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甘蓝和青花菜小孢子培养及早期胚胎形成相关基因差异表达分析

摘要第1-9页
Abstract第9-17页
第一章 前言第17-36页
   ·甘蓝类蔬菜游离小孢子培养技术研究进展第17-22页
     ·诱导游离小孢子胚胎发生的影响因子第17-21页
     ·胚培养第21-22页
     ·小孢子再生植株的倍性鉴定第22页
     ·染色体加倍第22页
     ·存在的问题第22页
   ·小孢子胚胎发生机理的研究进展第22-31页
     ·细胞形态学观察第23-25页
     ·代谢水平第25-26页
     ·分子水平第26-30页
     ·目前存在的问题第30-31页
   ·基因差异表达研究技术第31-34页
     ·cDNA-AFLP 技术第31-34页
   ·本研究的目的和意义第34-36页
第二章 温度预处理、PH 值对结球甘蓝和青花菜小孢子胚胎发生的影响第36-47页
   ·材料与方法第37-38页
     ·试验材料第37-38页
     ·试验方法第38页
   ·结果与分析第38-44页
     ·不同基因型对小孢子出胚率的影响第38-40页
     ·热激时间对小孢子出胚率的影响第40页
     ·低温预处理时间对小孢子出胚率的影响第40-41页
     ·热激与低温组合预处理方式对小孢子出胚率的影响第41-43页
     ·NLN 和1/2NLN 培养基pH 值对小孢子出胚率的影响第43-44页
   ·讨论第44-45页
     ·基因型对小孢子出胚率的影响第44页
     ·温度预处理对小孢子出胚率的影响第44-45页
     ·NLN 或1/2NLN 培养基pH 对小孢子出胚率的影响第45页
   ·小结第45-47页
第三章 结球甘蓝和青花菜小孢子植株再生影响因素的研究第47-54页
   ·材料与方法第47-49页
     ·试验材料第47页
     ·试验方法第47-49页
   ·结果与分析第49-52页
     ·固体培养基类型对子叶胚再生植株频率的影响第49页
     ·85 固体培养基的琼脂浓度对子叶胚再生成植株的影响第49-50页
     ·不同类型的胚再生植株频率的差异第50页
     ·在NLN-13 或1/2 NLN-13 液体培养基中培养不同时间的胚再生植株频率的差异第50-51页
     ·不同基因型的子叶胚在1%琼脂浓度的B5 培养基上的植株再生频率第51-52页
   ·讨论第52-53页
     ·培养基的类型对胚再生成植株频率的影响第52页
     ·不同类型的胚对再生植株频率的影响第52页
     ·水分对胚再生植株频率的影响第52-53页
     ·对本实验所得出的胚培养体系的应用性评价第53页
   ·小结第53-54页
第四章 甘蓝类蔬菜小孢子再生植株染色体倍性鉴定方法的研究第54-65页
   ·材料与方法第54-56页
     ·试验材料第54-55页
     ·倍性鉴定方法第55-56页
   ·结果与分析第56-63页
     ·不同叶位及叶片部位的气孔保卫细胞叶绿体数第56-58页
     ·不同倍性间的气孔保卫细胞叶绿体数目的差异第58页
     ·染色体倍性与气孔保卫细胞叶绿体数的关系第58-61页
     ·用获得的叶绿体数分界法鉴定染色体倍性的可靠性的进一步分析第61-63页
   ·讨论第63-64页
   ·小结第64-65页
第五章 结球甘蓝和青花菜小孢子再生植株染色体加倍的研究第65-71页
   ·材料与方法第65-66页
     ·试验材料第65页
     ·试验方法第65-66页
   ·结果与分析第66-69页
     ·不同基因型的小孢子再生植株群体的自然加倍率第66-67页
     ·不同预处理方式对‘TI-111’小孢子再生植株群体自然加倍率的影响第67页
     ·人工加倍频率第67-69页
   ·讨论第69-70页
     ·自然加倍第69页
     ·预处理对自然加倍率的影响第69-70页
     ·人工加倍第70页
   ·小结第70-71页
第六章 结球甘蓝和青花菜小孢子早期胚胎形成相关基因的差异表达分析第71-85页
   ·材料与方法第72-78页
     ·试验材料第72页
     ·试验方法第72-78页
   ·结果与分析第78-83页
     ·小孢子总RNA 提取、纯度与质量检测第78-79页
     ·不同温度预处理方式诱导的小孢子中基因差异表达分析第79-81页
     ·与小孢子早期胚胎形成相关的TDFs(Transcript Derived Fragments)第81-83页
   ·讨论第83-84页
     ·试验材料的选取及试验设计第83页
     ·小孢子总RNA 的提取第83页
     ·与小孢子早期胚胎形成相关的TDF第83-84页
   ·小结第84-85页
第七章 结球甘蓝和青花菜小孢子早期胚胎形成相关基因表达片断的克隆、测序及序列相似性比对分析第85-100页
   ·材料与方法第85-87页
     ·试验材料第85页
     ·试验方法第85-87页
   ·结果与分析第87-96页
     ·TDFs 的回收、克隆和测序第87-89页
     ·TDFs 的同源序列比对第89-95页
     ·TDFs 的推测生物信息功能与表达模式分析第95-96页
   ·讨论第96-99页
     ·基于cDNA-AFLP 技术结果的分析第96-97页
     ·与小孢子早期胚胎形成相关的TDF 比对分析第97页
     ·小孢子早期胚胎形成相关基因表达分析第97-99页
   ·小结第99-100页
第八章 结球甘蓝和青花菜小孢子早期胚胎发生相关基因的 CDNA 3′端克隆及表达验证第100-114页
   ·材料与方法第100-105页
     ·试验材料第100-101页
     ·试验方法第101-105页
   ·结果与分析第105-112页
     ·cDNA 3′端克隆第105-106页
     ·部分差异片段表达模式验证第106-112页
   ·讨论第112-113页
     ·cDNA 3′端克隆第112-113页
     ·差异片段表达模式验证第113页
   ·小结第113-114页
第九章 全文结论第114-116页
后续工作展望第116-117页
附录第117-122页
参考文献第122-137页
致谢第137-138页
作者简历第138页

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