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基于线粒体12S rRNA基因的PCR-RFLP鉴别混合牛肉及制品的牛种来源研究

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
1 文献综述第13-25页
   ·牛的分类第13页
   ·牛上常用的分子标记第13-19页
     ·RFLP和PCR-RFLP第13-15页
     ·微卫星标记第15-16页
     ·AFLP标记第16页
     ·DNA指纹标记第16-17页
     ·PCR-SSCP标记第17页
     ·RAPD标记第17-18页
     ·SNPs标记第18页
     ·mtDNA标记第18-19页
   ·18S rDNA基因第19-20页
   ·12S rRNA鉴定食品中牛源物质的可行性第20-24页
     ·12S rRNA基因分子特征第20页
     ·12S rRNA的二级结构第20-21页
     ·12S rRNA在物种鉴别上的应用第21页
     ·国内外对食品中牛源物质鉴定的研究进展第21-24页
   ·本研究的目的意义第24-25页
2 材料与方法第25-34页
   ·材料第25-27页
     ·实验样本第25页
     ·主要试剂第25页
     ·DNA提取溶液的配制第25-26页
     ·琼脂糖凝胶电泳溶液的配制第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
   ·实验方法第27-30页
     ·引物设计第27页
     ·PCR-RFLP方法的建立第27-28页
     ·鲜样实验组制备第28页
     ·加工模拟组制备第28-29页
     ·混合肉制品制备第29页
     ·灵敏度确定第29页
     ·总DNA提取第29-30页
   ·PCR扩增第30-31页
     ·引物的评估及PCR条件的设计第30页
     ·18S rDNA基因片段的PCR扩增第30页
     ·12S rRNA基因片段的PCR扩增第30-31页
   ·凝胶电泳第31页
   ·12S rRNA基因片段纯化第31页
   ·12S rRNA基因片段酶切第31-32页
   ·测序验证第32-34页
     ·测序反应第32页
     ·测序反应过程第32页
     ·测序反应条件第32-33页
     ·测序反应产物的纯化第33页
     ·序列测定第33-34页
3 结果与分析第34-45页
     ·内源参照参基因18S rDNA与12S rRNA基因片段扩增第34页
   ·温度对鉴别的影响第34-35页
     ·加工模拟组扩增结果第34-35页
     ·温度对扩增的影响第35页
   ·酶切特异性第35-37页
     ·酶切鉴别结果第35-36页
     ·酶切特异性分析第36-37页
   ·灵敏度第37-38页
     ·灵敏度确定第37页
     ·灵敏度分析第37-38页
   ·14个品种420个个体研究结果第38页
   ·测序验证与序列分析第38-44页
     ·酶切位点测序验证分析第39-40页
     ·序列比对分析第40-41页
     ·12S rRNA基因片段序列的碱基组成第41-43页
     ·聚类分析第43-44页
   ·牛肉干鉴别结果第44-45页
4 讨论第45-53页
   ·鉴别方法的选择第45-48页
     ·遗传标记的选择第45-46页
     ·片段的选择第46-48页
   ·酶切位点的寻找第48-49页
   ·温度对扩增12S rRNA基因片段的影响第49页
   ·内源参照基因的设置第49-50页
   ·加工模拟组合牛肉干DNA提取第50页
   ·检测灵敏度第50页
   ·酶切的适用性第50-51页
   ·非牛源物质的排出第51-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
附录第62-65页
发表文章第65页

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