| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| ABBREVIATION(缩略词) | 第11-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-43页 |
| 一 昆虫杆状病毒表达系统 | 第13-33页 |
| 1 杆状病毒的分子生物学 | 第13-20页 |
| 2 昆虫细胞/AcMNPV表达系统 | 第20-24页 |
| 3 杆状病毒滴度鉴定方法 | 第24-29页 |
| 4 家蚕/BmNPV表达系统 | 第29-32页 |
| 5 大肠杆菌-昆虫细胞穿梭载体系统(Bac-to-Bac) | 第32-33页 |
| 二 戊型肝炎的研究进展 | 第33-41页 |
| 1 戊型肝炎的流行及临床特征 | 第33-35页 |
| 2 戊型肝炎病毒(HEV)生物学特性 | 第35-38页 |
| 3 HEV诊断及疫苗研究 | 第38-41页 |
| 三 本论文研究的思路、目的和方法 | 第41-43页 |
| 第二章 材料与方法 | 第43-66页 |
| 一 材料 | 第43-50页 |
| 1 主要仪器 | 第43-44页 |
| 2 主要试剂和材料 | 第44-46页 |
| 3 常用溶液及培养基配制 | 第46-50页 |
| 二 方法 | 第50-66页 |
| 1 基因克隆的构建 | 第50-54页 |
| 2 昆虫细胞培养和重组杆状病毒的生产 | 第54页 |
| 3 重组蛋白质的表达 | 第54-55页 |
| 4 重组蛋白的纯化方法 | 第55-58页 |
| 6 VLP的透射电镜观察 | 第58页 |
| 7 单抗的制备 | 第58-63页 |
| 8 免疫实验 | 第63-65页 |
| 9 计算机辅助设计与分析 | 第65-66页 |
| 第三章 结果与分析 | 第66-98页 |
| 第一部分 一种新型杆状病毒滴度鉴定方法的建立 | 第66-79页 |
| 一 杆状病毒vp39基因的克隆、表达与纯化 | 第66-76页 |
| 1 vp39基因的克隆 | 第66-68页 |
| 2 VP39的大量表达及纯化 | 第68-69页 |
| 3 VP39单抗的制备与纯化 | 第69-70页 |
| 4 VP39单抗的鉴定 | 第70-76页 |
| 二 新型杆状病毒滴度鉴定方法的初步建立 | 第76-79页 |
| 1 新型杆状病毒滴度鉴定方法的检测原理 | 第76-77页 |
| 2 病毒用量与蓝斑数目的相关性比较 | 第77-78页 |
| 3 酶联免疫斑点法(ELISPOT)与TCID_50的相关性比较 | 第78-79页 |
| 第二部分 BMNPV家蚕表达系统的初步建立 | 第79-98页 |
| 一 DsRFP在家蚕体内的高效表达 | 第79-82页 |
| 1 重组杆状病毒Bv-DsRFP的构建和生产 | 第79-81页 |
| 2 红色荧光蛋白在家蚕幼虫中的表达 | 第81-82页 |
| 3 重组病毒接种量与家蚕幼虫血淋巴中DsRFP表达水平的关系 | 第82页 |
| 二 戊肝病毒基因Ⅰ型ORF2 112～606aa(I-495)在家蚕体内的高效表达 | 第82-98页 |
| 1 重组杆状病毒BmBv-I-495his的构建和生产 | 第82-85页 |
| 2 I-495his蛋白的表达 | 第85-88页 |
| 3 重组蛋白I-495his的纯化 | 第88-94页 |
| 4 ELISA法定量分析纯化流程 | 第94-95页 |
| 5 电镜观察 | 第95页 |
| 6 重组蛋白I-495his的免疫活性分析 | 第95-98页 |
| 第四章 讨论 | 第98-104页 |
| 一 新型杆状病毒滴度鉴定方法的初步建立 | 第98-100页 |
| 1 VP39特异靶向单抗的获得 | 第99-100页 |
| 2 酶联免疫斑点法鉴定杆状病毒滴度 | 第100页 |
| 二 BMNPV/家蚕表达载体系统的初步建立 | 第100-104页 |
| 1 高滴度重组杆状病毒的筛选 | 第101页 |
| 2 histag的融合表达 | 第101页 |
| 3 宿主及感染方式的选择 | 第101-102页 |
| 4 收取方式的选择 | 第102页 |
| 5 匀浆液的处理 | 第102页 |
| 6 纯化条件的摸索 | 第102-103页 |
| 7 VLP及其免疫效果 | 第103-104页 |
| 小结与展望 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
