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水稻农林8号、农林8号m cDNA文库的构建和BSL基因的筛选

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
前言第7-17页
 1 水稻基因定位与克隆进展第7-10页
 2 抗除草剂基因及作用机理的研究进展第10-12页
 3 水稻苯达松敏感致死基因研究进展第12-16页
 4 本研究内容及其意义第16-17页
第一部分 离子注入,γ射线诱导农林8号m系BSL→BSL~-突变第17-21页
 1 材料与方法第17-18页
   ·水稻材料第17页
   ·实验方法和手段第17-18页
 2 结果与分析第18-19页
   ·苯达松水培不同品种水稻苗(二叶期)存活率不同浓度苯达松对不同品种水稻苗(二叶期)致死率第18页
   ·不同剂量的离子注入,γ射线诱导农林8号m系BSL→BSL~-基因突变第18-19页
   ·筛选第19页
 3 讨论第19-21页
第二部分 农林8号和农林8号m cDNA文库的构建与分析第21-38页
 1 材料与方法第21-31页
   ·水稻材料第21-22页
   ·仪器试剂第22-23页
   ·实验方法第23-31页
     ·总RNA提取第23页
     ·mRNA分离第23-25页
     ·第一链的合成第25页
     ·第二链的合成第25-26页
     ·cDNA末端补平第26-27页
     ·连接EcoR Ⅰ接头第27页
     ·磷酸化EcoR Ⅰ接头第27页
     ·用Xho Ⅰ酶切第27-28页
     ·cDNA大小选择第28-29页
     ·用uni-ZAP XR载体连接cDNA第29页
     ·包装第29-30页
     ·宿主菌的制备第30页
     ·cDNA库容量测定第30页
     ·cDNA库的扩增第30-31页
     ·cDNA插入片断大小分析第31页
     ·cDNA文库连接效率检测第31页
 2 结果与分析第31-34页
   ·RNA质量检测第31-32页
   ·mRNA质量检测第32页
   ·重组噬菌斑的数目第32页
   ·cDNA插入片断分析第32-34页
 3 讨论第34-38页
第三部分 BSL基因克隆子的筛选第38-50页
 1 材料与方法第39-45页
   ·实验材料第39页
   ·实验试剂第39-40页
   ·实验仪器第40页
   ·实验方法第40-45页
     ·DNA探针制备第40页
     ·DNA的转膜与固定第40-41页
     ·BSL基因的预杂交、杂交第41页
     ·洗膜、压片、挑取有较信号的噬菌斑第41-42页
     ·PCR反应第42页
     ·琼脂糖凝胶中回收DNA片段,纯化第42页
     ·DNA分子连接第42-43页
     ·感受态的脸制备第43页
     ·转化、涂板第43-44页
     ·质粒DNA制备第44页
     ·EcoR Ⅰ酶切第44-45页
 2 结果与分析第45-48页
   ·BSL基因的筛选第45页
   ·目标重组子的酶切第45-46页
   ·序列分析第46-48页
 3 讨论第48-50页
结论第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58-59页
个人简历第59页

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