中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
第一章 高等植物类黄酮生物合成基因及其表达调控 | 第8-25页 |
1 类黄酮化合物的基本结构 | 第8页 |
2 花青苷的生物合成途径 | 第8-11页 |
3 花青苷生物合成的结构基因 | 第11-16页 |
3.1 查尔酮合酶 | 第11页 |
3.2 查尔酮异构酶 | 第11-12页 |
3.3 黄烷酮3-羟化酶 | 第12页 |
3.4 类黄酮3′-羟化酶 | 第12-13页 |
3.5 类黄酮3′5′-羟化酶 | 第13页 |
3.6 二氢黄酮醇4-还原酶 | 第13-14页 |
3.7 花青素合酶 | 第14页 |
3.8 类黄酮糖基转移酶 | 第14-15页 |
3.9 花青苷甲基转移酶 | 第15页 |
3.10 其它结构基因 | 第15-16页 |
4 花青苷生物合成的调节基因 | 第16-18页 |
4.1 玉米中花青苷生物合成的调节基因 | 第16-17页 |
4.2 金鱼草中花青苷生物合成的调节基因 | 第17页 |
4.3 矮牵牛中花青苷生物合成的调节基因 | 第17-18页 |
5 花青苷生物合成基因表达的调控 | 第18页 |
5.1 转录水平的调控 | 第18页 |
5.2 转录后水平的调控 | 第18页 |
6 拟南芥中类黄酮的生物合成 | 第18-22页 |
6.1 用拟南芥研究类黄酮生物合成的优越性 | 第18-19页 |
6.2 拟南芥类黄酮生物合成途径 | 第19-21页 |
6.3 结构基因 | 第21-22页 |
6.4 调节基因 | 第22页 |
7 研究类黄酮生物合成的意义 | 第22-25页 |
7.1 新的遗传转化标记 | 第22-23页 |
7.2 利用遗传工程技术改变花色 | 第23-25页 |
第二章 本课题的研究背景及技术路线 | 第25-28页 |
1 研究背景 | 第25-26页 |
2 技术路线 | 第26-28页 |
第三章 用DDRT-PCR银染技术分析野生型与ast突变型之间基因表达的差异 | 第28-42页 |
1 前言 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-35页 |
2.1 实验材料及试剂 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-35页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.2.2 除去RNA中的DNA | 第30页 |
2.2.3 反转录 | 第30-31页 |
2.2.4 PCR扩增 | 第31页 |
2.2.5 6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31页 |
2.2.6 银染 | 第31-32页 |
2.2.7 重复性检测 | 第32页 |
2.2.8 灵敏度检测 | 第32页 |
2.2.9 差异条带的二次PCR扩增 | 第32-33页 |
2.2.10 差异cDNA片段的回收 | 第33页 |
2.2.11 差异cDNA片段的克隆 | 第33-34页 |
2.2.12 阳性克隆的筛选 | 第34-35页 |
2.2.13 DNA测序 | 第35页 |
2.2.14 核苷酸序列同源性分析 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-38页 |
3.1 PCR扩增产物的分离 | 第35页 |
3.2 重复性检测 | 第35-36页 |
3.3 灵敏度的检测 | 第36页 |
3.4 野生型与ast突变型角果中基因表达的差异 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
4.1 DDRT-PCR银染方法 | 第38-40页 |
4.2 拟南芥野生型与ast突变型之间差异片段的检测 | 第40-42页 |
第四章 拟南芥AST基因的精细作图 | 第42-74页 |
1 前言 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-45页 |
2.1 实验材料 | 第43页 |
2.2 实验方法 | 第43-45页 |
2.2.1 建立F2作图群体 | 第43页 |
2.2.2 F2作图群体中植株基因型的鉴定 | 第43页 |
2.2.3 拟南芥DNA的提取 | 第43-44页 |
2.2.4 分子标记nga280附近物理图谱的获得 | 第44页 |
2.2.5 分子标记的设计 | 第44-45页 |
2.2.6 PCR扩增 | 第45页 |
2.2.7 分子标记nga280引物、PCR及电泳 | 第45页 |
3 结果与分析 | 第45-71页 |
3.1 拟南芥nga280附近的物理图谱 | 第45-47页 |
3.2 AST位点侧翼分子标记的确定 | 第47-51页 |
3.2.1 分子标记D4512-1的设计 | 第48-50页 |
3.2.2 利用分子标记D4512-1对F2作图群体进行筛选 | 第50页 |
3.2.3 利用分子标记nga280对F2作图群体进行筛选 | 第50页 |
3.2.4 确定AST位点的侧翼分子标记 | 第50-51页 |
3.3 利用分子标记D4512-1大量筛选F2代作图群体 | 第51页 |
3.4 利用分子标记nga280大量筛选F2代作图群体 | 第51-61页 |
3.5 分子标记ID9317-1的引物设计及重组子筛选 | 第61-63页 |
3.5.1 引物设计 | 第61-62页 |
3.5.2 利用分子标记ID9317-1筛选重组子 | 第62-63页 |
3.6 分子标记D2294-1的引物设计及重组子筛选 | 第63-64页 |
3.6.1 引物设计 | 第63页 |
3.6.2 利用分子标记D2294-1筛选重组子 | 第63-64页 |
3.7 分子标记D5850-1的引物设计及重组子筛选 | 第64页 |
3.7.1 引物设计 | 第64页 |
3.7.2 利用分子标记D5850-1筛选重组子 | 第64页 |
3.8 分子标记ID8047-1的引物设计及重组子筛选 | 第64-66页 |
3.8.1 引物设计 | 第64-65页 |
3.8.2 利用分子标记ID8047-1筛选重组子 | 第65-66页 |
3.9 分子标记D4392-1的引物设计及重组子筛选 | 第66-67页 |
3.9.1 引物设计 | 第66页 |
3.9.2 利用分子标记D4392-1筛选重组子 | 第66-67页 |
3.10 分子标记D5882-1的引物设计及重组子筛选 | 第67-68页 |
3.10.1 引物设计 | 第67页 |
3.10.2 利用分子标记D5882-1筛选重组子 | 第67-68页 |
3.11 候选基因的确定 | 第68-70页 |
3.12 AST基因精细作图总结 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
附录 副论文 | 第85-113页 |
缩写词 | 第113-115页 |
在学期间发表论文 | 第115-116页 |
致谢 | 第116页 |