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拟南芥AST基因的精细作图

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
第一章 高等植物类黄酮生物合成基因及其表达调控第8-25页
 1 类黄酮化合物的基本结构第8页
 2 花青苷的生物合成途径第8-11页
 3 花青苷生物合成的结构基因第11-16页
  3.1 查尔酮合酶第11页
  3.2 查尔酮异构酶第11-12页
  3.3 黄烷酮3-羟化酶第12页
  3.4 类黄酮3′-羟化酶第12-13页
  3.5 类黄酮3′5′-羟化酶第13页
  3.6 二氢黄酮醇4-还原酶第13-14页
  3.7 花青素合酶第14页
  3.8 类黄酮糖基转移酶第14-15页
  3.9 花青苷甲基转移酶第15页
  3.10 其它结构基因第15-16页
 4 花青苷生物合成的调节基因第16-18页
  4.1 玉米中花青苷生物合成的调节基因第16-17页
  4.2 金鱼草中花青苷生物合成的调节基因第17页
  4.3 矮牵牛中花青苷生物合成的调节基因第17-18页
 5 花青苷生物合成基因表达的调控第18页
  5.1 转录水平的调控第18页
  5.2 转录后水平的调控第18页
 6 拟南芥中类黄酮的生物合成第18-22页
  6.1 用拟南芥研究类黄酮生物合成的优越性第18-19页
  6.2 拟南芥类黄酮生物合成途径第19-21页
  6.3 结构基因第21-22页
  6.4 调节基因第22页
 7 研究类黄酮生物合成的意义第22-25页
  7.1 新的遗传转化标记第22-23页
  7.2 利用遗传工程技术改变花色第23-25页
第二章 本课题的研究背景及技术路线第25-28页
 1 研究背景第25-26页
 2 技术路线第26-28页
第三章 用DDRT-PCR银染技术分析野生型与ast突变型之间基因表达的差异第28-42页
 1 前言第28-29页
 2 材料与方法第29-35页
  2.1 实验材料及试剂第29页
  2.2 实验方法第29-35页
   2.2.1 总RNA的提取第29-30页
   2.2.2 除去RNA中的DNA第30页
   2.2.3 反转录第30-31页
   2.2.4 PCR扩增第31页
   2.2.5 6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第31页
   2.2.6 银染第31-32页
   2.2.7 重复性检测第32页
   2.2.8 灵敏度检测第32页
   2.2.9 差异条带的二次PCR扩增第32-33页
   2.2.10 差异cDNA片段的回收第33页
   2.2.11 差异cDNA片段的克隆第33-34页
   2.2.12 阳性克隆的筛选第34-35页
   2.2.13 DNA测序第35页
   2.2.14 核苷酸序列同源性分析第35页
 3 结果与分析第35-38页
  3.1 PCR扩增产物的分离第35页
  3.2 重复性检测第35-36页
  3.3 灵敏度的检测第36页
  3.4 野生型与ast突变型角果中基因表达的差异第36-38页
 4 讨论第38-42页
  4.1 DDRT-PCR银染方法第38-40页
  4.2 拟南芥野生型与ast突变型之间差异片段的检测第40-42页
第四章 拟南芥AST基因的精细作图第42-74页
 1 前言第42-43页
 2 材料与方法第43-45页
  2.1 实验材料第43页
  2.2 实验方法第43-45页
   2.2.1 建立F2作图群体第43页
   2.2.2 F2作图群体中植株基因型的鉴定第43页
   2.2.3 拟南芥DNA的提取第43-44页
   2.2.4 分子标记nga280附近物理图谱的获得第44页
   2.2.5 分子标记的设计第44-45页
   2.2.6 PCR扩增第45页
   2.2.7 分子标记nga280引物、PCR及电泳第45页
 3 结果与分析第45-71页
  3.1 拟南芥nga280附近的物理图谱第45-47页
  3.2 AST位点侧翼分子标记的确定第47-51页
   3.2.1 分子标记D4512-1的设计第48-50页
   3.2.2 利用分子标记D4512-1对F2作图群体进行筛选第50页
   3.2.3 利用分子标记nga280对F2作图群体进行筛选第50页
   3.2.4 确定AST位点的侧翼分子标记第50-51页
  3.3 利用分子标记D4512-1大量筛选F2代作图群体第51页
  3.4 利用分子标记nga280大量筛选F2代作图群体第51-61页
  3.5 分子标记ID9317-1的引物设计及重组子筛选第61-63页
   3.5.1 引物设计第61-62页
   3.5.2 利用分子标记ID9317-1筛选重组子第62-63页
  3.6 分子标记D2294-1的引物设计及重组子筛选第63-64页
   3.6.1 引物设计第63页
   3.6.2 利用分子标记D2294-1筛选重组子第63-64页
  3.7 分子标记D5850-1的引物设计及重组子筛选第64页
   3.7.1 引物设计第64页
   3.7.2 利用分子标记D5850-1筛选重组子第64页
  3.8 分子标记ID8047-1的引物设计及重组子筛选第64-66页
   3.8.1 引物设计第64-65页
   3.8.2 利用分子标记ID8047-1筛选重组子第65-66页
  3.9 分子标记D4392-1的引物设计及重组子筛选第66-67页
   3.9.1 引物设计第66页
   3.9.2 利用分子标记D4392-1筛选重组子第66-67页
  3.10 分子标记D5882-1的引物设计及重组子筛选第67-68页
   3.10.1 引物设计第67页
   3.10.2 利用分子标记D5882-1筛选重组子第67-68页
  3.11 候选基因的确定第68-70页
  3.12 AST基因精细作图总结第70-71页
 4 讨论第71-74页
参考文献第74-85页
附录 副论文第85-113页
缩写词第113-115页
在学期间发表论文第115-116页
致谢第116页

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