摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-36页 |
1 前言 | 第13-16页 |
2 文昌鱼-研究脊椎动物起源与进化的模式动物 | 第16-21页 |
3 载脂蛋白 D(Apolipoprotein D, ApoD)的研究进展 | 第21-30页 |
4 氧自由基与抗氧化物质 | 第30-34页 |
5 本文研究目的以及采用的技术路线 | 第34-36页 |
第二章 载脂蛋白D 基因的系统发生、基因结构与表达调控分析 | 第36-52页 |
1 前言 | 第36-37页 |
2 方法 | 第37-38页 |
·系统发生分析 | 第37页 |
·基因结构和序列比对分析 | 第37-38页 |
·调控序列分析 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-49页 |
·系统进化树的构建 | 第38-39页 |
·不同物种的基因结构和序列比对 | 第39-44页 |
·不同物种调控元件的存在情况 | 第44-49页 |
·高度保守调控元件 | 第45页 |
·高度特化的调控元件 | 第45-47页 |
·特殊调控元件 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
第三章 青岛文昌鱼BbApoD 基因的体外表达与功能研究 | 第52-78页 |
1 前言 | 第52-53页 |
2 材料与方法 | 第53-68页 |
·材料 | 第53-56页 |
·特异性引物 | 第53页 |
·质粒与菌株 | 第53页 |
·药品与试剂 | 第53-56页 |
·实验方法 | 第56-68页 |
·融合表达载体的构建 | 第56-59页 |
·CaCl_2 感受态细胞的制备 | 第59页 |
·连接产物的转化 | 第59页 |
·重组质粒pET32a- BbApoD 的筛选 | 第59-60页 |
·重组质粒pET32a- BbApoD 的提取和酶切鉴定 | 第60-61页 |
·重组质粒pET32a- BbApoD 的序列测定 | 第61页 |
·重组BbApoD 基因在大肠杆菌中的融合表达 | 第61页 |
·重组BbApoD 融合蛋白的纯化 | 第61-63页 |
·BbApoD 融合蛋白的SDS-PAGE 分析 | 第63-64页 |
·纯化蛋白中咪唑的透析 | 第64-65页 |
·BCA 法测定纯化后BbApoD 融合蛋白的浓度 | 第65-66页 |
·BbApoD 重组蛋白清除羟自由基作用的测定 | 第66-67页 |
·BbApoD 重组蛋白对DNA 氧化损伤的保护作用 | 第67-68页 |
3 结果 | 第68-75页 |
·BbApoD cDNA 的 PCR 扩增 | 第68页 |
·pET32a- BbApoD 重组质粒的构建 | 第68-69页 |
·pET32a- BbApoD 重组质粒的PCR 和酶切鉴定 | 第69-70页 |
·重组质粒的序列测定 | 第70页 |
·重组pET32a- BbApoD 基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第70-71页 |
·BCA 法测定纯化后BbApoD 融合蛋白的浓度 | 第71-72页 |
·BbApoD 重组蛋白的抗氧化活性 | 第72-75页 |
4 讨论 | 第75-78页 |
总结 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-90页 |
附录 | 第90-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
个人简历 | 第93页 |
发表的学术论文 | 第93页 |