中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
缩写表 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-43页 |
第一节 天然雄性不育 | 第13-15页 |
1 核雄性不育 | 第13页 |
2 细胞质雄性不育 | 第13-15页 |
3 生理型雄性不育 | 第15页 |
第二节 基因工程雄性不育 | 第15-25页 |
1 Mariani策略 | 第15-19页 |
2 通过影响植物的正常生理代谢形成雄性不育 | 第19页 |
3 通过互补系统来形成雄性不育或育性恢复 | 第19页 |
4 利用反义技术获得转基因雄性不育 | 第19-20页 |
5 其他策略 | 第20页 |
6 基因工程雄性不育的改进 | 第20-21页 |
7 雄性不育的繁殖 | 第21-25页 |
第三节 基因表达调控 | 第25-40页 |
1 定位重组系统 | 第26-33页 |
2 热激调控系统 | 第33-36页 |
3 化学调控系统 | 第36-40页 |
第四节 植物转化方法 | 第40-41页 |
1 基因枪法 | 第40页 |
2 农杆菌介导转化法 | 第40-41页 |
3 花粉管通道法 | 第41页 |
第五节 立题意义与实验设计 | 第41-43页 |
1 立题意义 | 第41-42页 |
2 实验设计 | 第42-43页 |
第二章 基本的实验材料和方法 | 第43-59页 |
第一节 材料 | 第43-46页 |
1 植物材料 | 第43页 |
2 菌株和质粒 | 第43-44页 |
3 试剂盒及人工寡聚核苷酸引物 | 第44-45页 |
4 酶和试剂 | 第45页 |
5 培养基 | 第45-46页 |
6 常用溶液 | 第46页 |
第二节 方法 | 第46-58页 |
1 碱裂解法小量制备质粒DNA | 第46-47页 |
2 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第47-48页 |
3 质粒载体构建 | 第48-50页 |
4 根癌农杆菌感受态的制备与冻融法质粒转化 | 第50页 |
5 叶盘法转化植物 | 第50-51页 |
6 植物总DNA的制备 | 第51-52页 |
7 Southern印迹分析 | 第52-55页 |
8 斑点杂交分析 | 第55页 |
9 GUS活性检测 | 第55-57页 |
10 基因枪法转化小麦 | 第57-58页 |
主要参考文献 | 第58-59页 |
第三章 热激诱导定位重组系统的建立 | 第59-72页 |
摘要 | 第59页 |
引言 | 第59-61页 |
结果与讨论 | 第61-72页 |
1 热激启动子克隆及调控Gus基因表达 | 第61-65页 |
2 热激诱导定位重组系统的建立 | 第65-72页 |
第四章 热激诱导雄性不育基因在烟草中表达 | 第72-81页 |
摘要 | 第72页 |
引言 | 第72-75页 |
结果与讨论 | 第75-81页 |
1 载体pIBC1的构建及鉴定 | 第75页 |
2 烟草转化及PCR、Southern blot鉴定以及转基因植株的热激处理 | 第75页 |
3 转基因植株花器官形态学观察 | 第75-76页 |
4 转基因烟草花粉染色镜检结果 | 第76页 |
5 转基因植株花粉萌发实验结果 | 第76页 |
6 部分转基因植株结实率统计 | 第76-77页 |
7 讨论 | 第77-81页 |
第五章 热激诱导雄性不育基因在小麦花药中表达 | 第81-92页 |
摘要 | 第81页 |
引言 | 第81-84页 |
结果与讨论 | 第84-92页 |
1 在小麦花药中组成型表达Barnase基因 | 第84-86页 |
2 热激调控Barnase基因在小麦花药中表达 | 第86-92页 |
第六章 铜诱导雄性不育基因在小麦花药中表达 | 第92-98页 |
摘要 | 第92页 |
引言 | 第92-95页 |
结果与讨论 | 第95-98页 |
1 载体pIBC6的构建及鉴定 | 第95页 |
2 小麦转化、PCR鉴定以及T_1代转基因植株的铜离子诱导 | 第95-96页 |
3 T_1代转基因小麦花粉染色镜检结果 | 第96页 |
4 部分T_1代转基因小麦结实率统计 | 第96页 |
5 讨论 | 第96-98页 |
第七章 花粉形成相关转录因子启动子在烟草花药中控制GUS基因表达 | 第98-101页 |
摘要 | 第98-99页 |
结果与讨论 | 第99-101页 |
1 载体pIBC7的构建及鉴定 | 第99页 |
2 烟草转化与PCR检测 | 第99页 |
3 转基因烟草组织化学染色结果 | 第99-101页 |
结果与展望 | 第101-104页 |
参考文献 | 第104-116页 |
附图1 | 第116-117页 |
附图2 | 第117-118页 |
附图3 | 第118-119页 |
附图4 | 第119-120页 |
附图5 | 第120-122页 |
附图6 | 第122-124页 |
附图7 | 第124-127页 |
附图8 | 第127-128页 |
附图9 | 第128-129页 |
在读期间发表文章 | 第129-130页 |
致谢 | 第130页 |