摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
前言 | 第7-17页 |
1 水稻基因定位与克隆进展 | 第7-10页 |
2 抗除草剂基因及作用机理的研究进展 | 第10-12页 |
3 水稻苯达松敏感致死基因研究进展 | 第12-16页 |
4 本研究内容及其意义 | 第16-17页 |
第一部分 离子注入,γ射线诱导农林8号m系BSL→BSL~-突变 | 第17-21页 |
1 材料与方法 | 第17-18页 |
·水稻材料 | 第17页 |
·实验方法和手段 | 第17-18页 |
2 结果与分析 | 第18-19页 |
·苯达松水培不同品种水稻苗(二叶期)存活率不同浓度苯达松对不同品种水稻苗(二叶期)致死率 | 第18页 |
·不同剂量的离子注入,γ射线诱导农林8号m系BSL→BSL~-基因突变 | 第18-19页 |
·筛选 | 第19页 |
3 讨论 | 第19-21页 |
第二部分 农林8号和农林8号m cDNA文库的构建与分析 | 第21-38页 |
1 材料与方法 | 第21-31页 |
·水稻材料 | 第21-22页 |
·仪器试剂 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-31页 |
·总RNA提取 | 第23页 |
·mRNA分离 | 第23-25页 |
·第一链的合成 | 第25页 |
·第二链的合成 | 第25-26页 |
·cDNA末端补平 | 第26-27页 |
·连接EcoR Ⅰ接头 | 第27页 |
·磷酸化EcoR Ⅰ接头 | 第27页 |
·用Xho Ⅰ酶切 | 第27-28页 |
·cDNA大小选择 | 第28-29页 |
·用uni-ZAP XR载体连接cDNA | 第29页 |
·包装 | 第29-30页 |
·宿主菌的制备 | 第30页 |
·cDNA库容量测定 | 第30页 |
·cDNA库的扩增 | 第30-31页 |
·cDNA插入片断大小分析 | 第31页 |
·cDNA文库连接效率检测 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-34页 |
·RNA质量检测 | 第31-32页 |
·mRNA质量检测 | 第32页 |
·重组噬菌斑的数目 | 第32页 |
·cDNA插入片断分析 | 第32-34页 |
3 讨论 | 第34-38页 |
第三部分 BSL基因克隆子的筛选 | 第38-50页 |
1 材料与方法 | 第39-45页 |
·实验材料 | 第39页 |
·实验试剂 | 第39-40页 |
·实验仪器 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-45页 |
·DNA探针制备 | 第40页 |
·DNA的转膜与固定 | 第40-41页 |
·BSL基因的预杂交、杂交 | 第41页 |
·洗膜、压片、挑取有较信号的噬菌斑 | 第41-42页 |
·PCR反应 | 第42页 |
·琼脂糖凝胶中回收DNA片段,纯化 | 第42页 |
·DNA分子连接 | 第42-43页 |
·感受态的脸制备 | 第43页 |
·转化、涂板 | 第43-44页 |
·质粒DNA制备 | 第44页 |
·EcoR Ⅰ酶切 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-48页 |
·BSL基因的筛选 | 第45页 |
·目标重组子的酶切 | 第45-46页 |
·序列分析 | 第46-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
个人简历 | 第59页 |