具有SOD和GPX活性的小肽设计及表达研究
| 第一章 前言 | 第1-25页 |
| 1. 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)及其模拟物 | 第11-18页 |
| ·谷胱甘肽过氧化物酶(GPX) | 第11-16页 |
| ·GPX 的结构 | 第12-13页 |
| ·GPX 的催化机制 | 第13-15页 |
| ·GPX 的生物学效应 | 第15-16页 |
| ·GPX 的人工模拟 | 第16-18页 |
| ·Ebselen 及其衍生物 | 第16-17页 |
| ·硒代谷胱甘肽(GSeH) | 第17页 |
| ·硒化环糊精 | 第17-18页 |
| ·硒化枯草杆菌蛋白酶 | 第18页 |
| ·含硒抗体酶 | 第18页 |
| 2. 超氧化物歧化酶(SOD) | 第18-22页 |
| ·SOD 的结构 | 第19-20页 |
| ·CuZn-SOD 的结构 | 第19-20页 |
| ·Mn-SOD 和 Fe-SOD 的结构 | 第20页 |
| ·SOD 的结构稳定性 | 第20页 |
| ·SOD 的催化机理 | 第20-22页 |
| ·金属辅基的作用 | 第21页 |
| ·催化过程中“咪唑桥”的变化 | 第21-22页 |
| ·SOD 的反应速度常数 | 第22页 |
| 3.G PX 和 SOD 的小肽模拟物 | 第22-24页 |
| ·GPX 的十五肽模拟物 | 第23页 |
| ·SOD 的十七肽模拟物 | 第23-24页 |
| 4. 实验设计方案 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-39页 |
| 1. 材料 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·质粒和菌株 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| 2. 方法 | 第26-39页 |
| ·PCR 扩增小肽基因 | 第26-27页 |
| ·回收DNA 及质粒的酶切、连接 | 第27-28页 |
| ·连接产物转化至TG1 | 第28页 |
| ·重组子的鉴定 | 第28-29页 |
| ·小肽的表达 | 第29-39页 |
| ·小肽基因连入表达载体 | 第29-30页 |
| ·转化E. coli BL-21 菌株 | 第30-31页 |
| ·目的蛋白质的表达 | 第31-33页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·目的蛋白的活性测定 | 第34-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-46页 |
| 1. 结果 | 第39-45页 |
| ·小肽双功能酶的设计 | 第39-40页 |
| ·小肽双功能酶基因的合成 | 第40页 |
| ·小肽双功能酶基因的扩增 | 第40-41页 |
| ·小肽双功能酶基因连入表达载体pGEX-2T 中 | 第41-42页 |
| ·重组子的筛选和鉴定 | 第42-43页 |
| ·目的蛋白的表达,纯化,酶切 | 第43-45页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第43-44页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第44-45页 |
| ·凝血酶切融合蛋白 | 第45页 |
| 2. 总结 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 中文摘要 | 第51-53页 |
| 英文摘要 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 导师简介 | 第56页 |
