状及其危害 | 第15-18页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的流行现状 | 第15-17页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的危害 | 第17-18页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌的检测和防制 | 第18-28页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌的检测方法的研究进展 | 第18-25页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的防制 | 第25-28页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌毒力因子研究进展 | 第28-38页 |
| ·荚膜(capsule,CP) | 第28-29页 |
| ·脂多糖(lipopolysaccharide,LPS) | 第29-30页 |
| ·外膜蛋白(outer membrane proteins,OMP) | 第30-31页 |
| ·转铁结合蛋白(transferrin binding proteins,Tbp) | 第31-33页 |
| ·酶类(Enzymes) | 第33页 |
| ·粘附因子(adherence factor) | 第33-34页 |
| ·外毒素(RTX-toxins,Apx) | 第34-38页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌突变株构建方法的研究进展 | 第38-43页 |
| ·自然突变 | 第39页 |
| ·人工常规诱变 | 第39页 |
| ·分子生物学方法 | 第39-43页 |
| ·PCR定向突变系统的研究进展 | 第43-51页 |
| ·PCR定向突变系统在酿酒酵母中的首次建立 | 第44页 |
| ·PCR定向突变系统在假丝酵母中的改进 | 第44-45页 |
| ·λ噬菌体Red重组酶在PCR定向突变系统中的应用 | 第45-46页 |
| ·FLP重组酶在PCR定向突变系统中的应用 | 第46-47页 |
| ·结合转移起始位点oriTRK2在PCR定向突变系统中的应用 | 第47-50页 |
| ·PCR定向突变系统的优点 | 第50页 |
| ·PCR定向突变系统的缺点及发展趋势 | 第50-51页 |
| 第2章 胸膜肺炎放线杆菌XT0404株的分离鉴定及耐药性研究 | 第51-73页 |
| ·研究目的 | 第51-52页 |
| ·材料和方法 | 第52-61页 |
| ·试验动物及病料 | 第52页 |
| ·主要药品及试剂配制 | 第52-54页 |
| ·细菌的分离和鉴定 | 第54-58页 |
| ·分离株与血清型2参考菌株S1536的对比 | 第58页 |
| ·药敏试验 | 第58-59页 |
| ·动物回归试验 | 第59-60页 |
| ·对耐过动物的人工感染试验 | 第60页 |
| ·小鼠半数致死量(LD_(50))的确定(寇氏(Korbor)法) | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-70页 |
| ·细菌的分离与鉴定 | 第61-62页 |
| ·分离株XT0404与参考菌株S1536的对比 | 第62-64页 |
| ·分离株XT0404的药敏试验 | 第64-65页 |
| ·动物回归试验 | 第65-70页 |
| ·对耐过动物的人工感染试验 | 第70页 |
| ·小鼠半数致死量(LD_(50))的测定 | 第70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 第3章 胸膜肺炎放线杆菌PCR定向突变系统建立及应用该系统失活apx ⅣA的ORF1基因 | 第73-107页 |
| ·研究目的和意义 | 第73-74页 |
| ·材料与方法 | 第74-90页 |
| ·质粒和菌株 | 第74-78页 |
| ·主要药品及试剂配制 | 第78-81页 |
| ·PCR定向突变系统在胸膜肺炎放线杆菌中的建立 | 第81-84页 |
| ·用PCR定向突变系统失活胸膜肺炎放线杆菌apxⅣ的ORF1基因 | 第84-90页 |
| ·结果 | 第90-100页 |
| ·中断盒的改进 | 第90-96页 |
| ·apxⅣ基因的ORF1大片段的克隆 | 第96-97页 |
| ·在大肠杆菌中用中断盒置换ORF1 | 第97-98页 |
| ·FLP重组酶介导的中断盒的敲除 | 第98-99页 |
| ·质粒pT-ORF1genoW△ORF1：：FRT：：cassette的构建 | 第99-100页 |
| ·有选择性标记的胸膜肺炎放线杆菌突变体的产生 | 第100页 |
| ·讨论 | 第100-107页 |
| ·PCR定向突变系统的选择 | 第101-102页 |
| ·中断盒的改进 | 第102-103页 |
| ·同源重组方式的改进 | 第103页 |
| ·供体菌的更换 | 第103-104页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ的OFR1的失活 | 第104-105页 |
| ·改进后的PCR定向突变系统在胸膜肺炎放线杆菌突变株构建中的优势 | 第105-106页 |
| ·在胸膜肺炎放线杆菌建立的PCR定向突变系统的不足之处 | 第106-107页 |
| 第4章 胸膜肺炎放线杆菌外膜脂蛋白(OmlA)ELISA检测方法的建立 | 第107-126页 |
| ·研究目的和意义 | 第107-109页 |
| ·材料和方法 | 第109-117页 |
| ·菌株、质粒和试验动物 | 第109页 |
| ·培养基及试剂 | 第109-111页 |
| ·血清 | 第111-112页 |
| ·检测抗原的制备 | 第112页 |
| ·抗血清的制备 | 第112-113页 |
| ·制备的抗血清与胸膜肺炎放线杆菌标准抗原交叉反应的测定 | 第113-114页 |
| ·融合表达质粒的构建 | 第114-115页 |
| ·融合蛋白的表达、纯化和鉴定 | 第115-116页 |
| ·OmlA-ELISA方法的建立 | 第116-117页 |
| ·结果 | 第117-122页 |
| ·制备的抗血清的效价检测 | 第117页 |
| ·抗血清与14种血清型胸膜肺炎放线杆菌标准抗原的凝集反应 | 第117-119页 |
| ·omlA基因的克隆与表达 | 第119-121页 |
| ·OmlA-ELISA方法的建立 | 第121-122页 |
| ·讨论 | 第122-126页 |
| 第5章 结论 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-145页 |
| 附录 | 第145-146页 |
| 致谢 | 第146页 |
