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芽孢杆菌β-甘露聚糖酶基因的分子克隆及高效表达

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-25页
   ·研究的目的和意义第13-22页
     ·甘露聚糖第13页
     ·β-甘露聚糖酶的组成及作用特点第13-16页
     ·β-甘露聚糖酶的来源第16-19页
     ·国内外β-甘露聚糖酶的研究进展及现状第19-20页
     ·β-甘露聚糖酶的应用第20-22页
   ·立题依据第22-23页
   ·研究内容和技术路线第23-25页
第二章 产β-甘露聚糖酶菌株的分离鉴定第25-32页
   ·实验材料第25页
     ·实验土样来源第25页
     ·培养基第25页
     ·生物化学试剂和酶第25页
     ·主要仪器第25页
   ·实验方法第25-28页
     ·菌株的培养第25-26页
     ·β-甘露聚糖酶高产菌株的筛选第26页
     ·菌株基因组DNA 的提取第26-27页
     ·16S rDNA 片段PCR 及序列分析第27-28页
   ·结果与分析第28-30页
     ·菌株的筛选第28页
     ·菌株的鉴定第28-30页
   ·讨论第30-32页
第三章 β-甘露聚糖酶在大肠杆菌中的表达及酶学性能分析第32-54页
   ·实验材料第32-33页
     ·实验菌株来源第32页
     ·培养基第32页
     ·生物化学试剂第32-33页
     ·酶第33页
     ·主要仪器第33页
   ·实验方法第33-41页
     ·菌株的生长第33页
     ·β-甘露聚糖酶基因的PCR 扩增第33-34页
     ·β-甘露聚糖酶基因的测序验证第34-35页
     ·β-甘露聚糖酶基因表达载体构建及验证第35-37页
     ·菌种的保存第37页
     ·重组β-甘露聚糖酶的诱导表达第37页
     ·表达产物的纯化第37-38页
     ·表达产物的检测第38-41页
   ·酶活力实验原理第41-45页
     ·考马斯亮兰法测定蛋白质含量的原理第41页
     ·3,5-二硝基水杨酸比色定糖的原理第41页
     ·β-甘露聚糖酶活力测定的原理第41页
     ·蛋白含量测定-考马斯亮兰法(Bradford 法)第41-43页
     ·酶活力测定第43-45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·β-甘露聚糖酶基因的克隆第45-49页
     ·重组β-甘露聚糖酶酶学性质的测定第49-51页
   ·讨论第51-54页
第四章 β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的表达第54-65页
   ·实验材料第55-57页
     ·实验菌株来源第55页
     ·培养基第55-56页
     ·生物化学试剂第56页
     ·酶第56页
     ·主要仪器第56-57页
   ·实验方法第57-60页
     ·菌株的生长第57页
     ·β-甘露聚糖酶基因ORF 的克隆及表达载体的构建第57-59页
     ·表达产物的检测第59-60页
   ·结果第60-63页
     ·β-甘露聚糖酶(man)基因的克隆第60页
     ·β-甘露聚糖酶基因的序列验证第60页
     ·β-甘露聚糖酶基因表达载体的构建第60-61页
     ·β-甘露聚糖酶电转毕赤酵母第61-62页
     ·重组毕赤酵母菌株的筛选与鉴定第62页
     ·重组毕赤酵母菌株的诱导表达第62-63页
     ·重组β-甘露聚糖酶的活力第63页
   ·讨论第63-65页
第五章 小结第65-66页
参考文献第66-74页
致谢第74-75页
论文发表情况第75页

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