| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 梨病毒及类病毒研究进展 | 第8-17页 |
| ·梨病毒及类脑毒种类及性质 | 第8-12页 |
| ·苹果褪绿叶斑病毒 | 第8-9页 |
| ·苹果茎沟病毒 | 第9-11页 |
| ·苹果茎痘病毒 | 第11页 |
| ·梨疱状溃疡类病毒 | 第11-12页 |
| ·苹果锈果类病毒 | 第12页 |
| ·检测技术 | 第12-15页 |
| ·生物学方法 | 第12页 |
| ·血清学技术 | 第12-14页 |
| ·分子生物学技术 | 第14-15页 |
| ·脱毒方法 | 第15-16页 |
| ·热处理脱毒法 | 第15页 |
| ·茎尖脱毒法 | 第15-16页 |
| ·热处理与茎尖培养结合脱毒法 | 第16页 |
| ·化学制剂与茎尖培养相结合脱毒法 | 第16页 |
| ·研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 砂梨病毒的生物学检测 | 第17-24页 |
| ·试验材料 | 第17页 |
| ·毒源材料 | 第17页 |
| ·待检砂梨样品 | 第17页 |
| ·指示植物 | 第17页 |
| ·接种缓冲液 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-18页 |
| ·汁液摩擦接种 | 第17页 |
| ·二重芽接法 | 第17-18页 |
| ·结果与分析 | 第18-21页 |
| ·草本指示植物检测结果 | 第18-19页 |
| ·木本指示植物检测结果 | 第19-20页 |
| ·草本指示植物和木本指示植物检测结果比较 | 第20页 |
| ·接种缓冲液对病毒检测效果的影响 | 第20-21页 |
| ·结论与讨论 | 第21-24页 |
| 3 砂梨病毒的血清学检测 | 第24-31页 |
| ·试验材料 | 第24页 |
| ·检测材料 | 第24页 |
| ·标准毒源 | 第24页 |
| ·试剂 | 第24页 |
| ·样品提取缓冲液 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-26页 |
| ·PAS-ELISA(Protein A sandwich ELISA)检测 | 第24-25页 |
| ·改进的PAS-ELISA检测 | 第25页 |
| ·直接包被抗原(Plate trapped antigen indirect ELISA，PTA-ELISA)检测 | 第25页 |
| ·DOt-ELISA | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-30页 |
| ·梨品种带毒状况的初步鉴定 | 第26页 |
| ·不同检测方法检测结果的比较 | 第26-28页 |
| ·样品最佳稀释倍数的确定 | 第28页 |
| ·提取缓冲液对病毒检测效果的影响 | 第28-29页 |
| ·不同材料检测效果的比较 | 第29-30页 |
| ·改进PAS-ELISA方法检测ASGV和ASPV最佳条件 | 第30页 |
| ·结论与讨论 | 第30-31页 |
| 4 砂梨病毒的分子生物学检测 | 第31-38页 |
| ·试验材料 | 第31页 |
| ·待检材料 | 第31页 |
| ·标准毒源 | 第31页 |
| ·抗体和主要试剂 | 第31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·试验方法 | 第31-34页 |
| ·标准毒源病叶总核酸的提取 | 第31-32页 |
| ·反转录合成第一链cDNA | 第32页 |
| ·PCR扩增 | 第32页 |
| ·IC-RT-PCR(Immunocapture IC-RT-PCR) | 第32-33页 |
| ·TC-RT-PCR(Tube capture TC-RT-PCR) | 第33页 |
| ·PCR产物的电泳分析 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·RT-PCR、IC-RT-PCR、TC-RT-PCR检测标准毒源结果 | 第34页 |
| ·ASGV检测结果 | 第34-35页 |
| ·ACLSV检测结果 | 第35-36页 |
| ·ASPV检测结果 | 第36页 |
| ·ASGV和ACLSV复合侵染样品的检测结果 | 第36-37页 |
| ·结论与讨论 | 第37-38页 |
| 5 砂梨病毒脱毒处理 | 第38-42页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·脱毒材料 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·病毒抑制剂 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-39页 |
| ·茎尖培养 | 第38页 |
| ·茎尖在添加病毒净培养基上培养处理 | 第38页 |
| ·培养条件 | 第38页 |
| ·病毒脱除效果的鉴定 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-41页 |
| ·茎尖培养结果 | 第39页 |
| ·茎尖在添加病毒净培养基上培养结果 | 第39页 |
| ·茎尖在添加病毒净培养基上培养处理病毒脱除结果 | 第39-41页 |
| ·结论与讨论 | 第41-42页 |
| 6 砂梨病毒检测方法的综合比较 | 第42-44页 |
| ·田间样品的病毒检测结果 | 第42页 |
| ·脱毒苗的病毒检测结果 | 第42-43页 |
| ·结论与讨论 | 第43-44页 |
| 附录. 试验所用常规溶液配方 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
