| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-22页 |
| ·锌污染概况 | 第9-11页 |
| ·锌污染治理的研究进展 | 第11-13页 |
| ·耐锌微生物的研究目的及意义 | 第13-14页 |
| ·微生物富锌的机理 | 第14-18页 |
| ·耐锌菌株的锌抗性机制 | 第14-15页 |
| ·锌抗性基因的结构和表达 | 第15-18页 |
| ·位于质粒上的锌抗性基因结构和表达 | 第15-16页 |
| ·位于染色体上的锌抗性基因结构和表达 | 第16-18页 |
| ·富Zn微生物的培养方法 | 第18-19页 |
| ·抗重金属基因的功能分析 | 第19页 |
| ·展望 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的意义 | 第20-21页 |
| ·本研究的主要内容和技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 高效富集重金属Zn的细菌菌株筛选 | 第22-26页 |
| ·材料与方法 | 第22-23页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·样品采集 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·方法(抗性菌株筛选) | 第22-23页 |
| ·富集 | 第22-23页 |
| ·抗性菌株筛选 | 第23页 |
| ·实验结果与分析 | 第23-24页 |
| ·实验结果 | 第23-24页 |
| ·结果分析 | 第24页 |
| ·小结与讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 理化性质测定 | 第26-38页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·菌株2-69、2-43和2-21的生长曲线 | 第26-27页 |
| ·菌株2-69、2-43和2-21耐受性实验 | 第27页 |
| ·不同pH对筛选菌株生长影响的实验 | 第27页 |
| ·不同温度对筛选菌株生长影响的实验 | 第27页 |
| ·不同Zn~(2+)浓度、pH、温度对筛选菌株生长影响的实验 | 第27页 |
| ·菌株2-69、2-43和2-21的吸附性实验 | 第27-29页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第28页 |
| ·吸附曲线 | 第28页 |
| ·不同Zn~(2+)浓度、pH、温度对筛选菌株吸附性影响的实验 | 第28-29页 |
| ·实验结果及分析 | 第29-37页 |
| ·菌株2-69、2-43和2-21的生长曲线 | 第29-30页 |
| ·菌株2-69、2-43和2-21耐受性实验 | 第30-34页 |
| ·不同pH对筛选菌株生长影响的实验 | 第30页 |
| ·不同温度对筛选菌株生长影响的实验 | 第30-31页 |
| ·不同Zn~(2+)、温度、pH对筛选菌株生长影响的实验 | 第31-34页 |
| ·菌株2-69、2-43和2-21的吸附性实验 | 第34-37页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第34页 |
| ·吸附曲线 | 第34-35页 |
| ·不同Zn~(2+)浓度、pH、温度对筛选菌株吸附性影响的实验 | 第35-37页 |
| ·小结与讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 高效富集重金属Zn的细菌菌种鉴定 | 第38-48页 |
| ·实验材料 | 第38-41页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·LB液体培养基 | 第38-39页 |
| ·LB固体培养基 | 第39页 |
| ·试剂及溶液 | 第39-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·菌种生理生化鉴定 | 第41页 |
| ·革兰氏染色 | 第41页 |
| ·菌种分子鉴定 | 第41-43页 |
| ·菌株2-69和2-43总DNA提取 | 第41页 |
| ·菌株2-69和2-43 16s rDNA扩增 | 第41-42页 |
| ·菌株2-69和2-43扩增产物的纯化 | 第42页 |
| ·菌株2-69和2-43重组质粒的构建和鉴定 | 第42-43页 |
| ·菌株2-69和2-43 16s rDNA序列测定与分析 | 第43页 |
| ·实验结果与分析 | 第43-46页 |
| ·形态观察和细胞大小鉴定 | 第43-44页 |
| ·菌种分子鉴定 | 第44-46页 |
| ·菌株2-69和2-43总DNA提取 | 第44页 |
| ·菌株2-69和2-43 16s rDNA扩增 | 第44页 |
| ·菌株2-69和2-43重组质粒的构建和鉴定 | 第44页 |
| ·菌株2-69和2-43 16s rDNA序列测定与分析 | 第44-46页 |
| ·小结与讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 czc基因克隆 | 第48-60页 |
| ·实验材料 | 第48-51页 |
| ·实验仪器 | 第48页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第48页 |
| ·培养基 | 第48-49页 |
| ·LB液体培养基 | 第48-49页 |
| ·LB固体培养基 | 第49页 |
| ·试剂及溶液 | 第49-51页 |
| ·实验方法 | 第51-55页 |
| ·铜绿假单胞菌的总DNA提取 | 第52页 |
| ·czc基因的引物设计 | 第52页 |
| ·czc基因的扩增 | 第52-53页 |
| ·czc基因扩增产物的纯化 | 第53页 |
| ·重组质粒的构建和鉴定 | 第53页 |
| ·czc基因序列测定与分析 | 第53-54页 |
| ·酶切重组T载体 | 第54-55页 |
| ·实验结果与分析 | 第55-58页 |
| ·总DNA提取 | 第55页 |
| ·czcCB、czcA基因扩增结果 | 第55页 |
| ·重组质粒验证 | 第55页 |
| ·czc基因测序结果 | 第55-58页 |
| ·小结与讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 结论与展望 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第60页 |
| ·本论文的主要创新点 | 第60页 |
| ·建议 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录A:表达载体pUC-18图谱 | 第68-69页 |
| 附录B:菌株2-43的16s rDNA基因片段测序报告(SP6) | 第69页 |
| 附录C:菌株2-69的czc基因片段测序报告(SP6) | 第69-70页 |
| 附录D:GenBank中登录czc基因的网页 | 第70-74页 |
| 附录E:缩略词表 | 第74-76页 |
| 附录F:攻读硕士研究生期间的科研成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |