| 提 要 | 第1-7页 |
| 绪 论 | 第7-15页 |
| 第一章 实验材料及仪器 | 第15-17页 |
| 一、 实验材料及试剂 | 第15页 |
| 二、 主要仪器设备 | 第15-17页 |
| 第二章 工程茵rhTal／w311O的构建 | 第17-31页 |
| 一、 基因工程表达质粒PSTII-Tal的构建 | 第17-27页 |
| 1 、基因工程表达质粒PSTII-Tal的构建示意图 | 第19页 |
| 2 、碱裂解法提取质粒 | 第19-22页 |
| 3 、原始质粒PSTII的双酶切 | 第22-23页 |
| 4 、连接反应l | 第23-24页 |
| 5 、重组质粒的酶切鉴定 | 第24-26页 |
| 6 、目的基因序列分析 | 第26-27页 |
| 二、 pTa1／W3110表达菌株的制备及鉴定 | 第27-31页 |
| 1 、质粒的转化 | 第28-29页 |
| 2 、转化后菌株中质粒的鉴定 | 第29-31页 |
| 第三章 工程茵rhTal／w311O的诱导表达 | 第31-47页 |
| 一、 建立原始种子库 | 第31-35页 |
| 1 、具体的实验路线 | 第31-32页 |
| 2 、表达菌株的筛选 | 第32-35页 |
| 二. 、表达产物的sDs-PAGE鉴定 | 第35-36页 |
| 1 、表达产物的初期制备 | 第35页 |
| 2 、SDS-PAGE电泳检测 | 第35-36页 |
| 三、 表达产物的质谱检测 | 第36-38页 |
| 1 、表达产物的精纯路线 | 第36-37页 |
| 2 、质谱检测结果 | 第37-38页 |
| 四、 表达产物的氨基酸全序列分析 | 第38-42页 |
| 五、 表达产物的活性测定 | 第42-47页 |
| 1 、试剂 | 第42-43页 |
| 2 、试验方法 | 第43-45页 |
| 3 、试验结果 | 第45-47页 |
| 总结 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 致 谢 | 第52-53页 |
| 中英文摘要 | 第53-57页 |