缩略语表 | 第6-11页 |
中文摘要 | 第11-15页 |
ABSTRACT | 第15-19页 |
前言 | 第20-22页 |
文献回顾 | 第22-35页 |
1. 白癜风的概述 | 第22页 |
2. 白癜风发病机制的研究现状 | 第22-29页 |
3. 细胞自噬与氧化应激 | 第29-33页 |
4. 白癜风与细胞自噬 | 第33-35页 |
第一部分 氧化应激诱导细胞自噬在人黑素细胞抗氧化损伤中的作用 | 第35-57页 |
1 材料 | 第35-40页 |
1.1 主要实验仪器及设备 | 第35-36页 |
1.2 主要实验用试剂 | 第36-37页 |
1.3 其它材料 | 第37-38页 |
1.4 主要实验溶液配方 | 第38-40页 |
2 实验方法 | 第40-47页 |
2.1 黑素细胞的培养 | 第40-41页 |
2.2 建立体外人黑素细胞氧化应激模型 | 第41-42页 |
2.3 mRFP-GFP-LC3腺病毒的细胞转染 | 第42页 |
2.4 蛋白免疫印迹实验 | 第42-45页 |
2.5 细胞凋亡检测 | 第45页 |
2.6 线粒体膜电位检测 | 第45-46页 |
2.7 细胞内ROS水平检测 | 第46页 |
2.8 电镜检测细胞内自噬小体 | 第46-47页 |
2.9 激光共聚焦显微镜观察自噬小体形成情况 | 第47页 |
2.10 数据统计分析 | 第47页 |
3 结果 | 第47-53页 |
3.1 0.5mM H_2O_2可引起正常黑素细胞出现氧化损伤 | 第47页 |
3.2 H_2O_2诱导的氧化应激对正常黑素细胞的胞内自噬水平影响 | 第47-50页 |
3.3 氧化应激诱导的细胞自噬在正常人黑素细胞氧化损伤中的作用 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-57页 |
第二部分 氧化应激下正常人与白癜风患者黑素细胞自噬水平差异及其调控机制研究 | 第57-81页 |
1 材料 | 第57-58页 |
1.1 主要实验仪器及设备 | 第57页 |
1.2 主要实验试剂 | 第57-58页 |
1.3 其它材料 | 第58页 |
1.4 实验溶液配方 | 第58页 |
2 实验方法 | 第58-65页 |
2.1 人黑素细胞系PIG1及PIG3V的培养 | 第58页 |
2.2 瞬时细胞转染 | 第58-59页 |
2.3 shRNA慢病毒稳定转染 | 第59-60页 |
2.4 实时荧光定量PCR | 第60-63页 |
2.5 细胞核蛋白与细胞浆蛋白的分离提取 | 第63-64页 |
2.6 免疫印迹实验 | 第64页 |
2.7 细胞凋亡比例检测 | 第64页 |
2.8 细胞内线粒体膜电位水平检测 | 第64页 |
2.9 细胞内ROS水平检测 | 第64-65页 |
2.10 激光共聚焦实验 | 第65页 |
2.11 数据统计分析 | 第65页 |
3 结果 | 第65-76页 |
3.1 H_2O_2诱导的氧化应激下白癜风患者黑素细胞较正常人黑素细胞更易受到氧化损伤 | 第65-66页 |
3.2 H_2O_2诱导的氧化应激下正常人黑素细胞与白癜风患者黑素细胞自噬水平差异 | 第66-69页 |
3.3 氧化应激下白癜风患者及正常人黑素细胞中调控自噬关键蛋白表达比较 | 第69-71页 |
3.4 氧化应激下正常人黑素细胞中Nrf2-p62通路对细胞自噬的调控作用 | 第71-73页 |
3.5 氧化应激下白癜风患者黑素细胞中Nrf2-p62通路对细胞自噬的调控作用 | 第73-74页 |
3.6 氧化应激下上调白癜风患者黑素细胞自噬在细胞抗氧化损伤中的作用 | 第74-76页 |
4 讨论 | 第76-81页 |
小结 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-100页 |
个人简历和研究成果 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |